SÉPARATION ET DOSAGE DE LA SÉRINE ET DES GLOBULINES

Sans rentrer dans les discussions théoriques qu'entraine l'emploi des termes sérine et globulines, je désignerai sous le nom de globulines les albumines qui précipitent par SO4#Mg à saturation ou par le sulfate d'ammoniaque à demi saturé ; sous le nom de sérine, le ou les albumines non précipitées par le SO4Mg à froid mais qui le sont ultérieurement par acidulation et chauffage ; encore, celles qui, non insolubilisées par le sulfate d'ammoniaque à demi-saturation, sont précipitées à saturation complète, :

Séparation et dosage des globulines.— 3à 5 cc. de liquide céphalo-rachidien sont additionnés jusqu'à saturation de sulfate de magnésie pur. N'employer qu'un sel recristallisé, celui du commerce donnant des solutions opalescentes.

Quand la saturation est complète, abandonner 24 heures le tube à luimême avant d'effectuer par la diaphanométrie le dosage des globulines. Cette dernière précaution est indispensable sous peine de commettre des erreurs allant du simple au double. Le dosage se fait diaphanométriquement en tenant compte de la dilution qu'a fait subir à la prise d'essai l'addition de sulfate de magnésie. La correction est facile.

Lorsque les recherches de globuline et de sérine portent sur des liquides normaux dont la teneur en albumine est très faible, il est indispensable de concentrer au préalable ces liquides dans le vide à 35° avant de procéder à l'addition de sulfate de magnésie.

Remarque. — Si le liquide examiné renferme des albumoses, la saturation par le sulfate de’ magnésie précipite les albumoses primaires (proto et hétéro), laissant dans les eaux-mères les albumoses secondaires ou deutéro-albumoses (Halliburton).

Séparation et dosage de la sérine.

Le liquide saturé par le sulfate de magnésie est filtré sur un petit filtre.

16 Ke NOÔTIONS TECHNIQUES Ê

2 ce. du filtrat sont additionnés d'acide trichloracétique et portés à l'ébulli-

tion. La sérine se précipite. Attendre vingt-quatre heures avant d'en faire le dosage diaphanométrique. ; .

Méthode au sulfale d'ammoniaque. — En mélangeant au liquide céphalorachidien son volume d’une solution saturée de sulfate de NH4, les globulines précipitent (méthode de Nissi, Connetm, NoxnE et APPELT, COMEL, 1904).

Remarque.— Le sulfate d'NH4 à demi-saturation précipite avec les globulines les albumoses primaires (proto et hétéro), s'il s'en rencontre dans le liquide. Les deutéro-albumoses ne sont insolubilisées qu'à saturation complète.

Méthodes faisant usage, dans un but diagnostic, des recherches de globuline et de sérine. » |

On retrouve dans la littérature du liquide céphalo-rachidien diverses techniques qui, sous le nom de Mélhode de Guillain, de Phase I de Nonne et Appelt, de Méthode de Cimbal, d'Essai bulyrique de Noguchi, ne sont qu'une application des procédés ci-dessus.

Méthode de Guillain (1903). — Guillain sature le liquide à essayer par le sulfate de magnésie. Le résultat est positif si un «flou marqué » apparaît.

Nous reviendrons ultérieurement sur les résultats cliniques ainsi obtenus; disons.seulement qu'après lui: MEYER (1905 et 1907), HENKEL (1907), Smior (1909), ont fait usage de cette technique.

Phase 1, de Nonne et Appelf (1907). — Nonne et Appelt, cherchant une méthode qui puisse fournir des résultats utilisables en clinique, donnent après essai comparatif la préférence au sulfate d'’ammoniaque. L'essai que ces auteurs dénomment phase T se fait en mélangeant des volumes égaux de liquide et d’une solution saturée de sulfate d'NHA. Les tubes abandonnés à eux-mêmes sont examinés au bout de trois minutes ; leur contenu est alors: limpide, opalescent ou trouble. Les auteurs tablent sur ces différences pour conclure. Leur phase I, rarement employée, consiste à saturer complètement le liquide de sulfate d’ammoniaque.

