ISOLEMENT DES BACTÉRIES SUR PLAQUES NUTRITIVES

cées Tune sur Tautre sous la même cloche, sur un petit échafaudage métallique.

La lame 1 est placée en bas, parce que s'il y a des cultures qui liquéfient la gélatine, celle-ci tombera dans le fond de la cloche et non sur les autres plaques.

Il est bon de mettre au-dessus de ces trois lames une autre lame plus large stérilisée mais sans gélatine pour arrêter les micro-organismes qui Tiennent de l'air et tombent sur les lames quand on soulève la cloche.

Lorsque la gélatine a été inoculée, il faut Texposer à une température propre à la germination des bactéries qu'on veut examiner. Souvent la température de la chambre suffit, comme cela a lieu pour les diplocoques (le la pneumonie de Friedl&nder, etc. Mais si les bactéries qu'on veut étudier ne se .développent qu'à une température comprise entre 20° et 36°, on est obligé d'employer l'agar-agar.

Pour faire des plaques avec Tagar-agar, on place d'avance trois tubes contenant cette substance dans un bain-marîe qu'on chaulfe jusqu'à liquéfaction. On laisse refroidir ces tubes au bain-marie jusqu'à 40°. A ce

FiG. 2L — CristalUsoir modifié pour les cultures et représenté eu élévation. <i. partie inf(éri«ure du crittalHioir ; b, couTerrle : r, bande de caoutchouc qui entoura l'appareil.

moment, on les ensemence comme nous venons de le décrire pour la gélatine. On verse ces trois tubes sur des plaques ; mais comme l'agar-agar glisse souvent sur les plaques, il est préférable de verser le liquide dans des cristallisoirs en verre plats de la forme de celui qui est représenté dans la fig. 20, mais beaucoup plus petits, recouverts d'un couvercle en verre, qui ont été stérilisés de la même façon que les plaques. Il faut les choisir d'une grandeur telle que quatre d'entre eux puissent tenir dans une chambre humide (Babes*). La chambre humide est placée dans une étuve à 36°. Pour empêcher l'entrée des germes dans les cristallisoirs, il <*st avantageux de les retourner de telle sorte que la gélatine soit en haut. Comme l'agar-agar a de la tendance à glisser, il faut se servir d'un agar assez concentré, à 34 p. 100, qu'on filtre dans l'autoclave à une température de 115-120°. De plus la partie inférieure du cristallisoir possède des parois obliques. (Voy. fig. 21.)

L'emploi de ces petits cristallisoirs à fond plat est aussi très avantageux pour la gélatine et les pommes de terre. Ils peuvent remplacer le? plaques de gélatine, on les retourne de façon à ce que leur fond contenan la gélatine soit retourné en haut; il est impossible alors qu'ils soient adultérés par les microbes de l'air. On peut les examiner aussi au microscope