CHAPITRE PREMIER

LE LUS MANICOSIDE

Au cours du printemps de 1929, utilisant la méthode biochimique (1) de recherche des hétérosides dédoublables par l’émulsine, j'ai constaté que ce ferment, agissant sur une solution aqueuse contenant les principes solubles du Laurier de Portugal, détermi-

(1) 11 serait hors de propos de décrire ici les techniques qui permettent d'utiliser les ferments solubles (enzymes ou diastases) en vue de la découverte et de l’extraction des principes immédiats sur lesquels ces agents biologiques sont précisément susceptibles d'exercer leur action. Le travail initial sur cette question a été publié par Em. BOURQUELOT sous le titre : « Recherche, dans les végétaux, du sucre de canne, à l’aide de l’invertine et des glucosides à l’aide de l’émulsine » ; C. R. Soc. Biol., III, 9009, 1901 ; C. R. Ac. Sc., CXX XIII, 600, 1907, Jowrn. Pharm. et Chim., [6], XIV, 4817, 1901.

Mon maître BOURQUELOT, dont je fus, pendant 26 années, le collaborateur fidèle, m'avait associé à ses recherches dans l'élaboration et le développement de ces méthodes que j'ai beaucoup contribué à répandre par l'exemple et par l’enseignement. Elles ont rendu et continuent à rendre d’inestimables services aux chimistes et aux biologistes, en leur fournissant des résultats auxquels l'emploi d’autres méthodes ne serait pas susceptible de les conduire. Pour ma part, je les ai exposées dans maintes publications parmi lesquelles je citerai les suivantes, qui les envisagent à des points de vue variés :

Les Glucosides. — Conférences faites au Laboratoire du Professeur Charles MourEu, au Collège de France, les 13 et 20 janvier 1922 ; Bull. Soc. chim., 1923.

Quelques aperçus sur la recherche, la caractérisation et le dosage d'hétérosides végétaux. — Conférence faite au Congrès de Pharmacie de Liége, 8 août 1930 ; Journ. Pharm. Belg., XII, 1167, 1930.

Généralités sur les hétérosides (en collaboration avec J. RABATÉ) ; article du Tyaité de Chimie organique publié sous la direction des Professeurs V. GRIGNARD, G. Duronfr et R. LOCQUIN (tome VIII, 547-616, Paris, 1938).

Méthodes d’études dans le groupe des hétérosides naturels. — Conférences faites

4 RECHEROHES CHIMIQUES,

nait un fort retour vers la droite de la rotation polarimétrique de la liqueur primitive, ce qui indiquait la présence, dans cette dernière, d’un ou de plusieurs principes hétérosidiques hydrolysables par le ferment. Voici l’essai qui m'a conduit à cette conclusion :

Des rameaux feuillus frais (1), récoltés le 26 avril 1929, ont été traités tels quels, à l’ébullition à reflux, par de l'alcool à 85° employé dans la proportion de 1.000 cm? d’alcoo! pour 100 g. de rameaux. Les ferments solubles ayant été ainsi détruits, la plante a été broyée après refroidissement et traitée à nouveau, à reflux, par la même colature alcoolique. Les liqueurs alcooliques obtenues par décantation et expression du marc, après lavage de ce dernier par de l'alcool neuf, ont été distillées. Le résidu extractif a été repris par de l’eau, de façon à obtenir une colature aqueuse dont 100 cm® correspondaient à 100 g. de rameaux feuillus frais. Cette colature, trouble, a été agitée avec environ les deux tiers de son volume d’éther, puis filtrée ; elle a été ensuite soumise aux actions successives de l’invertine de la levure haute de bière et de l’émulsine d'amande, à la température du laboratoire.

Cette colature, après défécation par un demi-volume d’extrait de Saturne, donnait les résultats suivants, ramenés au volume primitif de la liqueur non déféquée :

Liqueur primitive Rotation Produits réducteurs (100 cm — 100 g. plante fraîche) polarimétrique exprimés en (US) glucose, pour 100 CH

AVANULICSS AIRE CE ET TEE — 1012" o g., 6870 Après action de l’invertine (4 jours).. — 60 3 £., 0045 Après action de l’émulsine (1 jour). — SEE 59 4207 ) ) (17 jours). — 499 4 S., 1850

» » (643 Jours). — 2945" 5 @., 2968

en Hollande, aux Universités d'Amsterdam, de Groningue, de Leyde et d'Utrecht : mars 1934.

