CHAPITRE III

Pour pratiquer une séro-agglutination, deux éléments sont nécessaires :

Le sérum d’un sujet syphilitique :

Des tréponèmes que, faute de culture pratiquement utilisable, nous recueillons au niveau de lésions syphilitiques en activité.

Le sérum est facile à obtenir; il n’en est pas de même des tréponèmes ; aussi insisterons-nous sur la façon de les recueillir dans des conditions favorables.

À. — Choix du fournisseur des tréponèmes.

Il est de la plus haute importance de choisir avec soin le sujet sur lequel on prélèvera les fragments de tissu syphilitique et, avec eux, les tréponèmes.

Plusieurs conditions indispensables sont, en effet, à observer de façon rigoureuse : |

Les lésions doivent renfermer un grand nombre de tréponèmes. En s'échappant des particules organiques dans le liquide de la préparation, ceux-ci doivent être assez abondants pour que leur agglutination soit possible. Nous estimons qu'un chiffre d'au moins cinq à six tréponèmes est nécessaire par champ de l'objectif à immersion pour que des amas stellaires puissent se former.

Puis, il faut, et nous insistons sur ce point, ne prélever, en même temps que les fragments riches en tréponèmes, qu’aussi peu que possible de la sérosité des accidents. Partant, les lésions syphilitiques suintantes ne nous paraissent pas les plus favorables.

Or, à ces deux points de vue, les différentes manifestations de la syphilis se comportent de façon très différente.

30 SÉRO-AGGLUTINATION DES TRÉPONÈMES

$ 1. Syphilis primaire. — Il est admis que sur un chancre on trouve des tréponèmes à peu près dans tous les cas, surtout si l’on a recours à l'ultra-microscope. Mais, si leur constance ne fait guère de doute, leur abondance est interprétée différemment par les auteurs (1).

Krzysztalowicz et Siedlicki (2) les trouvent très nombreux, plus que dans toute autre manifestation syphilitique, au moins jusqu’au douzième jour. Coles (3) les voit également en grand nombre.

Cependant, Doutrelepont (4) constate, dès 1905, de très grandes variations d’un sujet à un autre, et chez un même sujet d’une préparation à la suivante. Nicolas, Favre et André (5) recherchent les tréponèmes, souvent en vain, dans le chancre. Milian (6) les trouve constamment dans les plaques muqueuses et seulement dans 90 p. 100 des chancres; Thibierge, Ravaut et L. Le Sourd (7), Bayly (8), Gastou et Comandon (9) les constatent beaucoup plus souvent et en plus grande abondance dans les manifestations secondaires que dans l’accident initial.

Quant à nous, nous eûmes six fois recours à des chancres pour y prélever les tréponèmes nécessaires à nos réactions : cinq chancres génitaux, un chancre de la lèvre inférieure. Cinq fois, les tréponèmes furent rares ou nuls. Dans le dernier cas (malade 5), il s'agissait de deux chancres voisins : sur la petite lèvre, d'allure phagédénique et au niveau desquels nous constatâmes de nombreux tréponèmes ; ils disparurent d’ailleurs rapidement après cinq injections de cyanure de mercure.

Nous ne pouvons donc confirmer les observations de Comandon, d’après lequel les chancres jeunes se recommandent particulièrement pour obtenir des tréponèmes en abondance.

8 2. Syphilis secondaire. — C'est surtout aux manifestations muqueuses secondaires de la syphilis que nous nous sommes adressé.

Dix malades, atteintes de syphilides érosives nous ont, chaque fois, donné des tréponèmes, mais leur nombre fut très variable d’un sujet à un autre. Quatre de ces essais n’ont pu, pour cette raison, être utilisés.

(1) Voir Levaptrr et RocHÉ, loc. cit., p. 235. (2) Krzyszrazowicz et Siepcickt, Monaïshefte f. prakt. Dermatclog., Bd. XLVI, h. 9, 1°* mai 1908, pp. 423-435.

