CL. BKKNARD. — I’hénomùnes. il

CORPS BIRÉFRINGENTS DE l’oküF.

Les mêmes faits ont été constatés sur des œufs de tortue et des œufs de caméléon.

Des expériences directes m’ont fourni plus tard la contreépreuve de l’observation précédente. Si l’on prend la lécithine (mélangée de cérébrine) qui forme la substance des coi'ps biréfringents et qu’on l’agite avec de l’eau albumineuse, la substance gonfle et perd en partie ses caractères optiques; elle les recouvre lorsque l’eau s’est évaporée.

L’influence de la dessiccation sur l’apparition des corps polarisants était mise ainsi en pleine évidence. C’est vraisemblablement cette condition physique et non pas une condition physiologique, comme l’avait cru M. Dareste, qui présidait aux oscillations observées durant le cours du développement dans la proportion des corps polarisants. On sait (pie l’œuf de poule subit, du commencement à la tin de l’incubation, une perte d’eau, et l’on comprend en conséquence le fait de l’augmentation parallèle des corps biréfringents dans la vésicule ombilicale du fœtus. Au moment de l’éclosion et dans les jours qui suivent, elle ne renferme pas autre chose. Quant au foie de l’embryon ou du jeune animal, il nous a toujours présenté des corpuscules extrêmement volumineux et ne ressemblant en rien aux véritables granulations glycogéniques. Ajoutons que la présence de ces corpuscules n’a rien d’inattendu pour les physiologistes, qui savent que l’on a, depuis quelques années, signalé et même dosé la lécithine dans la sécrétion du foie.

En résumé, la dessiccation nous fournissait un excellent moyen d’obtenir en quantité suffisante la matière à examiner; mais en même temps qu’elle mettait ce moyen entre nos mains, elle nous apprenait à nous en passer. Sachant, en effet, que les corps biréfringents 11e sont qu’un état physique particulier d’une substance qui existe abondamment dans l’œuf, on pouvait rechercher directement cette substance sous son état diffus, sans se restreindre à ses concrétions biréfringentes.

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C’est là ce que je fis de concert avec M. Moral.

Examen successif des différentes substances contenue dans l'œuf. — Tout d’abord, nous écartâmes l' hypothèse que les corps polarisants de l’œuf pourraient être de la leueine. Outre que les rapports de celte substance avec l’albumine et les albuminoïdes, dont elle est un produit de dédoublement ou de destruction, rendaient peu vraisemblable son existence dans l’œuf frais, une autre raison excluait à priori cette substance, à savoir, l’abondance des corps polarisants dans l’œuf desséché. Une telle proportion de leueine n’aurait pas échappé aux chimistes qui, pour faire l’analyse de l’œuf, commencent précisément par le soumettre à la dessiccation. Or aucune analyse n'en fait mention.

Cependant, en raison du peu d’autorité qu’ontpour nous les raisonnements à priori, nous voulûmes soumettre à l’épreuve expérimentale l’hypothèse de la nature leucique des corps de l’œuf. Nous préparâmes de la leueine en assez grande quantité et aussi pure que possible; nous l’avons obtenue sous les deux états, en boules et en lames cristallines, cette dernière forme correspondant au maximum de pureté. Dans un cas ni dans l’autre nous n’avons reconnu de propriété optique comparable à celle des corps biréfringents de l’œuf ; le plus souvent, lorsque la leueine est en boules, elle est opaque pour la lumière transmise. Le résultat est tout aussi négatif avec les composés leuciques, par exemple le chlorhydrate.

Les corps analogues à la leueine, les amides de la série grasse, furent soumis aussi à l’examen. La tyrosine fut préparée et examinée dans la lumière polarisée. Quoique biréfringente, comme la leueine, elle n’offre pas le caractère de la croix.

Corps gras et dérivés. — La cholestérine, puis les corps gras et leurs dérivés furent ensuite soumis à l’épreuve. L’oléine, la margarine, la stéarine, la palmiline et la rétine dissoutes n’ont pas donné lieu à des observations qui soient

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à mentionner, an moins pour le but que nous poursuivons en ce moment.

Les acides gras méritent d’être signalés. L’acide margarique et, à un moindre degré, les acides oléique et stéarique forment des groupements microscopiques de cristaux divergeant à partir d’un point central, et souvent d’une façon t rès-régulière. Ces boules cristallines réalisent les conditions physiques nécessaires à la production des croix de polarisation, à savoir, la disposition de particules biréfringentes symétriquement distribuées autour d’un point ou d’un axe. De fait, on voit apparaître la croix de polarisation, mais elle présente une constitution qui rend impossible la confusion avec les corps de l’œuf. Les branches de la croix, au lieu de former un champ uniformément brillant, sont sillonnées de traits radiés obscurs; en un mot, on distingue parfaitement les houppes d’aiguilles cristallines dont le groupement a produit le phénomène. L’aspect est assez caractérisé pour qu’on puisse le faire servir, dans l’analyse chimique qualitative, à la reconnaissance des acides gras. Mais il y a des combinaisons des acides gras qui présentent des phénomènes tout aussi distinctement que les corpuscules de l’œuf : le savon d’oléate de soude est dans ce cas. Que l’on neutralise l’acide oléique ou que l’on saponifie l’oléine pure avec la soude, on obtient une masse glulineuse qui, dissociée dans la glycérine et examinée au microscope polarisant , fournit des croix très-nettement dessinées.

On peut dès lors se demander si les corps biréfringents de l’œuf sont formés par un savon de ce genre, par exemple par l’oléatc de soude. L’abondance des corps gras de l’œuf permet une telle supposition. Le jaune ou vitellus contient en effet, en moyenne, d’après les analyses de Gobley (1), une proportion de 21,30 pour 100 de marga-

(I) Gobley, Journal (le pharmacie et de chimie |3], t XII, p. 12.