Utilisation des diastases au laboratoire du chimiste. —— Conférence faite à l’occasion du Cinquantenaire de l’Institut de Pharmacie Gilkinet, Liége, 1934 ; Congrès de Pharmacie de Liège, 22, 1934.

Sur quelques techniques favorisant l'extraction des hétérosides naturels :

"Pull.

Acad. Méd., CXXI, 472, 1939.

(1) I s'agissait de rameaux jeunes, pourvus de feuilles dans toute leur longueur ; en effet, ils avaient été sectionnés immédiatement au-dessous de la dernière feuille inférieure

ESP USTPANTICOSIDE 5

Remarquons que l'indice de réduction enzymolyhique (x) par rap- RS . 2°317,5 | port à l'invertine, soit 5 RS 482 (puisqu'il y a eu formation ,

de 3,0045 — 0,6870 — 2 g., 3175 de sucre réducteur avec un changement polarimétrique de 4048’ — 49,80) ne correspond pas à l'indice de réduction enzymolytique du saccharose qui est d'environ 605 à la température de 160. Sans nous arrêter à cette observation qui montre, en tout cas, que le saccharose ne doit pas être le seul sucre en cause, nous voyons surtout que l’émulsine, dont l’action s’est longtemps prolongée, a déterminé un retour vers la droite de 3015’, en même temps qu'il est apparu 2 g., 2928 de substance réductrice exprimée en glucose, ce qui conduit à un indice de réduction enzymolytique global de 705, calculé d’après les valeurs trouvées après 643 jours d'action de l’émulsine. Il convient de faire remarquer que l'indice de réduction enzymolytique a subi d'importantes variations au cours de l’action de ce dernier ferment, comme on peut le constater, en le calculant d’après les valeurs respectives des rotations et des quantités de sucre réducteur, trouvées aux divers temps du long essai rapporté ci-dessus.

Ce qu'il faut surtout retenir de cet essai, c’est la preuve de l’existence, en assez forte proportion, dans le Laurier de Portugal, de principes hétérosidiques dont la présence n'avait pas encore été signalée. Il était dès lors indiqué de pousser l'étude du bloc hétérosidique ainsi mis en lumière, en cherchant à en extraire au moins le principal produit constitutif.

Il serait fastidieux de décrire ici en détail les essais nombreux auxquels nous nous sommes livré dans ce but ; nous ne relaterons que quelques points intéressants au point de vue de l'orientation des recherches qui ont conduit au résultat désiré.

Tout d’abord, nous avons. constaté que le principe hétérosidique cherché devait être très soluble dans l’eau et dans l'alcool et que, par suite, le traitement primitif de la plante fraîche pouvait être effectué, soit par l’eau bouillante, soit par l'alcool bouillant.

(x) Je rappelle que l'indice de réduction enzymolytique d'un corps hydrolysable, par rapport à la diastase qui l’hydrolyse, peut être défini : le poids, en milligrammes, des produits réducteurs, exprimés en glucose, formés dans 100 cm° de la solution du corps examiné, sous l'influence du ferment correspondant, pour un changement de rotation de 19, observé au tube de deux décimètres.

Nous avons reconnu, en outre, que les extraits obtenus par concentration des liqueurs aqueuse ou alcoolique cédaient plus ou moins complètement l’hétéroside qu’ils contenaient soit à l’acétone, soit à l’éther acétique bouillants (x).

L'acétone entraînait proportionnellement plus d’hétéroside, mais les solutions acétoniques paraissaient plus impures que celles obtenues avec l’éther acétique. Même après un long temps, ces diverses liqueurs concentrées ne donnaient lieu d’ailleurs à aucune cristallisation.

Nous avons tout naturellement pensé que cet insuccès tenait à ce que les extraits de C. lusitanica sont très riches en impuretés précipitables par le sous-acétate de plomb et que nous réussirions sans doute beaucoup mieux en agissant sur des extraits convenablement déféqués. Mais alors se présentaient plusieurs difficultés : tout d’abord, d’une façon générale, il est toujours dangereux d’utiliser, pour l'extraction d’hétérosides sur les propriétés desquelles on n'est pas exactement fixé, des déféquants qui peuvent isomériser, altérer et quelquefois même détruire le corps cherché ; à ce point de vue, l’unique emploi de dissolvants neutres pour l’extraction des hétérosides est la méthode rêvée, mais non toujours réalisable. Dans le cas présent, nous avions constaté que l'extrait de Saturne ne précipitait pas l’hétéroside de ses solutions extractives aqueuses, mais la défécation de ces dernières nécessitait des quantités relativement considérables de réactif, ce qui entraînait la formation d’abondants précipités plombiques dont la séparation ne pouvait se faire sans de grandes difficultés et sans entraîner de grosses pertes. C’est pour parer à ces divers inconvénients que j'ai dû chercher à mettre sur pied une technique d’extraction qui m'a donné d'excellents résultats. Cette technique consiste essentiellement à obtenir une poudre déféquée, sans que soient nécessaires des filtrations toujours pénibles du fait de l'emploi des déféquants et sans qu’il soit besoin d’évaporer les liqueurs

