DÉTERMINATION DE LA CONSTITUTION

DOSSIER TCOSTDEM IE)

En vue de déterminer la constitution chimique du lusitanicoside, j'ai poursuivi l'étude de ses produits de dédoublement et, plus particulièrement, de ceux résultant de son hydrolyse par les

acides.

Hydrolyse du lusitanicoside par l'acide sulfurique dilué.

On a maintenu pendant 3 heures au bain-marie bouillant la solution suivante :

Lusitanicoside, cristallisé trois fois, séché à l’air jus-

GUAMDOIAS CONSTANTE Le Me ee nl CURE HA OS OS SO eSUroMeNTÉmMMOBMC corse. 125 CM° AUS OI RER EE CLOS DAS OOICIMS

Cette solution contenait ainsi à l’origine, pour 100 cm*, 2 g., 091 de lusitanicoside et 2 g., 50 d’acide sulfurique ; elle accusait, après chauffage, une rotation de + 1026” (Z — 2) et une teneur endsucren réducteur exprimé en glucose :deu222, 24007 Ce QUI conduit pour le produit réducteur à un pouvoir rotatoire global

4. TOO El, = — = 22 12 2400 ne contenait, en dehors du sucre réducteur, aucun autre produit actif sur la lumière polarisée (x).

La liqueur d’hydrolyse, fortement trouble, a été filtrée sur papier après complet refroidissement ; elle a laissé sur le filtre un résidu huileux qui sera étudié plus loin. Le filtrat a été neutralisé par le carbonate de calcium, puis distillé sous pression réduite. Les premières portions du distillat étaient troubles et, finalement, le distillat s’éclaircissait à nouveau complètement.

- 319,8, en admettant que la liqueur

(1) H. HÉRISSEY, « Sur le lusitanicoside » ; C. R. Ac. Sc., CXCVIIL, 265, 1934 ; Journ. Pharm. et Chim., [8], XIX, 425, 1934 ; Bull. Soc. Chim., biol. XVI, 527, 1934;

(1) Je ferai remarquer que ce pouvoir rotatoire + 310,8 est très voisin de celui + 320, 2, que doit donner un mélange équimoléculaire de glucose d ([olp = + 5295; C,H,,0, = 180,093) et de rhamnose ou isodulcite ([a]p = + 109,1 d'après C. Tan- RET ; C,H,,0, = 164,093), mélange dans lequel les proportions de glucose et de rhamnose sont respectivement de 52,3 et de 47,6 p. 100 (C,H,,0, + C;H,,0, = 344180).

Isolement ef caractérisation du glucose d.

Le résidu de la distillation a été repris à reflux par 5 cm’, 5 d’eau à laquelle, après quelque temps de chauffage au bain-marie, on a ajouté 95 cm d'alcool à 95°, de façon à avoir finalement une liqueur titrant 89-00. Il est resté un peu d’extrait non dissous. On a filtré après refroidissement et amorcé avec du glucose 4. La liqueur a peu à peu donné, sur cette amorce, des cristaux dont la quantité, après une dizaine de jours, ne paraissait pas sensiblement augmenter. Les cristaux ont alors été essorés, lavés avec 10 cm° d’alcool à 45°, puis séchés à l'air ; on en a recueilli I g., 90.

Ce produit, recristallisé dans l'alcool a été identifié au glucose 4 : son pouvoir rotatoire définitif, en solution aqueuse, a été trouvé :

Ci = (on D OS 00, ie 20)

il possédait la mutarotation positive (a — + 2058’, ! — 2, après 9 minutes de dissolution).

On a déterminé son pouvoir réducteur d’après la méthode de BERTRAND : O g., 0700 de matière correspondaient à o g., 1451 de cuivre (chiffre déterminé expérimentalement pour le glucose par G. BERTRAND : 0 g., 1445). Enfin, notre sucre a fourni avec la phénylhydrazine une osazone fondant instantanément sur le bloc MAQUENNE à la même température (2280-2302) que de la glucosazone type et que son mélange avec cette dernière.

1solement et caractérisation du rhamnose.