C’est en Allemagne surtout que cette phase I a été utilisée. Citons : Zivert, BILLSTROEM, SCHLESSINGER, MAYER, ZICHELBERG et WIRTH, elc., qui après NonNE et APPELT s'en sont servi. ;

Méthode de Cimbal. — Cimbal procède par précipitations fractionnées au moyen de sulfate de zinc.

Le résultat d'une première précipitation est banal, celui d’une seconde au -contraire ne se retrouverait qu'avec les affections organiques. L'auteur ne sait qualifier de sérine ou de globuline les précipités obtenus.

Essai bulyrique de Nogquchi.

(Diagnostic de la syphilis des centres.)

Dans un essai qui porte son nom, NoGtüci (1) cherchait à précipiter les globulines en excès, indiquant ainsi un procédé qu'il crut spécifique de la syphilis (nerveuse ou pas).

Nocucai mélange 0ec.2 de liquide céphalo-rachidien avec 1 cc. d'acide butyrique à 10 °/, (en volume) — Chauffe quelques +in$tants à l'ébullition — Retire du feu; puis ajoute rapidement Occ.? de soude nermale et fait bouillir de nouveau quelques secondes. L'aspect granuleux du précipité et la tendance qu’il montre à se rassembler en un culot indiquent une réaction

(1) Voyez HAMMARSTEN, Lehrbuch, 6° édit., p. 643.

L'association toujours plus étroite du laboratoire et de la clinique, la mise en œuvre des méthodes bactériologiques, cytologiques et de réactions biologiques délicates ont, depuis quelques années, fait revivre et rajeuni l’Aumorisme d’antan. AE

De toutes les humeurs, le liquide céphalo-rachidien put, à juste titre, être considéré, dès l'apparition de la ponction lombaire, comme susceptible de fournir les renseignements cliniques les plus utiles sur les tissus et les organes au contact desquels il se trouve. :

Les premières recherches furent d'ordre chimique ; et

l'on ne pouvait que souhaiter les voir se continuer et se

perfectionner, lorsque deux méthodes ayant pour elles

l'attrait de la nouveauté: L'examen bactériologique et l'examen cylologique, orientèrent les esprits dans une voie différente.

L'examen bactériologique a donné de très beaux résultats dans les méningites. L'examen cylologique, par sa simplicité apparente, sa mise en œuvre facile dans toute

clinique, acquit la vogue qu'on lui connaît; non toutefois que les résultats obtenus puissent justifier cet engouement ou l'oubli, inconsidéré peut-être, mais réel, des efforts tentés dans une voie différente.

L'examen cytologique, en se bornant à constater la présence d’une réaction leucocytaire, sa nature Iÿmphocytaire ou polynucléaire, reste dans des généralités, manque de précision dans ses réponses.

Ce qui est plus grave, c’est qu'il se trouve souvent en défaut, sans qu'aucun fait puisse en donner la raison. Enfin, de toute façon, il ne peut jamais prétendre éclairer qu'un pelit côlé de la question, l'exode leucocytaire

n'étant qu'un des aspects de la réponse faite par lorga-

nisme à l’agent infectieux ou toxique, qu’un des symptômes du syndrome humoral qu'il y aurait intérêt à

-connaître {out enher, et que seul'un mode d'investigation

différent, s'adressant, on le devine, à la partie « non ‘fiqurée » de l'épanchement, saurait révéler.

L'examen cytologique manque de précision, disais:-je, et cela pär le ‘eu restreint, toujours le même, des formules qu'il présente; par lPimpossibilité matérielle qu'ont les éléments cellulaires en suspension dans le liquide “céphalo-rachidien de s'y répandre d’une manière uni- “forme. "SicaRD lui-même n'a-t-il pas-montré, en 1911, combien variaient les formules et les pourcentages leucocylaires, suivant la position du malade, la hauteur de “la ponction, les mouvements antérieurs du patient, et d’autres circonstances dontil est difficile de tenir compte?

