ACTION DE LA LUMIÈRE SOLAIRE, DE LA CHALEUR, DE LA PRESSION

la dessiccation (Koch) et des autres agents destructeurs des bactéries, pour expliquer Textinclion des germes morbides et la fin de répidémie.

Arloing {Comptes rendus, 1887) a constat^ Tatténuation de la virulence des bactéries du charbon par la lumière du soleil; tandis que la lumière lia gaz ne modifie pas beaucoup les bacilles du charbon, la lumière solaire empêche le développement des spores. La lumière du soleil en été diminue la virulence des bacilles du charbon, de telle sorte que les cultures peuvent se transformer en vaccin.

L'action de l'oxygène ne parait pas le mode d'atténuation le plus actif des virus; dans l'atténuation du virus charbonneux, la température agit vraisemblablement autant que l'oxygène. C'est ainsi que Toussaint avait trouvé avant Pasteur un moyen d'atténuer la virulence du charbon en chauflant les liquides virulents à la température de 55®, ou en les modifiant par l'addition d'acide phénique. Bien qu'il eût démontré scientifiquement la réalité de l'atténuation, son procédé de vaccination offrait une part d'aléa trop considérable pour être introduit dans la pratique. Chamberland et Roux {Comptes rendus de l* Académie des sciences, n® 15, 1883) ont atténué le virus charbonneux par l'addition de substances antiseptiques, l'acide phénique et l'acide sulfurique. En ajoutant une partie d'acide phénique à 1 000 parties du bouillon où sont cultivés les bacilles charbonneuxy ceux-ci vivent encore pendant cinq mois : avec 1 p. 800 il ne se développe plus de spores. On peut ainsi obtenir une série de liquides d'une atténuation différente et déterminée.

Ces auteurs ont pu atténuer la virulence des spores par l'action de l'acide sulfurique à 2 p. 100. Après huit jours, les spores ainsi traitées ne tuent pas les lapins, mais ils tuent les cobayes. Si l'on cultive ces spores, il se développe des bacilles qui montrent la même atténuation.

Chauveau {Comptes rendus, tome XCVI, p. 553) atténue le virus charbonneux d'après la méthode de Toussaint, en chauffant le sang charbonneux à 42 ou 43» pendant vingt heures. Il se développe habituellement des spores dans les bacilles du charbon ; on chauffe une deuxième fois ces dernières pendant 1, 2 et 3 heures à 47». Le liquide qui a été chauffé pendant une heure tue tous les lapins. Celui qui est resté deux heures à 47», tue la moitié des lapins ; celui qui est resté trois heures à la même température ne tue plus les lapins. Les cobayes adultes résistent à l'inoculation de liquide chauffé 1, 2 et 3 heures à 47». Les cobayes jeunes qui sont plus sensibles, meurent encore quelquefois avec les liquides chauffés une et deux heures à 47»; mais ils résistent au liquide chauffé trois heures (Chauveau, études sur le chauffage des cultures virulentes, Lyon, imprimerie L. Bourgeon, 1883). En employant cette méthode de chauffage, et en chauffant en même temps un tube scellé à la lampe, ne contenant point <I air et un tube contenant de l'air, il a constaté que l'atténuation se faisait aussi bien dans l'un que dans l'autre. Chauveau a même montré que lorsqu'on atténue les bacilles du charbon par la chaleur, la présence do l'oxygène, au lieu de concourir à l'atténuation, la retarde sensiblement (du rôle respectif de l'oxygène et de la chaleur dans l'atténuation du virus charbonneux par la méthode de Pasteur, etc., Lyon,imp. de L. Bourgeon, 1883).

CORNrL ET BABKS. — 3« ÉD. 16

242 ArrÉNUATlON DES VIRUS.

Tous les bacilles atténués se développent, et forment des générations, qui conservent la même atténuation. Les spores des descendants de ces bacilles chauffés, si on les chauffe pendant une heure à 80®, sont atténuées, tandis que les spores normales restent virulentes à la même température. Pour vacciner des moutons, Ghauveau commençait par chauffer pendant 20 heures à 43<^, une culture de sang charbonneux dans du bouillon de poulet faible; cette culture étant ensuite chauffée à 47* pendant trois heures. Cette culture servait à ensemencer d* nouveaux matras qui étaient conservés de 5 à 7 jours à Tétuve à 35-37* pour le développement du mycélium et sa transformation en spores atténuées; puis il chauffait pendant une heure à SO^pour compléter Tatténuation des spores. Ce dernier liquide était inoculé comme premier vaccin, le même liquide avant le chauffage à 80* servait de second vaccin (Recherches sur Vtqtplicaiion de V atténuation des virus par la chaleur à la pratique des inoculations préventives ^ Lyon 1884).

