REMPLISSAGE DES BALLONS ET DES TUBES

plus ou moins longue (fig. 8), ou une effilure latérale, sinueuse à concavité inférieure (fig. 9). Le col des ballons est dans ce dernier cas bouché à lu ouate (a, fig. 9). Pendant le flambage, les micro-organismes qui peuvent exister à la face interne des tubes et ballons sont détruits; l'air qu'ils contiennent est raréfié; la ouate se roussit et'lorsqu'ils se refroidissent dans le fourneau même, l'air chauffé, calciné pour ainsi dire, rentre dans les flacons en passant sur la ouate. Il est tout à fait pur de germes.

Pour remplir un tube à effilure avec du bouillon pendant que la solution nutritive bout à Tair libre dans une capsule de porcelaine, on passe rapidement l'effilure dans la flamme d'une lampe à alcool, on casse son extrémité sans choc, après y avoir tracé un trait àia lime, on repasse de nouveau la section dans la flamme, et on introduit l'effilure ainsi ouverte dans l'infusion en ébullition. On aspire doucement par le col du tube ; le liquide monte dans l'effilure, puis redescend lentement dans le tube. Lorsqu'il est suffisamment rempli, on chasse la goutte du liquide qui reste à l'extrémité de l'effilure et on la ferme à la lampe.

On agit exactement de la même façon pour remplir un ballon portant une effilure à son corps.

Pour conserver une assez grande quantité de bouillon préparé, on peut employer des ballons stérilisés sans effilure qu'on remplit du bouillon filtré. Ces ballons, dont on ferme le col à la lampe d'émailleur, sont chauffés dans un bain de chlorure de calcium à la température de 113". Le meilleur appareil pour chauffer ces ballons consiste dans l'autoclave fabriqué par Wisnegg et qui représente une grande marmite de Papin fermée hermétiquement et bien boulonnée, qui se chauffe au gaz par sa partie inférieure et qui est munie d'un manomètre. Il est facile de porter ainsi la tempéi'ature à 130° en vase clos.

Si l'on veut avoir une série de tubes Pasteur remplis de bouillon, on se sert des tubes stérilisés à double réservoir de la figure 9, qui présentent deux effilures latérales dont l'extrémité inférieure est fermée à la lampe, et dont le goulot est rempli d'ouate. Ces tubes sont à cheval sur le montant d'une planchette.

On casse le col d'un ballon fermé rempli de l'infusion en ayant soin de tracer d'abord un trait à la lime, on suit ce Irait avec un morceau de charbon enflammé de façon à obtenir une cassure circulaire. On prend successivement chacun des tubes, on casse leur extrémité, on la flambe, on l'introduit dans le ballon et on aspire la liqueur; on replace chacun de ces tubes à cheval sur la planchette (fig. 11). Quand ils sont tous remplis, on les ferme à la lampe.

Fig. 10. — Tube à double réservoir et à double effilure. Le col du tube est fermé ù l'oualc.

MÉTHODES DE CULTURE DES BACTÉRIES

Au lieu de tubes, on emploie communément les matras de Pasteur qui ont représentés dans la ligure 12. Ils consistent en un petit ballon à fond plat fermé par un bouchon à recouvrement à l'émeri, qui se termine par un tube en verre obstrué par de la ouate. Ces matras ont été flambés au

Fig. H. — Cette figure montre la disposition des tubes à double réservoir disposés sur une planchette pour l'opération qui consiste à les remplir d'un bouillon conservé dans le ballon placé à droite de la table (d'après Duclaux).

préalable. Quand on veut remplir une série de ces vases, on prend un des grands ballons scellés à la lampe dont on coupe le col ; on remplit une pipette à gros ventre (fig. S) avec le liquide qu'il contient. Cette pipette a été au préalable stérilisée pendant qu'elle était fermée à son extrémité et remplie d'ouate à son col. Puis on porte son contenu successivement dans plusieurs matras en soufflant par le col pour faire couler le liquide par l'extrémité inférieure. Les grands ballons à effilure latérale représentés dans la figure 8 sont plus commodes. En effet on les remplit directement avec le liquide du bouillon pendant son ébullilion, puis on ferme à la lampe l'effilure et on les chauffe dans la marmite de Papin à 115 ou à 130°. Après cela on les conserve jusqu'au moment où l'on veut remplir les matras Pasteur. Il suffit de casser l'extrémité de l'effilure et de souffler par le col du ballon pour faire passer le liquide qu'il contient dans les matras. L'opération finie, si le ballon renferme encore du liquide, on ferme l'effilure à la lampe et ou conserve le ballon et son contenu jusqu'à ce qu'on en ait besoin de nouveau.

Fig 12. — Ma tras Pasteur.