(3) Coces, The British Med.Journal, 1909, 8 mai, pp. 1117-1120. (4) DourTRErEPoNT, Niederrhein. Gesellsch. f. Nalur. u. Heilk. Bonn; Sitz, d. med. Abt., 11 déc. 1905, p. 66.

5) Nicocas, FavrEe:et ANDRE, Lyon Médical, 1905, n° 40, pp. 497-513. 6) Miciaw, Soc. méd. des Hôpitaux, 26 mars 1909, n° 12, p. 636. 7) TuiBleRGE, SAvAUT et L, LE Sourp, Soc. méd. des Hôpitaux, 6 avril 1906. 8) BayLzy, The Lancet, 11 sept. 1909, p. 782. 9) Comanpow, Thèse, p. 101; Gasrou et ComanDox, Soc. méd. des H6pil., 19 mars 1909

Les syplulides papuleuses des muqueuses, dont on admet habituellement la richesse en tréponèmes, ne nous ont pas toujours donné les meilleurs résultats. Certes, dans les sept observations de cette catégorie, les tréponèmes n'ont jamais manqué, mais leur abondance y fut très irrégulière, souvent même d'un essai à l’autre (chez la même malade), et l’on s'expose ainsi à des pertes de temps inutiles.

Les plaques muqueuses papulo-hypertrophiques, largement sessiles et végétantes de la région génitale ne nous ont, au contraire, que bien rarement donné des mécomptes. Sur 27 malades, atteintes de ce type de lésions deux seulement n'ont offert qu'un nombre insuffisant de tréponèmes.

Ces formes de syphilides hypertrophiques sont fréquentes dans la clientèle de l'hôpital Broca; c’est donc à elles que nous nous sommes adressé pour la plupart de nos recherches. Le nombre de tréponèmes qui exsudent des grumeaux prélevés chez ces malades est parfois extrême; il attein plusieurs centaines dans le même champ ou même échappe à toute numération. On peut presque alors parler de cultures pures et l’on conçoit que de telles préparations soient particulièrement favorables pour comparer l’action des sérums syphilitiques et non syphilitiques sur les tréponèmes.

$ 3. Organes d’hérédo-syphilitiques. — Nous avons, enfin, à deux reprises utilisé des fragments d’organes d'hérédo-syphilitiques prélevés à l’autopsie. Les tréponèmes y étaient en grand nombre, bien mobiles vingtquatre heures encore après la mort; ils convenaient parfaitement aux essais. La rareté d’un tel matériel d'étude, à l'hôpital Broca, nous a, seule, empêché de multiplier nos recherches dans ce sens. Les frottis de foie furent les plus riches, puis ceux de la rate, des poumons.

B. — Choix des lésions syphilitiques.

Il ne suffit pas qu’un malade présente des lésions où les tréponèmes soient très abondants ; il faut encore que ceux-ci ne présentent aucune tendance spontanée à s’agglutiner, tendance qui, nous le verrons (deuxième partie, chap. VI), est liée à la présence de la sérosité que l’on entraîne parfois dans la préparation en même temps que les tréponèmes.

$ 4. Lésions suintantes. — Il faut donc éliminer soigneusement toute manifestation syphilitique trop riche en sérosité. Ce sont surtout les plaques trop humides, trop suintantes, qui, à la moindre érosion, donnent une quantité par trop considérable de sérum, et avec celui-ci des anticorps

32 SÉRO-AGGLUTINATION DES TRÉPONÈMES

de la malade. À passer outré, on risque d'observer souvent des auto-aggluünations. \ PCR

C'est, pour n'avoir pas observé cette précaution fondamentale, que la plupart des auteurs, croyons-nous, ont constaté cette auto-agglutination et n’ont pu continuer leurs recherches. Bien plus, la plupart d'entre eux conseillent même de recueillir la sérosité des lésions syphilitiques pour obtenir des tréponèmes. Hoffmann fait ses premiers essais avec la sérosité d'une papule; Landsteiner et Mucha constatent l'auto-agglutination des tréponèmes dans le suc d’une syphilide papuleuse, non étendu de sérum physiologique ou humain.

