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l'examen microscopique qui peut-être suivie pour n'importe quelle tache avec d'autant plus d'avantages qu'on à le plus souvent affaire à des taches mixtes.
40 Il cherche d’abord les globules rouges du sang avec le liquide de Virchow ou de Vibert.
À l’aide d’une pince, on saisit une écaille où un pelil lambeau découpé dans le tissu maculé. on le porte dans un verre de montre où se trouvent deux ou trois souttes de liquide de Virchow ou de Vibert. On attend que l’écaille se ramollisse, quelquefois on est oblige de la broyer.
Sur la platine d'un miscrocope est placée une lame de verre au-dessus de laquelle à l’aide d'une aiguille on met une goutte du liquide de la préparation. Pour la recouvrir une lamelle couvre-objet saisie entre les mors d’une pince est déposée sur la préparation en évitant d’emprisonner des bulles d'air. On cherche au microscope le grossissement convenable, c'est ordinairement un objectif 3 etun oculaire 1 de Verich. et l'on examine.
2° Que la tache ait ou n'ail pas de globules, M. le professeur Florence l’essaie ensuite par l’eau ou l'eau
et la glycérine.
= Pource faire, avecles mêmes précautions que précédemment on met une écaille où un lambeau dans un verre de montre qui contient deux gouttes d'eau distillée. On attend que lécaille de méconium ait gonflé où donne comime le petit lambeau un léger trouble dans l’eau indiquant une dissolution partielle. Une goutte du liquide est alors porte sur une lame de verre disposée sur la platine d'un microscope, la
préparation couverte dune lamelle et l'on examine avec le grossissement convenable.
Alors le sang montre ses globules blancs ou son lacis de fibrine, le végétal ses trachées déroulables, ses cellules végétales ou ses spores, le minéral ses grains amorphes ou ses cristaux, le sperme, l'urine leurs cellules spécifiques, le mucus ses globules el ses cellules plus où moins déformées.
Marche à suivre spéciale aux taches de méconium.
Les deuxiépreuves précédentes peuvent suffire à la rigueur pour un examen micrographique. Mais comme d’une part dans une expertise « on n’a le droit d’être affirmatif que lorsqu'on trouve l'élément anatomique lui-même » (Lacassagne, Taches, in Diet. Dechambre) et que d'autre part les produits organiques sont constitués au microscope par une substance fondamentale plus ou moins banale et des éléments plus spécifiques, on à tout intérêt à mettre ces éléments en relief sur la substance fondamentale. A cette fin on dispose des réactions microchimiques etdes colorants variant avec chaque substance soumise à l'examen.
1 Réactions microchiniques.
1e Pigment : Bilirubine. Nous avons déja parlé dans l'examen chimique de la tache de la coloration violet
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‘pâle que l'acide nitrique nitreux donne à une préparation microscopique du méconium.
2 Mucus. Avec l'acide acétique, le mucus voit son état strié rendu plus caractéristique sans qu’il perde sa transparence. Le même réactif fait au contraire disparaître l’état strié de la fibrine et l'aspect fibrillaire du tissu lamineux. Cette réaction a bien sa valeur si l'on observe que.mucus, fibrine, tissu lamineux, d'aspect microscopique à peu près semblable, se colorent également.
3° Cholestérine. La cholestlérine a aussi ses réactions microchimiques (Voir art. Bile de Dastre dans le Dict. de Physiol.de Richet), maiselles paraissent superflues après la constatation de ses cristaux. |
20 Colorants.
Les médecins légistes usent quelquefois du picrocarmin. L'acide picrique a une préférence marquée pour les cellules de la peau et semble par conséquent désigné pour l’examen du méconium du neuvième mois; il présente l'inconvénient d'avoir une couleur analogue à celle dela bile qui colore mucus et cellules.
Pellocani s’est servi pour le méconium d’éosine. On reproche à l’éosine de tout colorer sans élection.
On peut se servir avec avantage du liquide de M. le professeur Florence.
La mucosine (Voir Histologie: Mucus), d'après Hoyer fixe directement l'hematoxyline el colore en violet rouge sombre au contact de la thionine. Les mucus
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salivaire, buccal, stomacal ne se colorent pas, tandis que le mucus de l'intestin grêle, surtout celui du gros intestin se colorent aussi vivement que la substance fondamentale du cartilage el la substance gélatineuse du cordon.
Mais les affinités histochimiques de la mucosine pour les couleurs basiques d'aniline, reconnues par Schmidt, couleurs dont on se sert communément pour les microbes, sont beaucoup plus pratiques.
Quand on se sert de la fuchsine, il ne faut pas employer des solutions trop faibles, fait observer Schmidt, par conséquent il faut laisser la solution ammoniacale pour la solution alcoolique. De même pour le bleu de méthylène on se sert d’une solution alcoolique avec addition de 0,01 de lessive de potasse (Lafler). Ces solutions se comportent à merveille et font paraître par exemple d’un bleu intense tout ce qui est mucus, tandis que les cellules intactes demeurent relativement plus pâles (Schmidt).
Conservation des Préparations.
Quand une préparation paraît démonstrative on peut la montrer dans la glycérine ou le baume du Canada.
Si l’on se sert de la glycérine il est bon de rappeler qu'elle doit être saturée d'alun pour être mêlée aux couleurs d’aniline, en usage avec le méconium.
On emploie dans le laboratoire de M. le professeur:
Florence la gélatine glycérinée de Kaiser qui se prépare comme il suit : On fait ramollir pendant environ deux heures une partie en poids de gélatine française la plus pure dans six parties d’eau distillée, on y mêle ensuite sept parties de glycérine chimiquement pure et à 100 grammes de ce mélange, on ajoute un gramme d'acide phénique concentré. On chauffe pendant 10 à 15 minutes en agitant continuellement jusqu'à ce que les flocons formés par l'addition de l'acide aient disparu. On filtre à chaud sur du coton de verre tres . fin, lavé à l’eau distillée et encore humide. Le baume du Canada durcit au bord de la lamelle et ferme exactement la préparation.
La lamelle d’une préparation montée dans la glveé4 rine se fixe à la lame par le bitume de Judée. Quand la préparation est montée à la glycérine gélatinée, celle-ci par le refroidissement devient assez ferme pour qu'il soit supertlu de lutter autrement.