(x) L'extrait aqueux ou alcoolique de C. lusitamica était traité à l’ébullition à reflux par l’acétone ou l’éther acétique. Après refroidissement, la liqueur d’épuisement était distillée et le résidu de la distillation était repris par l’eau. Sur la solution aqueuse ainsi obtenue, on faisait des déterminations polarimétriques, en même temps que des essais d'hydrolyse par l’émulsine et par l'acide sulfurique dilué ; on pouvait ainsi suivre facilement le passage de l’hétéroside dans le dissolvant considéré.

IPÉREDSTMEAA\ICOSIDE

extractives en présence de réactifs nocifs pour les principes cherchés.

Avant d'exposer comment nous avons appliqué cette technique à l'extraction de l’hétéroside du Laurier de Portugal, nous devons signaler que des essais pratiqués sur la plante convenablement séchée à l’air libre nous avaient montré la persistance de l’hétéroside dans cette dernière. C’est ainsi que des feuilles sèches, traitées directement par l’éther acétique bouillant, nous avaient fourni des liqueurs donnant, après évaporation, un extrait riche en hétéroside puisque, dans certains cas, nous avons obtenu des rotations de près de — 100 (7 — 2), dans des solutions aqueuses dont 100 cmÿ contenaient l'extrait éthéro-acétique provenant de 100 g. de feuille sèche (x).

EXTRACTION D'UN HÉTÉROSIDE

DONPACIRTPREDERPORRUGATAE)

Nous indiquerons seulement un type de préparation, en rappelant qu’on peut partir de la plante fraîche ou de la plante sèche et que, pour le traitement initial, on peut utiliser indifféremment l’eau ou l'alcool bouillants.

1.000 g. de feuille sèche pulvérisée sont traités par 10.000 cm° d’alcoo!l à 80° bouillant ; après refroidissement, on fait, sur le marc de cette première opération, un second traitement identique, avec 5.000 cm° du même alcool. Les liqueurs alcooliques sont distillées

(x) Voici quelques chiffres relatifs au rendement des rameaux frais de Laurier de Portugal en produit sec :

I. 200 g. de rameaux feuillus récoltés le 5 janvier 1932 au Boulay-Morin (Eure) ont fourni, après dessiccation à l'air libre, 95 g. de produit sec total, soit 47,5 p. 100 de végétal frais ; ce produit sec comprenait 16 g. de ramilles et 79 g. de feuilles, soit 39,5 p. 100 du produit frais initial.

II. 330 g. de rameaux feuillus, récoltés le 17 janvier 1932 sur le même arbuste ont fourni 152 g. de produit sec, soit 46 p. 100, se partageant en 32 g. de rameaux nus et 120 g. de feuilles, soit 36,3 p. 100.

III. 400 g. de rameaux feuillus, récoltés le 23 février 1932 sur le même arbuste, ont fourni 190 g. de produit sec, soit 47,5 p. 100, se partageant en 35 g. de rameaux et 155 g. de feuilles, soit 38,7 p. 100.

(2) En raison de l’aide matérielle que M. J. IAFOREST m'a apportée au cours de cette préparation, j'ai associé son nom au mien dans la publication du travail : « Sur un hétéroside extrait du Laurier de Portugal, Cerasus lusitanica X,01S. » ; C. R. Ac. Sc, CXCIV, 1095, 1032 Bull Soc. Chim: biol., KN, 350, 1933.

en présence d’un peu de carbonate de calcium. Le résidu de la distillation est amené avec de l’eau au volume de 1.500 cm environ et la solution aqueuse, agitée avec 5 cmÿ de toluène, est laissée en repos pendant 24 heures. La liqueur aqueuse, séparée par décantation du dépôt qui a pu s’y former, est alors agitée avec environ 500 cmÿ d’éther. La solution aqueuse sous-jacente est ensuite filtrée, puis évaporée, soit sous pression réduite, soit à une douce chaleur, au bain-marie, en présence de quelques grammes de carbonate de calcium, jusqu’à un volume d’au plus 1.000 cmÿ, 1l n’y a d’ailleurs aucun inconvénient à pousser l’'évaporation jusqu'à 750 ou 500 cmÿ.