Cet examen est souvent en défaut, Loin de moi de faire 1c1 de ce dernier un procès en règle. Mon intention est seulement de vouloir souligner que les formules ‘anormales, le manque complet deréaction dans des ‘cas où se rencontrent cependant de grosses lésions, ne

Sue a

sont plus à compter. Le lecteur en trouvera dans cette. thèse même plusieurs exemples (1).

De loule façon, l'examen cytologique ne renseigne que sur une partie de la réaction organique. Cette réaction est en effet complexe : avant ou en même temps. que les éléments cellulaires, d’autres constituants dissous du plasma vont sortir des vaisseaux, obéissant chacun, dans cet exode, à des règles, à des influences chimiolaxiques précises. C'est l' ensemble des valeurs présentées par ces nombreux facteurs qui aura, le fait se conçoit, une SIShIfication autrement grande el mieux assise que la seule. considération de l’exodé figurée. Nous ne jugerons-plus une réaction sur une seule de ses caractéristiques, mais: sur un ensemble de fais, sur un faisceau de preuves. On. conçoit sans peine la richesse d'expression et la précision de détails d’un pareil täbleau, l'intérêt de la discussion: des formules obtenues.

Je pourrais ajouter : des formules chimiques, car c'est à

l'analyse chimique que va incomber l'étude de cette partie. sérique, « non organisée », de l'épanchement. Elle seule révèlera ces modalités variées d'un processus inflammatoire, et aussi, selon toute vraisemblance, les fluctuations pathologiques du milieu intérieur, ouvrant au chimiste et au clhinicien un champ d'investigation absolument nouveau, plein de promesses. |

Le simple raisonnement done, la connaissance de ce: qui se passe pour d’autres humeurs, aurait dû laisser les -. auteurs moins indifférents à tout ce qui n’était pas

(1) Voyez le chapitre de la Méningite tuberculeuse.

examen cytolôgique ou réactions biologiques du liquide céphalo-rachidien ; mais l’histoire en a décidé autrement.

Les recherches chimiques sont demeurées courtes et superficielles. Les valeurs obtenues, données comme

supplément d’information, se sont trouvées quelque-

fois inexactes, et toujours, ont été vite perdues dans le flot d’une bibliographie colossale. A tout prendre d’ailleurs, se serait-il trouvé quelqu'un pour rassembler ces résullats, la façon même dont ils étaient présentés ou obtenus me fait douter de l'intérêt pratique qu’eussent présenté les conclusions d’un tel labeur. |

Ou bien les auteurs n’ont, en effet, donné qu'un seul chiffre, ce qui est notoirement insuffisant pour juger d'une formule; ou bien, ayant effectué deux ou trois déterminations, ils les ont publiées avec les rubriques trop vagues d'hémiplégie, de syphilis, de pneumonie ; or, de toute évidence, il y a hémiplégie et hémiplégie, comme hydrocéphalie et hydrocéphalie, pneumonie et

pneumonie. Des complications diverses peuvent exister.

des lésions rénales, nerveuses ou autres se rencontrer, et la formule prendra des allures spéciales, les contituants des valeurs différentes. Ces valeurs, particulièrement intéressanles pour qui sera au courant des particularités cliniques du cas, demeureront incompréhensibles el contradicloires à quiconque n'aurait su, où pu, rentrer dans ces détails.

L'existence enfin de valeurs indéniablement fausses, que nous verrons se rencontrer, aurait achevé de brouiller l'écheveau, déjà difficile à déméler.

Sans doute sur le nombre il s’est trouvé des essais sérieux ; VOoisiN a vu juste au sujet des ‘variations des chlorures ; mais son opinion s'est heurté à un avis autorisé, victime de déterminations erronées, qui a pu