RÉGULATEUR POUR LES BASSES TEMPÉRATURES

s'ouvre et de l'eau froide entre par le tube E dans la caisse métallique

ilii thermostat; si la soupape est fermée, l'eau

s'écoule par le tube A.

Pour obtenir une température inférieure à celle

<le la chambre, on peut aussi se ser\'ir de l'appareil suivant (fig. 30) qui est une modification do

c^lui de Reichert.

Dans le tube M, il existe un petit diaphragme

C percé en son milieu, et fermé par une soupape 6.

Cette soupape est soutenue par un fil de platine

qui se termine par une petite boule de verre qui

ua«;e sur le mercure si la soupape est ouverte.

Mais si le mercure baisse, la soupape se ferme. Si l'on veut obtenir une température plus

basse que l'air extérieur, on règle le mercure à

l'aide de la vis, de façon à ce que le contact avec

la boule se fasse à la température voulue, à 18® par exemple. On fait entrer par le tube supérieur M de l'eau refroidie. Si la température s'élève audessus de 18®, la soupape s'ouvre et l'eau froide entre par le tube N dans l'eau contenue dans le thermostat.

Pour obvier aux inconvénients qui résultent de Tarrivée du gaz après qu'il s'est éteint, on peut se servir de l'appareil de Koch ; mais il est préférable d'employer l'appareil déjà décrit et représenté dans la fig. 30. Le gaz arrive par le tube M et se rend par le tube N à la lampe qui

chauffe l'étuve. Si la lampe s'éteint, l'étuve se refroidit, le mercure en se refroidissant lui-même descend et fait fermer la soupape. L'arrivée du gaz est alors interrompue. Par exemple, si l'appareil est réglé pour 38® on élève la colonne de mercure de sorte qu'il ne supporte plus la boule à 37®, o ; si l'appareil se refroidit à ce degré, l'arrivée du gaz est fermée.

Méthodes pour cultiver les bactéries anaérobies. — Pour produire le développement des microbes anaérobies, il suffit sou-

FiG. 30. — Thermo-régul»leur avec soupape de sûreté.

Lr gaz arrive en M et sort en N par un tab« qui le conduit à iD lampe qui chauffe* l'étuve.

SI la température de l'étuTc est éleTée, le mercure lAve la p«tile boule en verre ou flotteur a reliée par une tige h la aoapape b qui ouvre le diaphragme c percé d'un trou.

Le {{az passe alors et sort en N. Si l'étuve se refroidit, le mercure baisse et la soupape 6 obturant l'oriflce c ferme l'accès du gaz.

Fuî. 31. — Appareil pour obtenir une température inférieure à 18'.

L'eau qui entre dans le réservoir passe par le tube A si la soupape V est fermée. Celle-ci s'ouvre par l'attraction d'un électro-aimant M qui ouvre la soupape lorsqu'un thermomètre électrique placé dans le thermostat ferme le courant, ce qui arrive à une température donnée. Alors l'eau froide entre par ce tube E dans le thermostat.

venl illnoculer la partie profonde des tubes ou bien de placer une mince lame de verre de Moscovie sur la plaque de gélatine ou d'agar-agar itiotmlée au préalable. Certains microbes anaérobies germent sous la lamelle de verre, tandis que les aérobies se développent mal ou ne vivent point.

On peut aussi verser sur la gélatine ensemencée profondément avec la bactérie à examiner une couche d'huile pure et stérilisée qui doit avoir au moins quatre centimètres de hauteur. Esmarch éiSLla et fait rouler dans un tube de la gélatine ensemencée au préalable avec des microbes anat^robies de façon à ce qu'elle s'étale en une couche mince à la surface mternf^ du verre. Après que la gélatine est prise, il remplit complètement ce même tube avec de la gélatine qui se prend k son tour. On peut recouvrir etilin cette gélatine avec une coucho d'huile.

Pour étudier la vie des bactéries dans des liquides privés d'oxygène, i^appan ïl le plus simple consiste dans un petit ballon contenant une solution nutritive ensemencée avec les bactéries qu'on veut étudier. On adapte le col d u ballon à un aspirateur (pompe à mercure ou aspirateur par un courant d'eau). On place le ballon dans un bain d'eau à 40^. Le liquide eutru en ébullition. Au bout d'une demi-heure, pendant cette aspiration, on ferme lo col du ballon qui a été étiré d'avance à la lampe à émailleur.

Mais ces méthodes sont insuffisantes pour faire germer les bactéries quo tue l'oxygène, comme celles du vibrion septique de Pasteur, et il est nécessaire de chasser complètement l'air du tube, soit en faisant le vide, soit en remplaçant l'air par des gaz tels que l'acide carbonique, l'hytîntiTène ou l'azote. C'est par ces procédés que Pasteur a cultivé le vibrion butyrique [Comptes rendus, t. LIl, p. 1260, 186i) et le vibrion septique. H se servait de tubes à double tubulure (fig. 11) en adaptant au col du tuhf un ajutage pourvu de deux robinets qui le mettaient en communication l'un avec la pompe, l'autre avec un gazomètre contenant de l'acide carbonique. On faisait le vide d'abord, puis on faisait passer l'acide carboni(pi<'. En répétant deux ou trois fois l'opération on était sûr d'avoir chassé tout Tox) gène et on fermait à la lampe.

M. 1* iisteur et ses collaborateurs Joubert et Chamberland se servaient de liouilkjii. Pour cultiver les anaérobies, et surtout pour les isoler, il est préférulile d'employer les substances gélatinisées.

On repère de la façon suivante : La substance nutritive est introduite dans un tube à double effilure; on stérilise à la fois le contenant et le contenu. Ou met une effllure latérale en rapport avec un ga2omètre ou un appareil de Deville générateur d'acide carbonique. Ce dernier appareil est composé, comme on le sait, de deux vases en verre unis par un tube de cEioulchouc. L'un des vases contient du marbre concassé, l'autre de l'acide chlorîiydrique dilué. Le gaz acide carbonique passe par l'une des effilures dans le vase et s'échappe par l'autre en chassant l'air qui y était contenu. Ce dernier est bientôt remplacé complètement par l'acide carbonique. On laîs>e encore passer pendant un quart d'heure l'acide carbonique, après quoi ou ferme à la lampe Teffilure communiquant avec l'air et celle qui s'abouche avec l'appareil de Deville.