Zabolotny va plus loin. Il n'utilise pour ses tentatives de séro-agglutination que le sérum obtenu avec une ventouse de Bier, au niveau de plaques syphilitiques. C’est encore la technique que suivent Comandon, Joltrain et Fouquet. Il nous paraît alors assez naturel que, mettant du même coup, en présence, entre lame et lamelle, des tréponèmes et du sérum syphilitique {celui du fournisseur de tréponèmes lui-même) ils observent des agglutinatons, qui peuvent, à première vue, être considérées comme une auto-agglutination. Nous-même avons souvent fait cette petite expérience; qu'avec le grumeau on charge fortement la lame de sérosité, très souvent, en une heure, les tréponèmes seront agglulinés.

Il faut donc choisir une malade dont les manifestations syphilitiques ne présentent aucun suintement spontané ni même provoqué par une légère excoriation. d

Les syphilides cutanées papuleuses, qui auraient l'avantage de ne donner que peu de sérosité au grattage, sont trop pauvres en tréponèmes pour être utilisées.

S 2. Lésions humides, non suintantes. — Nous conseillons, et c'est la technique qui nous a presque toujours réussi, de choisir une malade dont les plaques exubérantes vulvaires sont fermes, peu ou pas suintantes, encore que recouvertes d’un mince exsudat puriforme.

Les plaques hypertrophiques un peu anciennes (trois à quatre semaines) et qui n'offrent par elles-mêmes, sans traitement, aucune tendance spontanée à la rétrocession nous paraissent les plus favorables. Leur consistance est en général assez ferme grâce au début d'organisation d'un tissu de sclérose ; elles sont encore humides mais non suintantes, leur surface se laisse facilement excorier au moins superficiellement. Dans ces conditions, les tréponèmes sont obtenus en nombre très suffisant et avec le moins de sérosité qu'il est possible.

Nous conseillons, de plus, de choisir, parmi les nombreuses plaques hypertrophiques génitales que présentent certaines de ces malades, celles

qui. tout en restant humides, sont situées le plus loin de la ligne médiane. Le contact des sérosités vaginales, si fréquentes chez ces sujets et si riches en gonocoques ou spirilles, ne peut, en effet, que gêner l'observation.

Les plaques en voie de cicatrisation ou seulement de régression sponlanée ne sont pas toujours défavorables ; on trouve parfois un grand nombre de tréponèmes au centre de la lésion, en dedans du liséré cicatriciel.

C. — Influence du traitement sur l'abondance des tréponèmes dans les lésions.

$ 1. Traitement général. — On sait que le traitement général anti-syphililique exerce une action manifeste sur les tréponèmes, au niveau des accidents. Parfois, en six à sept jours, aprèsune injection de mercure, de calomel notamment, ils disparaissent, complètement ou à peu près, des accidents cutanés ou muqueux. Lévy-Bing (1) cite cependant des observations de Brônnum, de Courtellemont, de Flügel, de Galli-Valerio et Lasueur, de Spitzer, etc., où le nombre de tréponèmes ne fut que peu influencé par le traitement mercuriel ; il est vrai que celui-ci fut réduit dans certaines de ces observations à une seule injection. A ce point de vue, nous signalerons l'observation de la malade 5 (tableau A), chez laquelle cinq injections de cyanure de mercure suffirent pour rendre les tréponèmes rares dans un chancre où 1ls fourmillaient auparavant. Deux injections de cyanure agissent de même chez la malade 65, au niveau de plaques érosives vulvaires ; .même effet, quoique atténué, chez les malades 13, 38 après cinq et dix piqùres de cyanure. En dehors de ces quelques exemples, nous nous sommes assuré, à de multiples reprises, qu'une malade, ayant subi un traitement régulier et récent, ne peut être ulilisée pour la séro-agglutination.