L’extrait liquide ainsi obtenu, versé dans un mortier, est additionné successivement de 750 cm? de sous-acétate de plomb liquide, de 1.000 g. de sulfate de sodium anhydre et de 250 g. de carbonate de calcium, en ayant soin d'opérer une sérieuse trituration de la masse entre chaque addition des produits mentionnés. Au bout d’un temps qui varie de quelques minutes à plusieurs heures, le mélange a pris une consistance demi-solide ; on le sort alors du mortier et, après l'avoir divisé, on l’étale dans une cuvette de porcelaine plate ; on l’abandonne ainsi, dans une atmosphère sèche, à une dessiccation spontanée. Lorsque le produit ne perd plus de poids, on le pulvérise finement, par exemple en le passant au moulin.

La poudre ainsi obtenue (poudre déjéquée) est traitée à l’ébulhtion à reflux par l’éther acétique (1.000 cm p. 100 g. de feuille sèche initiale). La solution éthéro-acétique, filtrée après refroidissement, est distillée jusqu’à apparition d’un léger trouble dans la liqueur et décantée dans un flacon à large ouverture bouchant à l’'émeri. Le plus souvent, le liquide se prend alors par refroidissement en une gelée semi-consistante ; il suffit d’ajouter une trace d’eau (0 g., 20 p. 100 cmÿ de liquide) et d’amorcer avec l’hétéroside du C. lusitanica (1) pour voir la masse gélatineuse se transformer peu à peu en cristaux légers à peine incolores. On répète le traitement de la poudre déféquée par l’éther acétique bouillant tant que les liqueurs obtenues abandonnent, par concentration, une nouvelle quantité de produit. Nous avons donné à ce dernier le nom de /usttanicoside.

(x) Les premiers cristaux ont été obtenus plus de deux ans après le début des recherches, par superposition d’éther à une solution éthéro-acétique de l’hétéroside,

LE PUSTITANICOSTDE 9

La cristallisation est complète en 2 à 3 jours ; les cristaux sont recueillis par essorage à la trompe et séchés à l’air. Il nous est difficile d'indiquer avec précision le rendement obtenu, celui-ci étant, en particulier, sujet à varier suivant l’époque de récolte de la matière première employée ; il n’est en tout cas jamais négligeable car il ne descend guère au-dessous de 10 g. p. 1.000 g. de feuille sèche.

Pour purifier le Zusitanicoside, on peut le faire recristalliser une ou plusieurs fois, en présence de noir animal, dans de l’éther acétique anhydre, additionné au moment du besoin de 0 cm5, 20 d’eau p. 100 cm; on emploie environ 1.000 cm de dissolvant bouillant p. 10 g. de produit ; il y a intérêt à respecter la proportion d’eau indiquée, car un éther acétique plus hydraté dissout à l’ébullition des quantités notables d’hétéroside, mais ce dernier, au lieu de donner, par refroidissement, des cristaux légers emplissant toute la masse du liquide, se précipite sous forme d’un sirop se transformant lentement en un magma cristallin (x).

PROPRIÉTÉS DU LUSITANICOSIDE

D'une manière générale, ces propriétés ont été déterminées sur un produit recristallisé deux fois dans l’ester acétique, ayant donc subi trois cristallisations.

Propriétés physiques. — 1] se présente au microscope sous forme de longues aiguilles incolores plus ou moins feutrées.

Après dessiccation complète à l'air, 1l ne perd sensiblement pas de poids lorsqu'on le chauffe dans l’étuve à eau bouillante.

Il est combustible sans résidu.

Il est inodore ; sa saveur est légèrement amère.

(1) La nécessité d’additionner l’éther acétique de petites quantités d'eau pour obtenir le lusitanicoside cristallisé semble bien indiquer que ce dernier se forme à l’état hydraté dans la liqueur mère. Par contre, on verra plus loin qu'après dessiccation à l'air, il apparaît à l’état anhydre.