Avec la liqueur mère qui avait ainsi fourni du glucose, on a repris, par chauffage à reflux, la partie restée indissoute de l’extrait provenant de la liqueur d'hydrolyse. Comme la solution ainsi obtenue ne donnait pas de cristaux, même après un assez long temps, on l'a évaporée, au bain marie, en consistance de sirop clair qui a été amorcé avec du rhamnose. Il s’est alors formé sur cette amorce des cristaux relativement volumineux, qui ont été essorés à la trompe et lavés avec quelques gouttes d’eau ; on en a ainsi recueilli 4 g., 50. Ces cristaux ont été délayés dans une petite quantité d’eau, essorés à nouveau et séchés à l’air libre. Ils présentaient toutes les propriétés du rhamnose hydraté, C,H,,0;. OH. .

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Ils fondaient au tube capillaire à 90°. Le point de fusion instantané de l’osazone, préparée par réaction avec la phénylhydrazine, a été trouvé, au bloc MAQUENNE, situé aux environs de 190°, simultanément avec celui de la phénylrhamnosazone type et celui du mélange de notre osazone et de cette dernière.

Le pouvoir rotatoire, en solution aqueuse, d’abord lévogyre (mutarotation négative) a été trouvé finalement [an — + 80,78 ro CD 08 4002141052)

Les liqueurs mères d’hydrolyse, qui avaient ainsi fourni successivement du glucose d et du rhamnose, ont été distillées ; le résidu extractif a été dissous dans l’eau et soumis à la fermentation alcoohique par la levure haute des boulangers, de façon à le débarrasser du glucose. On a pu ainsi obtenir, par traitement convenable de la liqueur fermentée, de nouvelles quantités de rhamnose.

… L’hydrolyse du lusitanicoside par l'acide sulfurique dilué a donc fourni du glucose d et du rhamnose ; d’autres sucres (oses) que ceux-ci n'ont pu être caractérisés dans les produits de l’hydrolyse (x).

Isolement et caractérisation de l'aglycone.

Dans notre premier travail sur le lusitanicoside, nous avons indiqué que ce composé, à côté de sucres réducteurs, fournit, par hydrolyse, un aglycone liquide, entraînable par la vapeur d’eau, présentant des caractères de phénol (solubilité dans les liqueurs alcalines, coloration bleue avec le perchlorure de fer), donnant avec le chlorure de benzoyle, en solution sodique, un composé cristallisable en longues aiguilles prismatiques incolores.

Dérivé benzoylé de l’aglycone du lusitanicoside. — Ce dérivé benzoylé a été obtenu par diverses voies :

a) Ainsi le résidu huileux, mentionné précédemment, abandonné sur le filtre par la liqueur d’hydrolyse sulfurique a été dissous dans l’éther ; la solution éthérée, déshydratée par le sulfate de: sodium anhydre et soumise à l’évaporation spontanée, a laissé un résidu liquide, limpide, brunâtre, du poids de 1 g., 86. Ce résidu

(1) En particulier, la recherche des pentoses par l'orcine, en milieu chlorhydrique, a donné des résultats négatifs.

a été traité par un mélange de 375 cm d’eau, 125 cmÿ de solution de soude à 4 g. p. 100 cm8 et 2 cm de chlorure de benzoyle. Après agitation et quelques heures de contact, il s’est fait un précipité cristallisé légèrement jaunâtre, qui a été essoré, lavé à l’eau et séché Aa NN 2760):

b) Le distillat (400 à 500 cm*) de la liqueur d’hydrolyse filtrée a été de même additionnée de 100 cm° d lessive de soude diluée et de 2 cm® de chlorure de benzoyle. Il s’est fait un précipité cristallisé, blanc de neige, pesant, après lavage et dessiccation à l'air, De SE

c) L’hydrolyse biochimique du lusitanicoside, effectuée avec la poudre jermentaire, permet d’obtenir l’aglycone par extraction à l’éther de la liqueur fermentaire ; la solution éthérée, desséchée sur sulfate de sodium, abandonne, après évaporation spontanée, l’aglycone liquide qui, traité par la soude et le chlorure de benzoyle, fournit un dérivé incolore, parfaitement cristallisé.

d) J'ai pensé alors que ce dérivé benzoylé pourrait être avantageusement obtenu à partir du distillat de la plante elle-même, après broyage et contact d’un certain temps avec de l’eau, de façon à provoquer le dédoublement du lusitanicoside qu’elle contient, à la manière dont on obtient de l’acide cyanhydrique et de l’aldéhyde benzoïque, par hydrolyse du prulaurasoside de la feuille de Laurier-cerise.

