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Une fois la réduction réalisée, il s’agit de précipiter tout le GSH présent.

Mais avec le Cd il se forme du cyanure de Cd insoluble et nuisible au dosage, dont il faut se débarrasser. Les auteurs ont tourné cet obstacle en profitant de la propriété des cyanures de Cd d’être solubles dans un excès de cyanure alcalin et de ne précipiter qu’à pH 7,8 et au-dessus. Pour réaliser ces conditions, on ajoute une solution de lactate de Cd acidifiée par de l’acide acétique qui, en même temps, libère le CNH et acidifie le milieu. On neutralise ensuite à pH 6,8 et l'opération continue comme pour le GSH.

Les auteurs ont préconisé récemment l’acidification par de l’acide trichloracétique à 5 % (119).

Voici donc le glutathion isolé. Le dépôt de glutathion mercaptide de Cd est centrifugé et dissout dans de l’acide phosphorique à 10 %.

On titre enfin par iodométrie en ajoutant un excès d’I M/250 que l’on titre en retour par de l’hyposulfite de soude M/500.

Voyons maintenant l’application détaillée du dosage du glutathion dans les levures. Deux à trois g. de levure fraîche sont pesés exactement, de préférence dans un verre de montre couvert, parallèlement à une autre quantité qui servira à la détermination du poids sec. La levure est passée dans un mortier et bien broyée avec du sable. On y ajoute environ 10 cc. d’alcool à 90° pour tuer les levures et après deux minutes, 10 cc. d’acide trichloracétique à 10 %.

On jette le tout sur un filtre placé dans un entonnoir fixé sur une fiole conique à vide. Le très léger vide qui se forme ainsi suffit à faciliter la filtration souvent trop lente. On lave encore trois fois avec 10 ce. d’acide trichloracétique le mortier et le filtre, jusqu’à disparition de la réaction au