On peut faire également recristalliser, dans l'alcool à 95-96, le lusitanicoside obtenu d’abord par l’éther acétique ; on emploie 5 cm* d'alcool pour 1 g. de l’hétéroside ; mais, dans ces conditions, beaucoup de produit reste dans les eaux-mères.

D'autre part, abandonné à l'air après essorage, encore imprégné d'alcool, le lusitanicoside ne tarde pas à se liquéfier plus ou moins complètement par suite de l'appel de l'humidité atmosphérique par l'alcool ; il faut, immédiatement après l'avoir recueilli, le mettre dans le vide sulfurique ; il devient alors très stable à l'air, comme l’est le produit cristallisé dans l'éther acétique.

Il fond au tube capillaire à 187-1880.

Il est extrémement soluble dans l’eau, assez soluble dans l’alcool à 05°, peu soluble dans l’éther acétique froid, insoluble dans l’éther.

La détermination du pouvoir rotatoire, faite en solution aqueuse sur plusieurs échantillons de produit complètement séché à l'air, a donné les résultats suivants :

Produits ayant subi seulement 2 cristallisations :

I. [ol, = — 730,52 (v = 25 cm5, / — 2, p = 0 g., 9973, à = — 5952"). IL. [oh = 730,37 (0 = 10 cm?, / = 2, p = O g., 4295, a = 6012"). III. [al, = — 730,93 (0 = 25 cm?, / = 2, p — 1 g., 3920, à —= — 8014). Produits de 3° cristallisation :

IV, [oln = — 749,69 (d — 25 cm°, / = 2, p — 08, 9084, a = 50581), Ve = 710 38 25 Cm VC? 0 2 00 0 0502) NL oO IS So ME 2 NP RE 00 500) NI GR = 140 7 = om, Dis oo ae)

Produit obtenu par l’éther acétique, recristallisé dans l’alcoo! à 95-06: :

VDM = TN = Cr So Et, MONO cr 1072")

Propriétés chimiques. — Le lusitanicoside ne donne pas de cyanure par fusion avec le sodium ; il n’est donc pas azoté.

Traité à l’état pulvérulent par l’acide chlorhydrique, la lessive de soude, l’ammoniaque, l’eau de brome, le perchlorure de fer, il ne donne lieu à aucune réaction colorée.

L’acide sulfurique le dissout en donnant une liqueur rouge-brun qui se décolore par addition d’eau. À froid, on n’observe aucune coloration avec l'acide azotique ; par chauffage au bain-marie bouillant, on obtient un résidu jaune citron donnant avec l’eau une solution fortement colorée en jaune.

La solution aqueuse de lusitanicoside ne donne pas de précipité avec le sous-acétate de plomb.

Le lusitanicoside n’est pas réducteur : un essai, pratiqué suivant la technique de BERTRAND, avec 0 g., 2026 d’hétéroside, n’a donné leu à aucune réduction de la liqueur cupro-alcaline.

Hydrolyse par les acides. — Les acides minéraux, dilués et bouillants, hydrolysent assez rapidement le lusitanicoside.

LETUSITANTCOSIDE II

Ainsi, on à maintenu dans l’eau bouillante, pendant 3 heures 30 minutes, en tube scellé, 20 cm* d’une solution aqueuse contenant, pour 100 CmM', 2 g., 50 d'acide sulfurique et 1 g., 0968 de lusitanicoside., La liqueur, devenue fortement aromatique, s’est troublée par refroidissement ; après filtration, elle a fourni un liquide limpide, incolore, dextrogyre (a — + 1°, / = 2), contenant, pour 100 cm’, 1 g., 4862 de produit réducteur, exprimé en glucose, Soit 74,4 p. 100 d’hétéroside.

Remarquons que la rotation observée ne s'accorde pas avec l'hypothèse de la seule présence du glucose 4 dans la liqueur d’hydrolyse, qui donnerait « = + 1933 (! — 2).

Hydrolyse fermentaire. — L'action de l’émulsine (r) s'étant montrée extrêmement lente dans l’essai biochimique rapporté au début de ce travail, nous avons utilisé, pour pratiquer cette hydrolyse, une poudre fermentaire obtenue en lixiviant, par l'alcool à 83-84° froid, une poudre de feuilles sèches de C. lusitanica récoltées en Janvier ; on a employé 800 cm* d'alcool p. 100 g. de poudre. Cette dernière, après dessiccation à la température ordinaire, a été ensuite mise à macérer pendant 24 heures avec de l’éther (20 cm® p. 1 g. de poudre), essorée puis séchée à l'air.