L'expérience a confirmé cette prévision : ainsi, 500 g. de feuilles fraîches de Laurier de Portugal, récoltées en janvier, ont été broyées et mises à macérer avec 4 fois leur poids d’eau, soit 2.000 cmÿ. Après environ 8 heures de contact à la température ordinaire, on a distillé le mélange en maintenant constant le volume du liquide contenu dans le ballon distillatoire, par affusion d’eau s’écoulant goutte à goutte d’une ampoule à robinet. On a ainsi obtenu 2.000 cm de distillat auquel on a ajouté 30 cm$ de lessive des savonniers et 8 cm* de chlorure de benzoyle ; on a recueilli, après lavage et dessiccation, 2 g. de produit benzoylé.

À des différences de rendement près, on obtient le même résultat positif, en opérant sur des feuilles récoltées à divers moments de l'année. De même, les feuilles sèches de Laurier de Portugal, conservées dans de bonnes conditions, n’ayant pas pris de teinte brune

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au cours de la dessiccation, distillées après macération dans 10 à 15 fois leur poids d’eau, donnent un hydrolat permettant de préparer le même dérivé benzoylé.

Il est toujours nécessaire de distiller une assez grande quantité de liquide, l’aglycone du lusitanicoside n'étant que lentement entraîné par la vapeur d’eau ; il est d’ailleurs facile de suivre la marche de la distillation en utilisant le perchlorure de fer dilué qui provoque l'apparition d’une coloration bleue dans le distillat, tant qu'il passe de l’aglycone.

Le dérivé benzoylé peut être facilement purifié et être obtenu tout à fait pur par recristallisation dans l’alcool à 95° (20 cm pour 1 g.) ; les eaux-mères alcooliques, après séparation des cristaux, additionnées à chaud d’eau distillée jusqu'à commencement de trouble, laissent encore déposer, à un état très pur, la plus grande partie du produit resté en dissolution.

Je me suis assuré de l'identité des divers échantillons du dérivé benzoylé obtenus par les diverses voies qui viennent d’être décrites. Le composé est, dans tous les cas, rigoureusement le même ; tous les produits et les divers mélanges qu'on en peut faire entre eux fondent à 720-730.

Dérivé méthylé de l’aglycone du lusitanicoside. — L'aglycone du lusitanicoside donne en milieu aqueux alcalin, en présence de sulfate de méthyle, un dérivé liquide, insoluble dans les alcalis, ce qui confirme la présence, dans l’aglycone, d’au moins une fonction phénol.

Comme pour le dérivé benzoylé, j'ai pu obtenir ce dérivé méthylé soit à partir de l’aglycone extrait des produits de l’hydrolyse acide ou fermentaire du lusitanicoside, soit à partir des distillats de macérés aqueux de feuille fraîche ou sèche de Laurier de Portugal. Le dérivé méthylé étant liquide ne peut, contrairement au dérivé benzoylé, être séparé par filtration du milieu liquide dans lequel il se forme ; il doit en être extrait par l’éther.

Les distillats peuvent fournir directement le méthyl-aglycone par traitement par la soude (1 g. OHNa pour 100 cmÿ) et le sulfate diméthylique (0 cm, 5 pour 100 cmÿ) ; on peut aussi, — mais sans que cette façon de procéder présente quelque avantage, — extraire d’abord l’aglycone du distillat par l’éther et traiter ensuite l'aglycone ainsi isolé par le sulfate diméthylique, en milieu sodique.