$ 2. Traitement local. — Le traitement local n'a pas moins d'importance. Metchnikoff et Roux (2), Bodin (3), Maisonneuve (4), Krzysztalowicz et Siedlicki (5) ont déjà insisté sur sa puissance antiseptique et notamment sur celle de la pommade au calomel au tiers. Nous-même (6) avons pu constater qu'une seule application du crayon de nitrate d'argent ou de teinture d’iode suffisait pour stériliser les plaques pendant quatre à cinq

(1) Lévy-Bic, le Microorganisme de la syphilis, 1907, p. 257. (2) Mercawixorr et Roux, Ann. de l'Inst. Pasteur, 1906, v. XX, n° 10, p. 785. (3) Bonin, Ann. de Dermat. et de Syphiligr., 1905, p. 987. (4) MaisoNNEUVE, Thèse Paris, 1906.

(5) Kezvyszrazowicz et SIEDLICKI, Monaishefte f. prakf. Dermatolog., Bd. XLVI, h. 9, 1908, pp. 123-435.

(6) JeanseLmeE et Touraine, Soc. méd. des Hôpitaux, 29 juillet 1910.

34 SÉRO-AGGLUTINATION DES TRÉPONÈMES

jours ; les tréponèmes ne pullulent à nouveau qu'après un délai d'une semaine environ. L'action des pommades et des solutés antiseptiques est moins active, elle ne s'exerce que pendant trois à quatre jours en général.

Il s'ensuit que nous devrons soigneusement éliminer toute malade qui aurait subi une cautérisation locale de ses accidents moins de huit jours avant l'expérience.

Et bien plus, nous avons souvent constaté qu'un simple lavage à l’eau savonneuse, ou même à l’eau pure, suffit pour raréfier considérablement les tréponèmes à la surface des plaques. Plusieurs fois, un premier examen dénonçait des tréponèmes en abondance et, après un bain tiède d’un quart d'heure, la surface des lésions était presque stérilisée.

Il faut donc, autant que possible, ne prélever de tréponèmes que quelques heures après que la malade a procédé à des soins de toilette.

Ces indications, longues et minutieuses, paraïîtront peut-être fastidieuses; elles seront utiles à tous ceux qui voudront répéter ces expériences et leur permettront d'éviter de longs tâtonnements et des pertes de temps considérables.

Pour nous résumer, on choisira une malade, atteinte, depuis plus de trois semaines, de plaques hypertrophiques vulvaires fermes et point trop friables, sans tendance marquée à la rétrocession. Cette malade n'aura pas subi de traitement général (arsenic ou mercure) ni de cautérisation locale depuis au moins huit jours.

D. — Prélèvement des tréponèmes.

Pour tout prélèvement, la malade est mise en position gynécologique, sur une table à spéculum par exemple, la région génitale étant en bonne lumière, face au jour. Sitôt l'opération terminée, les plaques sont recouvertes d’une étoffe, d’un imperméable pour éviter leur dessiccation; souvent une exposition à l'air, un peu prolongée, suffit, en effet, pour diminuer le nombre des tréponèmes superficiels.

S1. Procédés divers. — Nous avons toujours procédé par grattage. C’est a mn façon d’avoir des fragments aussi pauvres que possible en sérosité.

Nous avons, parfois, dans le but d’avoir un plus grand nombre de tré-

ponèmes, essayé les techniques recommandées par certains auteurs. Zabolotny et Maslakowetz (1) appliquent la méthode de Bier avec une ventouse en caoutchouc ou un appareil métallique, garni de verre et adapté

(1) ZaBoLorNy et MASLAKOWETZz, Soc. de Microbiolog. de Saini-Pélersbourg, 23 févr.