Chauveau (Comptes rendus de V Académie des sciences, 19 mai 1884,6 et 13 juillet 1885) a obtenu l'atténuation des virus charbonneux parla culture des spores sous une pression de neuf atmosphères d'air, ce qui équivaot à deux atmosphères d'oxygène, à la température de 38 à 39*. Cette première culture sert à ensemencer une nouvelle culture qui se développe soas une pression de huit atmosphères. La première était déjà atténuée, mais la seconde Test davantage. Une troisième culture, obtenue de la même façon, IVst encore plus. La quatrième culture ne tue plus le cobaye. Elles ne tuent jamais le bœuf et presque jamais le mouton. Ces cultures sont fixes, et leur inoculation présen'e les animaux du charbon.

Chauveau (Comptes rendus, 18 février 1889) a réussi à priver absolument le bacille du charbon de toute virulence ; mais bien qu'il soit devenu inoffensif, il n'a pas perdu la faculté de récupérer sa fonction virulente.

Pasteur et Thuiilier ont atténué le virus du rouget du porc en le faisant passer par l'organisme du lapin. Avec le sang du porc, on inocule un lapin qui devient malade et meurt. Si on cultive le sang de ce lapin, les microbes constituent un vaccin pour le porc. Ces cultures, inoculées au porc, lui donnent l'immunité pendant un an, ce qui suffit pour l'évelage; mais ces cultures ne sont pas fixées dans leur atténuation, car si on les inocule en séries successives à des pigeons, qui en meurent, elles récupèrent leur virulence primitive et deviennent mortelles pour les porcs.

Cornil et Chantemesse (Comptes rendus, 27 fév. 1888) ont atténué par la chaleur le virus de la pneumo-entérite des porcs (hog choléra); ce virus chauffé à 43* pendant 74 jours, ne tue pas toujours les lapins; après 00 jours de chauffage, il ne lue plus ni les lapins, ni les cobayes, et leur confère l'immunité.

Il importe d'établir ici une distinction capitale dans l'étude des virus atténués, qu'on emploie comme vaccins. Les uns représentent pour ainsi (lire une modification permanente des bacilles et des spores, de telle sorte qu'un microbe dont la virulence est atténuée se reproduit dans les milieux nutritifs où on le sème avec ses caractères morphologiques et son degré de virulence atténuée. Ce sont là des microbes et des cultures qui peuvent se

PBÉSERVATiON CONTRE LE CHARBON SYMFTOMATIQUE^ LA RAGE, ETC. 2(3

perpétuer indéfiniment avec leurs caractères propres et se conserver avec une atténuation fixée. Ce sont des variétés d'une espèce microbienne obtenues artificiellement, qu'on peut semer de nouveau et voir germer en conservant leurs propriétés vaccinales. Nous ne connaissons que le vaccin du charbon de Pasteur et celui de la pneumo-entérite de Gornil et Gbantemesse qui répondent à cette définition. Pour la plupart des vaccins aujourd'hui connus et employés, lorsqu'on injecte des microbes, ceux-ci sont atténués par des agents physiques ou chimiques, ou injectés à petite dose au moment où l'on s'en sert, mais ce sont bien les microbes virulents de la maladie, ils peuvent récupérer leur virulence primitive lorsqu'on les cultive à nouveau dans des milieux nutritifs appropriés. C'est ce qui a lieu pour les vaccins du choléra des poules, du rouget, du charbon symptomatique, etc.

Pour ce qui concerne la préservation du charbon symptomatique, Arloing, Gomevin et Thomas ont trouvé que les spores du charbon symptomatique, maintenues pendant dix heures à une température de 85<», perdent leur virulence et peuvent servir de vaccin. Ces auteurs vaccinent aussi contre le charbon symptomatique en insérant la sérosité virulente de cette maladie au bout de la queue des animaux. Ils injectent 20 gouttes de cette sérosité; il se développe un oadème localisé sans réaction générale ni gravité, et les animaux sont préservés de la maladie. La densité du tissu et sa température moindre que celle des parties centrales constituent des obstacles à la pullulation des micro-organismes. Chez le bœuf, il est même nécessaire d'entourer de ouate la partie inoculée, afin d'obtenir réchauffement nécessaire à la production de l'œdème ; cette précaution est superflue chez le mouton. Il faut choisir pour les inoculations préventives une température moyenne de l'air ambiant.