I. On a fait agir à la température du laboratoire o g., 40 de cette poudre sur 40 cm* d’une solution aqueuse contenant, pour 100 cm, 1 g., 9946 de lusitanicoside. La liqueur s’est rapidement troublée, en même temps qu’elle dégageait une odeur nettement plus agréable que celle observée au cours de l’hydrolyse sulfurique. Après 5 jours, l’action du ferment paraissait arrêtée. On a trouvé alors que la liqueur contenait, pour 100 cm*, o g., 7920 de matière réductrice exprimée en glucose, soit 30,7 p. 100 d’hétéroside primitif ; la rotation était — 8’ (7 — 2).

IT. Après action de o g., 50 de poudre fermentaire sur 25 em* d’une solution d’hétéroside à 3 g., 9880 p. 100 cm*, pendant 6 jours, dans les mêmes conditions, la liqueur contenait p. 100 cm*, 1 g., 6353 de produit réducteur exprimé en glucose, soit 41,0 p. 100 d’hétéroside primitif.

IIT. Une solution aqueuse à 3 g., 9850 d’hétéroside p. 100 cm, additionnée de 2 g. de poudre fermentaire, accusait, après 12 jours, une rotation de 20 —07)Iet Contents Cyyéide sucre réducteur, SOit 410,3 p.100 d’hétéroside..

IV. Une solution aqueuse à 2 g., 0300 d’hétéroside p. 100 cm* additionnée de 1 g. de poudre fermentaire avait, après 3 jours, une teneur en sucre réduc-

(1) L'étude de l’action de l’émulsine sur l’hétéroside pur sera abordée plus loin.

teur de o g., 7940, soit 39,1 p. 100 d’hétéroside. Après de nouveau 7 jours, la rotation étant de a — — 6’ (? — 2), la teneur en sucre réducteur s'était élevée à o g., 8207, soit 40,4 p. 100 d’hétéroside.

V. Une solution aqueuse à 2 g., 006 d’hétéroside p. 100 cm*, additionnée de 1 g. de poudre fermentaire, donnait après 10 jours 39,3 de sucre réducteur p. 100 d'hétéroside primitif et avait une rotation de — 6" (7 = 2).

Il nous a paru qu'il y avait avantage à ne pas opérer le dédoublement fermentaire sur une solution trop concentrée d’hétéroside nécessitant, pour arriver au dédoublement complet, l'emploi d’une trop forte quantité de poudre fermentaire, susceptible de gêner plus tard l'isolement des composés résultant de l’hydrolyse.

VI. Aïnsi, une solution aqueuse contenant, p. 100 cm”, 3 g., 9992 de lusitanicoside et additionnée d’un gramme de poudre fermentaire donnait encore, après 29 jours, une rotation de — 46" (7 — 2) et contenait seulement 1 g., 4279 de sucre réducteur, soit 35,7 p. 100 d’hétéroside primitif.

On voit que l’hydrolyse acide conduit à l'obtention d’une quantité de produit réducteur qui, estimé en glucose, s'élève presque au double de celle que fournit l’'hydrolyse fermentaire paraissant arrivée à son terme (essais I à V).

Ces résultats peuvent s'interpréter en admettant que, dans le lusitanicoside, existerait un ho/oside non dédoublable par la poudre fermentaire, mais hydrolysable en oses par les acides. Parmi ces oses, ne semblent pas figurer de pentoses, car ni la solution d’hétéroside, n1 les liqueurs d’hydrolyse ne nous ont fourni, avec l’orcine chlorhydrique, la réaction colorée, caractéristique de ces derniers.

A côté des sucres, le lusitanicoside fournit par dédoublement un aglycone odorant, paraissant partiellement altéré au cours de l'hydrolyse acide, qu'on peut extraire par l’éther des liqueurs d’hydrolyse fermentaire.

Cet aglycone liquide, entraînable par la vapeur d’eau, présente les caractères d’un phénol ; il est soluble dans les solutions alcalines d’où le précipitent les acides sous forme de gouttelettes huileuses. Il est très peu soluble dans l’eau ; quoique très diluée, cette solution aqueuse donne une coloration bleue avec le perchlorure de fer. En solution sodique, il donne avec le chlorure de benzoyle un composé cristallisable en longues aiguilles prismatiques incolores.

BERPOSIMPEANIOCOSIDE 13