A. MÉTHODE DES ÉTALEMENTS SECS
Ce qu'il iaut :
I* Plusieurs lames de sang recueilli par piqûi:e du doigt, étalé en couche mince (lamelles, carte de visite) et séché. Ces lames doivent être prélevées un peu ayant l'accès, chez un sujet n'ayant pas pris de quinine ;
2® Un colorant :
Le bleu panchrome de Laveran (bleu de méthylène, bleu de toi uidine, azur et violet de méthylène, éosine). Prendre de préférence le colorant R A L (Cogit).
Une solution de tanin à 6 p. loo.
Gé qu'il faut faire :
Avec le panchrome Laveran :
Ne pas flxer le frottis ;
Etendre sur la lame le panchrome, environ 1/2 centimètre cube de colorant ;
Couvrir d'une boîte de Petri pour éviter Tévaporatiôn ;
Laisser 3 minutes ;
Renverser ensuite la lànie, face à colorer en dessous dans une boîte de Petri contenant la quantité d'eau distillée * rigoureusement neutre correspondant à 19 : 20 du panchronie, soît 19 parties pour i, soit 10 centimètres cubes.
1. L'ejau distillée est souvent acide; faire provision^ d'eau alcaline en faisant bouillir l'eau distillée 15 minutes dans un ballon de verre.
Agiter pour faire le mélange ;
Laisser 20 minutes ;
Laver à grande eau ;
Sécher au papier mousseline ;
Ne jamais chauffer pour sécher.
— Avec le bUéosinate ou la méthode panopiique de Tribondeau (voir p. 153) ;
3° Recouvrir la préparation d'huile de cèdre et examiner à rimmersion.
B, MÉTHOOÇ DE l'hémolyse A L'aLCOOL AU TIERS CTrIBONDEAU^ .
Ce procédé convient pour la recherche rapide des hématozoaires surtout des croissants de PL falciparum quand ils sont rares.
Ce qu'il faut et ce qu'il faut faire :
i® I^ecneîllir par piqûre du doigt ou de l'oreille du sang que l'on reçoit dans la proportion de i p. 10 dans une solution d'alcool au 1/3 4
Alcool absolu 10 parties.
Eau distillée. 20 —
ou :
Alcool à 90" 10 parties.
Eau distillée 18 —
On agite.
2** Centrifuger ;
3® Etaler le culot sur lame. Faire un étalement assez épais pour la recherche du PI. falciparum, un étalement mince pour le PL vivax ;
4° Colorer comme plus haut l'étalement mince ;
5*^ L'étalement épais est fixé à l'alcool absolu et coloré rapidement à un bleu, plus spécialement au bleu polychrome à l'ammoniaque de Tribondeau (10 secondes) ;
6® On recherche sur l'étalement mince les PI, vivax. Ils sont rassemblés, se reconnaissent facilement à leur chromatine rouge, à leur protoplasma bleu et aux grains de pigment. Ils sont encore inclus dans des hématies qui ont résisté à Thémolyse ;
7® Dans l'étalement épais, on cherchera les croissants très concentrés avec leur forme typique et leur amas central de pigment noir caractéristique ou PL falciparum, •
Ce qu'il faut voir :
Il existe dans le paludisme trois espèces d'hématozoaires dont n6us résumons les caractères dans le tableau ci-contre.
Comment faire une pyooulture suivant la technique du Professeur Deibet
La pyoculture a été imaginée par le professeur Pierre Deibet pour se renseigner sur l'évolution d'une plaie et fournir des indications thérapeutiques précises. C'est une nouvelle technique certainement intéressante, facile à exécuter, même avec lès moyens de fortune dont on dispose dans une ambulance de première ligne.
Ce qu'il faut :
I** Du pus. Le prélever à la pipette que l'on ferme ensuite sur la lampe à alcool ;
2** Des lames ;
3® Des tubes à épreuve. Nous employons pour la circonstance les fins tubes de verre qui ont servi pour les catguts en brins ;
4® Une étuve réglée à 87® ;
5® Comme colorant, un bleu basique : nous employons de préférence le bleu de toluidine ou ce qu'il faut pour faire un Gram ;
6® Des tubes de bouillon.
Ce qu'il faut faire :
i** Stériliser' à l'autoclave ou au Poupinel les tubes à pipette et les tubes d'épreuve après les avoir fermés au préalable avec du coton cardé ;
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1 à 6. — Plasmodium vivaœ.