LS

à une seringue d'aspiration. C'est également la ventouse de Bier qu'émploient Gastou,, Comandon, Joltrain, Fouquet, Herxheimer et Lôüser (1) aspirent la sérosité à la seringue. Levaditi et Petresco (2) ont imaginé d’appliquer, pendant plusieurs heures, un vésicatoire sur une plaque syphilitique; les tréponèmes seraient alors nombreux dans la sérosité recueillie et dans les couches superficielles de la petite ulcération ainsi formée, Flexner (3) a les mêmes résultats, mais plus rapidement par un léger badigeonnage de la plaque à l'ammoniaque.

Par ces divers procédés, nous avons certainement obtenu de nombreux tréponèmes, mais guère plus que par le simple grattage ; ils sont noyés dans la sérosité, et, pour les raisons que nous avons dites, ne peuvent être utilisés pour la réaction.

Voici comment nous procédons :

La plaque est détergée grossièrement, avec un tampon d'ouate hydrophile, de l’exsudat puriforme plus ou moins liquide qui la recouvre. Cette simple friction superficielle suffit, en général, pour mettre à nu une surface blanc grisâtre, formée d’un exsudat plus épais, plus adhérent. On arrive au même résultat, en passant, légèrement, sur la plaque, le dos d’un scalpel.

Cette couche puriforme, que nous enlevons ainsi, contient trop souvent un nombre considérable de Spirochaele refringens de Schaudinn, au point de gêner l'examen; les tréponèmes y sont du reste rares. La proportion de ces deux espèces devient inverse lorsqu'on exfolie un peu plus profondément ; plus loin encore, on ne trouve que des tréponèmes (Coles) (4). Cette pauvreté de la surface des accidents est du reste un fait bien connu et que Flügel (5), Stone (6), Thibierge, Ravaut et L. Le Sourd (7), Comandon (8), entre autres, ont signalé. Elle a élé confirmée par les constatations histologiques de Ehrman (9), de Capelli (10).

S 2. Répartition des tréponèmes dans les plaques syphilitiques. — Nous avons remarqué que, dans les syphilides papuleuses, les tréponèmes étaient surtout abondants au sommet même de la papule.

Dans les syphilides élalées, en surface (chancre, ide érosives),

(1) Herxneimer et Lôser, Münch med. Wchn., 1905, n° 46, ee nov., p. 2212. 1 (2) Levaniri et PETREsCo, Presse médicale, 1905, n° T8, p- 617.

(3) FLExNER, Med. News, v. LXXXVI{, n° 24, p. 105, 9 déc, 1905.

(4) Coces, The Brilish Med. Journal, 1909, 8 mai, pp. 1117-1120.

(5) Fzueer, Deulsch. med. Wchn., 1905, n° 44, p. 1755, 2 novembre. . (6) SronE, J. Am. Med. Ass., v. LIT, 1 partie, n° 12, 20 mars 1909, p- 960. (7) TuiBierGE, Ravaur et L. LE Sourp, Soc. méd. des Hôpit., 6 avril 1906. (8) Comanpow, Thèse, p. 33.

(9) Eurmann, Dermalolog. Zeitschr., Bd. XI, H. 6, pp. 393-400, 1906.

(10) Capezur, Giorn.ilaliano delle Malat. veneree, 1908, fasc. III.

36 SÉRO-AGGLUTINATION DES TRÉPONÈMES

c’est à la périphérie de l’ulcération, près de la très mince collerette épidermique qui la circonscrit, qu'on trouve le plus de tréponèmes ; c'est aussi ce qu’a constaté Bayly (1). Il ne faut cependant pas prélever de fragments au niveau même de cette collerette ; les tréponèmes sont trop rares dans les cellules épidermiques. |

Sur les plaques hypertrophiques tout point de la surface exhaussée peut parfaitement convenir.

En dehors de ces indications générales, il faut cependant savoir que certaines lésions, les chancres, les syphilides érosives notamment, présentent une disposition irrégulière de leurs tréponèmes. Ils pourront pulluler dans une lame tandis que la préparation suivante, montée avec un fragment prélevé à côté du précédent, n’en contiendra qu’un petit nombre. Les coupes en série de Blaschko (2) rendent suffisamment compte de ce fait. Cet accident est beaucoup moins fréquent quand on examine des plaques hypertrophiques.

