LES MICROBES DE L AIR, DE L BAU ET DU SOL

à faire barboter une quantité donnée d'air dans une trentaine de ballons à deux tubulures contenant un bouillon de culture. Dans certains de ces ballons, la culture reste stérile, tandis que dans d'autres le bouillon se trouble. Miquel suppose que le nombre des germes correspond au nombre de ballons qui ont donné lieu à une culture. Cette méthode a l'inconvénient de nécessiter un gros matériel, et de plus on ne peut pas dire que la culture d'un ballon ne correspond qu'à un germe, car le plus souvent ceux-ci sont f^roupés et une seule colonie provient aloi*s de plusieurs germes.

Nous avons vu que Koch a employé les milieux nutritifs solides pour cultiver les bactéries de Tair.

Sa méthode a été perfectionnée par Hesse.

Le D' Hesse (MiUh. d. k, Gesundheilsamtes, t. II, 1884) s'est servi, pour compter le nombre des germes fécondants qui se trouvent dans une quantité déterminée d'air, d'un appareil fondé sur l'observation de Koch.

Il a pris un tube de verre de 50 centimètres à 1 mètre de long, de 4 à 5 centimètres de diamètre, fermé à Tune des extrémités par deux membranes de caoutchouc, l'une pleine et l'autre perforée. Ce tube communique par l'autre extrémité avec un tube en verre, par où se fait l'aspiration de l'air. Le gi^and tube, disposé horizontalement sur un trépied, contient une certaine quantité de gélatine peptone dont la surface de niveau

FiG. 114.— Appareil de liesse pour compter et cultiver

les germes de Tair.

a, membrane do caoutchouc fermant l'une dei extrémités du

tube A qui contient la gélatine; a, tube de verre servant à

Taspiration de l'air.

est au-dessous du trou pratiqué dans la plaque de caoutchouc par où se fait l'appel. Tout l'appareil ayant été stérilisé par la vapeur d'eau à 100°, on le dispose dans l'atmosphère à étudier; on enlève la plaque de caoutchouc qui le ferme et l'on fait passer sur la gélatine une quantité d'air déterminée. Les germes tombent sur la gélatine. L'entrée de l'air se faisant lentement, la première moitié du tube est seule fécondée, ce qui prouve que tous kes germes sont bien tombés sur la gélatine. On a étudié de cette façon la richesse en microbes de l'air d'un certain nombre de milieux. Par exemple, PU faisant passer sur la gélatine 25 litres d'air pris sur une place publique de Berlin, l'opération ayant duré six heures, il se développa seulement 3 colonies de bactéries et 16 de champignons. Par t^ontre, 2 litres de l'air

MÉTHODES d'analyse BACTÉRIOLOGIQUE DE l'aIR.

d*une école au moment de la sortie des écoliers ont donné lieu à la germination sur la gélatine de 36 colonies de bactéries et de 33 colonies de champignons.

Gautier a employé un tube rempli de sulfate de soude desséché, pulvérisé et stérilisé à travers lequel il aspire une quantité d'air. On met ensuite le contenu de ce tube dans un bouillon de culture.

La méthode de Frankland et celle de Pétri reposent sur le même principe. Pétri se sert, pour filtrer l'air, d'un sable stérilisé par le chauffage au rouge et dont les grains sont de 0 [x, 05 à 0 [i, 25. On prend un tube en verre a, fig. 115, au milieu duquel on place d'abord deux disques de fils de 1er treillage de 1«"»,5 à i«™,8 de largeur 6*, 6*. La longueur du tube et de 8 à 9 centimètres. On introduit par chaque extrémité du tube le sable stérilisé. On ferme les deux bouts du tube avec des godets de fil de fer et enfin on bouche à la ouate et on stérilise de nouveau tout l'appareil. Pour s'en senir on enlève les deux bouchons de ouate; on applique, à l'une des extrémités du tube, un tube de verre qui lui est uni par une virole de caoutchouc et un tube de plomb assez fort g, h, en communication avec une pompe. L'autre extrémité du tube contenant le sable communique avec l'air. On mesure par un compteur spécial la quantité d'air qui passe, 10 litres par exemple, en une ou deux minutés. Le sable chargé de germes est ensemencé le plus tôt possible dans les milieux nutritifs. On se sert pour cet ensemencement de cristallisoirs plats contenant de la gélatine. Suivant la richesse en germes de l'air examiné et suivant ce qu*on cherche, on distribue le sable dans plusieurs cristaliisoirs où l'on met ensuite la gélatine liquéfiée que l'on mêle bien avec le sable.

Le bouchon de sable inférieur ne contient pas de bactéries et on l'ensemence pour senir de contrôle.

Si parallèlement à cette méthode on laisse simplement des plaques de gélatine à l'air pour les ensemencer, on voit qu'il y a réellement peu de germes.

La méthode de Pétri montre relativement beaucoup plus de spores de champignons que de bactéries ce qu'il explique par la légèreté des spores des premiers.

Straus et Wurtz [Annales de Vinstitut Pasteur, avril 1888) emploient une méthode qui consiste à faire barboter un volume d'air déterminé dans de la gélatine nutritive. Leur appareil (fig. 116) se compose d'un tube de verre A avec un fort renflement cylindrique à sa partie moyenne et mesurant 15 millimètres de diamètre à ses deux extrémités. Ce tube reçoit de la gélatine nutritive. Au fond de ce tube plonge un second tube B, de petit calibre, dont l'extrémité inférieure est finement effilée; à la partie supérieure, il porte latéralement une tubulure de dégagement D, munie d'un étranglement

Fia. 115. — Appareil de Pétri pour l'anmlyse bactériologique de l'air.

L*alr pénètre suL yant la direction des flèches en a ; c* , c*, table fin !

61, bi, b», b*' diiquei treillages de fll de fer; f, ouate ; g. A, tube qui conduit l'air ù une pompe.