ISOLEMENT DES BACTÉRIES A LÉTAT DE PURETÉ

blanc à double fond rempli d'eau chauffée, couverte d'une lame de verre (flg. 15). Les éprouvetles y sont très inclinées, de telle sorte que la surface du sérum soit aussi grande que possible. On chauffe à 70* jusqu'à ce qu'il soit gélatinisé.

Un autre procédé que nous employons pour obtenir du sérum gélatinisé bien clair consiste à chaufTer à 65^ dans le thermostat pendant cinq ou six heures. Après cela on élève la température à 68* ou 70® jusqu'à ce que le contenu des tubes soit gélatinisé. Par ce procédé d'échaufferaent lent le sérum ne se trouble pas.

Nous nous sommes convaincus que si l'on prend le sang d'un animal sain avec toutes les précautions voulues, il ne se développe presque jamais de germes dans les ballons et les éprouvettes. Il faut néanmoins laisser séjourner pendant plusieurs jours ces dernières, après qu'elles ont été remplies, dans une étuve à 36», afin de s'assurer de la pureté de la substance.

Isolement des bactéries à l'état de puretés — Pour obtenir des cultures pures, Klebs a employé la cnlture fractionnée, qui consiste à laisser croître d'abord toute espèce de germes, puis à transporter une petite parcelle du premier liquide dans un autre liquide stérilisé. Dans celui-ci il naît un moins grand nombre de bactéries, et en répétant plusieurs fois cette môme transplantation, on arrive quelquefois, mais non toujours, à voir prédominer l'espèce qui se reproduit le plus abondamment.

Brefeld et Pasteur se sont efforcés de diluer tellement la culture que dans une goutte de liquide il n'y ait plus qu'un ou deux champignons. Brefeld a appliqué cette méthode à l'élude du hacillus subtilis. Il examine au microscope, sur une lamelle, une parcelle de liquide dilué et s'assure qu'il n'y a qu'un grand bacille; puis il ajoute une goutte de gélatine et place la lamelle dans une chambre humide.

Pour isoler les germes, Brefeld fait entrer dans une chambre humide de Kûhne de la gélatine contenant des germes; il vide la chambre humide; mais il reste une mince couche de gélatine adhérente au verre à l'intérieur de la chambre humide. Cette couche contient quelques germes qu'on peut observer isolément au microscope et voir se multiplier.

Un autre procédé employé par Nœgeli consiste à diluer le liquide qu'on veut examiner jusqu'à ce qu'on suppose (ju'il y ait pou de germes dans la partie qu'on doit ensemencer, ou bien on cultive d'abord et on dilue ensuite la culture qu'on ensemence de nouveau. Mais ces méthodes, livrées au hasard, ne donnent, on le comprend, aucune assurance sur la pureté et sur la nature des cultures obtenues; elles n'ont plus en réalité qu'une valeur historique.

Cohn, en chauffant des bactéries pourvues de spores, a vu que les spores résistaient à des degrés de température variables, mais plus élevés que les bactéries.

Miquel* a isolé ainsi un bacille en chaufTant le liquide à 108*».