Les données précédentes permettent ainsi de choisir le point de la lésion syphilitique où le prélèvement sera, sauf exception individuelle, le plus riche en tréponèmes.

$ 3. Prélèvement du fragment leucocytique. — L'instrumentation est des plus simples. Un vaccinostyle, un scarificateur suffit; nous avons, le plus souvent, utilisé un bistouri au tranchant émoussé, mais sans ébréchures.

On gratte alors, aussi légèrement que possible, la surface de la plaque, détergée comme nous l’avons dit, jusqu’à ce que l’on ait détaché un mince fragment de la surface adhérente.

Nous ne conseillons donc pas, loin de là, de chercher à obtenir le sérum d'irritation, Reizserum de Hoffmann ou bien la rosée séreuse de Nicolas, Favre et André (3). Ces procédés conviennent parfaitement si l’on désire obtenir rapidement de nombreux tréponèmes pour affirmer un diagnostic. Coles (loc. cif.), Doutrelepont (loc. cit.), Mac Donagh (4), Flügel (Loc.

cit), Batroff (5), Mucha (6), Thibierge, Ravaut et L. Le Sourd (loc. cit.), Gastou, Comandon, etc., recommandent également cette technique, nous l’avons nous-même souvent utilisée.

Mais, pour pratiquer une séro-agglutination, l’excision de la fine pellicule superficielle doit se faire sans suffusion sanguine et encore moins sans

1) Bayzy, The Lancet, 1909, 11 sept., p. 782.

2) BLascuko, Berlin. klin. Wchn., 1907, n° 12.

3) NicoLas, FAvRE et ANDRE, Lyon Médical, 18 juin 1905, n° 25, p. 136.

+ Mac DoxaGu, Brilish Journ. of Dermalology, t. XXXI, sept. 1909, p. 290. 5) Barrorr, Monthley Cyclop. a. med. Bull., Philadelphie, 1909, p. 103.

( ( ( ( ( (6) Mucua, Med. Klinik, 1908, n° 39, 27 sept., p. 1498.

sérosité. À enfreindre cette recommandation, on risque d’obtenir, à bref délai, une auto-agglutination et à voir, de ce fait, tous les résultats faussés.

Aussi, quand, par mégarde, on a provoqué quelque minime suffusion sanguine ou séreuse, il faut assécher soigneusement la plaque avant le prélèvement suivant et rejeter la première préparation.

Les copeaux, ainsi enlevés au bout du scalpel, devront autant que possible ne point être trop friables ni se dissocier quand on les place dans le sérum ou quand on les recouvre de la lamelle ; l'abondance de granulations protéiques libres rendrait alors illisibles ces préparations.

Leurs dimensions importent peu ; il suffit qu’ils ne soient pas trop épais pour que le foyer de l'objectif à immersion puisse explorer toute l'épaisseur de la couche liquide qui les entoure. Les fragments que nous prélévions d'habitude mesuraient de 1 à 2 millimètres de diamètre.

C’est donc, dans son ensemble, la technique indiquée par Landsteiner et Mucha (1).

E. — Préparation des lames.

$ 1. Récolte des sérums. — On prélève 4 à 2 centimètres cubes de sang, soit à une veine du pli du coude, avec les précautions aseptiques d'usage, soit par ventouse scarifiée. Les instruments, seringues, verres à ventouses, etc., auront toujours été ou bien bouillis dans une solution de sérum physiologique ou bien parfaitement séchés par évaporation rapide; il est indispensable, en effet, d'éviter l’hémolyse dans les sérums.

On peut encore se contenter de recueillir quelques gouttes.de sang par piqûre du doigt.