Bien que le micro-organisme de la rage n'ait pas été reconnu d'une façon absolument certaine, ni isolé ni cultivé. Pasteur a pu trouver le moyen d'atténuer son virus. Il inoculait, dans ce but, un fragment de la substance cérébrale d'un chien enragé dans le cerveau d'un lapin, faisait passer ce même virus provenant du lapin par l'organisme du singe, où il s'atténuait et devenait un vaccin pour le chien (congrès de Copenhague, 1884). Pasteur a depuis modifié complètement sa méthode de vaccination {Acad, des se, nov. 1885) applicable non seulement à la vaccination des animaux contre la rage, mais aussi à l'homme. Pour cela, on laisse dessécher à l'air des parties de la moelle de lapins morts de la rage; plus la moelle est desséchée, plus le virus de la rage est atténué. On commence à inoculer à l'animal mordu et infecté depuis quelques jours le vaccin le plus faible et successivement des vaccins plus forts qui seront supportés sans que la rage se développe.

^ous traiterons, dans un chapitre spécial, de la méthode des inoculations préventives contre la rage et nous entrerons plus en détail dans l'explication de la possibilité de détruire le virus rabique déjà entré dans l'économie. On peut supposer que les symptômes de la rage sont relTet sur les centres nerveux du virus qui s'est d'abord généralisé sans

244 AITÉNUATION DES VIRUS.

produire de symptômes. L'aclion du virus atténué aboutit à empêcher la localisation du virus primitif sur les centres nerveux; il est probable que le virus atténué agit sur certains éléments de telle sorte qu'à un moment donné, le virus rabique soit détruit avant de produire son effet local sur les centres de Tinnervation.

Dans Tordre des bacilles zymogènes, on connaît des faits d'atténuation qui rendent certaines bactéries incapables de déterminer la fermentation. Par exemple Fitz, en exposant le baciUus butyricus, a.geni de la fermentation butyrique, à une température de 90° pendant cinq heures, ou pendant sept heures à la température de 80°, a constaté qu'il était incapable de déterminer la fermentation, bien qu'il eût conservé la faculté de se reproduire.

Roux et Ghamberland * sont arrivés à conférer l'immunité contre l'inoculation du vibrion septique de Pasteur ou œdème malin de Koch en injectant simplement les bouillons filtrés ou stérilisés qui avaient servi de milieu de culture à ce bacille. On sait que le cobaye inoculé avec une culture de ce microbe meurt habituellement en moins de douze heures. Si l'on fait avec la sérosité de l'œdème de cet animal une culture dans le bouillon de veau à l'abri de l'air, le bacille cesse de se développer au bout de trois ou quatre jours, et ce même liquide filtré sur porcelaine ne peut plus servir pour une nouvelle culture, car il contient des substances toxiques pour le bacille. Roux et Ghamberland ont injecté dans le péritoine de cobayes, en trois fois, 120 centimètres cubes de ce liquide de culture du vibrion septique bien privé de tous ses microbes, après qu'il eut été chauffé pendant dix minutes à la température de i05«-110°. Les cobayes supportèrent bien cette injection. Deux jours après, on les inocula avec le vibrion septique virulent en même temps que des cobayes témoins. Les premiers sont restés vivants tandis que les seconds mouraient en moins de dix-huit heures.

L'organisme de ces animaux, les cellules probablement saturées par les produits toxiques créés par la multiplication des bacilles, étaient devenus un milieu impropre à leur pullulation nouvelle.

Chanteniesse et Widal ont rendu par un procédé analogue les souris réfractaires au bacille de la fièvre typhoïde qui les tue quand on le leur injecte en quantité suffisante {cités par Roux, toc. cil. 1887 et Annales de Vlnstit. Pasteur, 1888).

Roux a trouvé, par un moyen semblable, une vaccination préventive contre le charbon symptomatique. Il injecte dans ce but à des cobayes de grandes quantités de cultures du bacille du charbon symptomatique (bacterium Chauvœi) stérilisées dans l'autoclave à Ho*. Ce liquide est ensuite injecté dans la cavité péritonéale des cobayes à la dose de 40 cenliraèlres cubes. Ces injections sont répétées trois fois à deux jours d'intervalle. Les animaux ainsi préparés résistent le plus souvent à l'inoculation. Dans une autre expérience. Roux injecte sous la peau, à une série de cobayes, 1 centimètre cube de sérosité de culture stérilisée, pendant douze jours de suite; trois jours après on les inocule avec le virus virulent en même temps que des témoins. Les témoins meurent en vingt-six heures, les cobayes racci-