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rine et d’oiéinc ; d’autre part il contient aussi une petite proportion de soude plus ou moins énergiquement engagée dans des combinaisons. Les éléments du composé polarisant existent donc, et l’on est fondé à rechercher si le composé lui-même n’existerait pas, et s’il ne formerait pas précisément la matière des corpuscules polarisants.

L’expérience répond négativement. Les analyses de l’œuf ont bien fourni une proportion considérable de margarine et d’oléine, mais jamais d’acides gras libres ou de savons. Gobley a particulièrement insisté sur ce point, qui était capital pour ses recherches. En second lieu, les bases alcalines ne sont pas libres, mais combinées à des acides énergiques, chlorhydrique, sulfurique; de plus, leurquantité est extrêmement faible en comparaison des corps gras à saponifier, et insignifiante en comparaison des corps polarisants à la constitution desquels elles devraient participer.

A la vérité, certains traitements et l’incubation ellemême peuvent faire apparaître dans l’œuf une proportion notable d’acides gras, stéarique, margarique et phosphoglycérique. Mais c’est par la destruction d’une combinaison naturelle, la lécithine, dans laquelle ces corps sont engagés et d’où ils sortent sans être neutralisés. Cette lécithine, véritable savon de cliolinc, est, d’ailleurs, susceptible de fournir par elle-même, comme nous le verrons, les corpuscules biréfringents les plus remarquables.

La conclusion de ces faits et de la longue discussion à laquelle nous venons de nous livrer est que les corps gras, ne peuvent, pas plus (pie l’amidon ou laleucine, être invoqués pour expliquer les corps polarisants de l’œuf. Certains savons, les oléates entre autres, conviendraient parfaitement à en rendre compte; nous pensons même que quelques corpuscules polarisants peuvent avoir cette composition, mais dans les conditions normales c’est le très-

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polit nombre. La grande masse des corpuscules, sinon la totalité, est formée d’une autre matière dont nous devons poursuivre la détermination.

Parmi les matériaux de l’œuf, il ne reste plus que deux groupes à examiner : d’abord les matières albuminoïdes, qui donnent lieu à des observations intéressantes; en second lieu les matières grasses phosphorées, lécithine et cérébrine, qui contiendront la solution du problème.

Matières albuminoïdes. — Le jaune d’œuf renferme une variété d’albumine qui a reçu le nom de vitelline , une petite quantiléd’albumine véritable et des traces de caséine. La vitelline seule est en proportion suffisante pour être dosée : le jaune d’œuf de poule en contient 15,76 pour 10(1 (moyenne), d’après Gobley; l’œuf de carpe en renferme I i pour 100; les œufs de Tortue contiennent une substance identique ( parav itell ine) .

Toutes ces substances sont certainement biréfringentes. Biot a découvert, comme l’on sait, que l’albumine était lévogyre, et depuis lors plusieurs auteurs ont mesuré son pouvoir rotatoire. Néanmoins, lorsque ces substances sont pures, elles ne présentent pas des groupements tels, qu’elles puissent manifester la croix de polarisation : la dessiccation ne détermine pas des figures régulières.

Les conditions changent dès que les albumines sont unies aux bases ou aux sels alcalino-terreux. M. Ilarling (d’Utrecht) (1) a observé qu’en mélangeant suivant des procédés particuliers le carbonate de chaux à l’albumine, on obtenait des corpuscules ou calcosphèrites, qui seraient formés de la combinaison des deux substances (calcoglobuline ); ces corps présentent des zones concentriques, et manifestent de la façon la plus nette la croix de polarisation. La gélatine, le sang, ont donné matière à des observations de même nature. De notre côté, et avant d’avoir connaissance des travaux de M. Ilarling, nous avions obtenu

(I) Ilarling, Recherches de morphologie synthétique. Amsterdam, 18 ci.

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des résultats analogues. M . Morat et moi nous mélangeâmes un jour à une masse de vitellus quelques cenlimètres cubes d’une solution concentrée de baryte; le lendemain, il y avait dans la profondeur et surtout à la surface du mélange, un nombre immense de corpuscules polarisants plus petits (pie ceux de l’œuf et de forme moins régulièrement sphérique. L’albumine d’œuf bien pure, traitée de la même manière, nous a donné des corps d’une régularité parfaite présentant les croix avec les anneaux isoebromatiques et les couleurs de la polarisation lamellaire. La vitelline, la sérine se comportent comme l’albumine. Toutes les substances albuminoïdes ou collagènes (gélatine, osséine), mélangées à la solution de baryte, se recouvrent d’une pellicule exclusivement formée de ces sphérules polarisantes. D’autres bases (pie la baryte et la chaux, d’autres sels que les carbonates, présentent, au degré près, les mêmes phénomènes.

En résumé, nous avons vu que le plus grand nombre, sinon la totalité, des principes azotés de l’organisme peuvent, sous l’iulluence des sels alcalino-terreux, fournir des corpuscules biréfringents.

Arrivés à ce point de notre recherche, nous voyons que notre problème a complètement changé de face. La question est pour ainsi dire renversée : il semblait difficile au début de trouver une substance de l’œuf qui ollril le phénomène de la croix; maintenant au contraire, il serait difficile d’en trouver une qui ne le présentât point. L’embarras est de choisir parmi ces matières celle qui entre véritablement dans la composition des corpuscules décrits, et d’éliminer les autres.

Un moyen précieux d’élimination se présente. Les composés alcalino-terreux de la vitelline et des autres albuminoïdes sont insolubles dans l’alcool et dans l’éther, et ce