Le sérum est ensuite décanté soit par centrifugation (on peut sans inconvénient ajouter un peu de citrate de soude à 5 pour 1000, pour éviter la coagulation), soit et mieux en laissant rétracter le caillot. Quelques gouttes suffisent pour la réaction.

Les sérums doivent être parfaitement clairs, non hémolysés ; ils peuvent être lactescents.

$ 2. Montage des préparations. — Une goutte de ce sérum est mise sur une lame, bien nettoyée ; puis, sitôt le fragment prélevé, il est déposé sur la lame, en plein sérum. On laisse tomber doucement la lamelle.

Le liquide se répand uniformément entre les deux surfaces de verre ; si

(1) LANDSTEINER et Muca, Wiener klin. Wehn, 1906, n° 35, p. 1349.

38 SÉRO-AGGLUTINATION DES TRÉPONÈMES

le fragment est trop épais, une légère pression suffit alors. Il faut éviter les: bulles d'air, elles favorisent la déssiccation rapide.

L'examen de cette lame doit durer, pour être complet, plusieurs heures; les lames se dessèchent, en moyenne, en cinq à sept heures, il est donc nécessaire de les luter. On peut, dans ce but, sertir la préparation d'huile, de vaseline, de cire à cacheter ; la paraffine, fusible à une faible température, est d’un emploi très pratique.

Un protocole ‘de l'opération est toujours rédigé. Chaque lame, numérotée, est inscrite avec le nom ou le numéro de la malade qui a fourni les tréponèmes; l'origine du sérum à examiner est également inscrite ainsi que l'heure à laquelle les fragments de tissu syphilitique ont été mis en contact avec le sérum.

F — Uitra-microscope.

$ 1. Dispositif. — Le modèle d’ultra-microscope n'importe que médiocrement, pourvu qu'il soit pratique, bien éclairant, facile à installer et surtout de mise au point rapide. On trouvera tous les détails bibliographiques relatifs à la théorie et à la pratique de l’ultra-microscope dans les excellents articles de Gastou (1), de Levaditi (2), de Comandon (3;.

Nous avons surtout utilisé le dispositif de Leitz ; moins d’une minute suffit, avec un peu d'habitude, pour l'installer et le centrer convenablement. Presque tous les examens ont été faits avec un fort bec Auer; il constitue une source lumineuse très suffisante. Nous recommandons l’usage d'écrans pour garantir la préparation contre la lumière directe qui peut gêner à certaines heures de la journée.

Les plus forts grossissements ne sont pas les plus avantageux pour suivre les différentes phases d’une séro-agglutination. L'objectif à immersion au 1/12° de Leitz, avec un oculaire faible et un tirage du tube à 17 centimètres permet de voir très suffisamment les tréponèmes et d'explorer avec rapidité les diverses couches de la préparation.

__ S2. Action de l'ultra-microscope sur les tréponèmes. — On s’est demandé si les rayons lumineux et caloriques de la source d'éclairage n’exerçaient

point quelque action nocive sur les tréponèmes, surlout si l'examen se prolonge.

(1) Gasrou, l'Ultra-microscope, J.-B. Baillère, 1910; Presse médicale, 1908, n° 30, p. 237; Gasrou et COMANDON, Soc. méd.des H6pit., 19 mars 1909. (2) Levaniri, Ann. de Dermat. et de Syphiligr., v. X, n° 2, 1909, pp. 119-130.

(3) ComanDon, Thèse Paris, 1909, pp. 11-28; Ann. des Malad. vénériennes, 1909, t. IV, n° 2, pp. 96-110, février.

Nous ne le croyons pas: en tout cas, cette action doit être très faible. Il nous est arrivé de laisser des Préparalions plus de deux heures sous le microscope, en plein éclairage, sans que, pour cela, les tréponèmes aient seulement diminué de mobilité et encore moins aient montré quelque dégénérescence.

Au surplus, toutes les lames étaient examinées, chacune à leur tour et pendant un temps sensiblement équivalent ; elles ont été, sur ce point, placées dans les mêmes conditions; elles restent comparables.