CHAPITRE V CHIMIE PRATIQUE
Dosage de l'albumine dans le liquide oéphalo-raohidien au raohialbuminimàtre de Sioard et Cantaloube
Ce procédé est basé sur la précipitation à chaud de Talbumine par Tacide trichloracétique au tiers, le dosage se fait à l'aide d'un tube gradué.
Ce qull faut :
I* Un rachialbumînimètre de Sicard et Cantaloube (Leune), c'est un tube allongé de 19 centimètres de hauteur et de 7 milliniètres de diamètre inférieur, gradué en 4 centimètres et dont les 2 derniers centimètres présentent des sous-divisions au cinquième ;
2** Quatre centimètres cubes de liquide céphalo-rachidien frais ;
3** De l'acide trichloracétique au tiers.
Ce qu'il faut faire :
I** Verser dans le tube jusqu'au trait supérieur 4 du liquide prélevé ;
2** Chauffer le tube au-dessus d'une flamme à alcool jusqu'à 80-90°. Il n'est pas nécessaire d'obtenir l'ébullition ;
3** Ajouter immédiatement XII gouttes d'acide trichloracétique au tiers ;
4* Placer le tube au repos pendant 5 minutes ;
5" Obturer le tube de son bouchon de caoutchouc et le retourner deux ou trois fois ;
6* Laisser reposer 5 heufes en position rigoureusement verticale ;
7® Lire la limite de la graduation.
Ce qu'il faut dire :
Précipité au niveau ou au-dessous de la première division = liquide normal.
Précipité au-dessus ou au-dessous de la première division = liquide pathologique. •
Précipité entre une et une division et demie = liquide suspect.
Pour le dosage :
Un précipité affleurant 'à la l" division inférieure = 0,22 centigrammes
Si le liquide est souillé de sang, les résultats se trouvent faussés. On n'en peut tenir compte, o gr. 2o = liquide normal.
gr. 5o = album inose nette.
1 à 2 grammes = albuminose intense. -
Si le précipité est trop abondant pour être mesuré, il faut recommencer Texpériencè en diluant de moitié le liquide céphalorachidien : le chiffre obtenu alors à la lecture devra être multiplié par 2 pour correspondre à la quantité d'albumine par litre.
L'albumînose s'observe avec lymphocytose : i
dans Ifes méninges aiguës. .
— — tuberculeuses.
— — chroniques syphilitiques.
dans Tencéphalite léthargique, d une façon inconstante, et souvent accompagnée d'une hyperglycorrachîe.
L'albuminose s'observe sans lymphocytose :
dans les compressions : mal de Pott, tumeur.
— tumeurs cérébrales.
L'hyperalbuminose peut s'observer sans lymphocytose chez
d'anciens syphilitiques. Cette anomalie n'indique pas l'existence d'une méningite syphilitique active (M. Bloch).
Reoherohe du 8uore dans le liquide oéphala-raohidien
Ce qu'il faut :
1° Un liquide céphalo-rachidien fraîchement recueilli ;
2° De la liqueur de Fehling ;
3^ Une lampe à Talcool et un tube à essais.
Ce qu'il faut faire :
i** Recevoir dans le tube à essais 2 centimètres cubes de liquide céphalo-^rachidien centrifugé o^ filtré ; 2° Ajouter III gouttes de liqueur de Fehling ; 3* Porter à ébullition. .
Ce qu'il fau^t voir :
Le liquide reste bleu = rékction négative.
n se fait une précipitation rouge = réactipn positive.
Ce qu'il faut dire :
Réaction positive dans un liquide clair = liquide normal ou état méningé, méningite subaiguë ou chronique (syphilitique, tuberculeuse, etc.), encéphalite léthargique (Webber). *
Réaction positive dans un liquide trouble = méningite puriforme aseptique, méningite sérique.
Réaction négative dans un liquide trouble = méningite cérébrospinale en phase aiguë ou en période de réaction infectieuse, méningite purulente à pneumocoques ou à streptocoques.
Le sucre reparaît vers le 4* jour de la méningite cérébrospinale, au moment de l'amélioration.
Doeage de Turée dans le eérum sanguin
Les recherches de Widal et ses élèves ont isolé un syndrome clinique azotémîque au cours des néphrites. Chimiquement, il est caractérisé par l'augmentation considérable de la quantité de l'urée du sérum sanguin. Cette quantité ne dépasse pas à l'état
normal o gr. 5o à o gr. 60 par litre, et à l'état pathologique elle peut aller jusqu'à 4 grammes.
Ce qu'il faut :
I® 5 centimètres cubes de sérum obtenus par la coagulation de 20 centimètres cubes de sang recueilli par des ventouses scarifiées, ou par une saignée à l'aiguille ;
2® De l'alcool à 96® additionné du i/iooo d'acide acétique ;
3* Une solution d'hypobromîte de soude :
Brome 1 centimètre cube.
Lessivé de soude de densité 1,33. 15 — —
Eau distillée 10 — —
Mélanger la soude et l'eau, refroidir et ajouter le brome par petites portions en refroidissant.
k° Un uréomètrei de Leune-Bournigault avec cuve à eau ou pn uréomètre de Moreigne. On peut de la même façon utiliser l'uréomètre dTvon {voir p, UU).
I® Ajouter à 5 centimètres cubes 2 de sérum 5 fois le volume d'alcool, à 95® acétique, et faire bouillir. Filtrer après un séjour de 3 heures à l'étuve à 35*» ;
2** Le résidu est repris à deux reprises par l'alcool bouillant ;
3** Toutes le« solutions alcooliques obtenues dans les filtrats précédents sont réunies puis évaporées jusqu'à réduction du volume à quelques centimètres cubes ;
^^ L'uréomètre de Leune est abouché par son extrémité G, robinet ouvert, au caoutchouc d'un robiniet à eau et rempli jusqu'à D, sans bulle d'air. Fermer alors le robinet G.
Le plonger dans sa cuve à eau oh un thermomètre indique la température.
Verser par le robinet B, 2 5 centimètres cubes de la solution d'hypobromite, puis quelques gouttes d'une solution aqueuse saturée de glucose.
1. On demandera un uréomètre h lin calibre et graduations serrées.
2. Il est préférable d'opérer sur 10 centimètres cubes de sérum.
Verser par le robinet A les résidus alcooliques des lavages des 5 centimètres cubes de sérum, puis quelques gouttes d'eau.
Laisser Tàppareil 5 minutes prendre la température de la cuve à eau.
Fermer les robinets A et B.
Retirer l'appareil de la cuve à eau et agiter vigoureusement en l'inclinant de façon à bien faire le mélange des liquides des réservoirs G et E.
Replonger l 'appareil dans la cuve, en ouvrant sous 1 eau le robinet G. Attendre lo minutes. Le dégagement gazeux fait descendre l'eau dans le tube F par refoulement. Pour faire la lecture, il faut retirer l'uréomètre de la cuve jusqu'à ce que le niveau liquide en soit sur le même plan qUe le niveau de la cuve.
Lire alors le nombre de centimètres cubes de gaz dégagé.
On note la température de la cuve et la pression barométrique ;
5** On cherche sur les tables d'uréomètre accompagnant l'appareil le poids, à la même température et à la même pression, d'un centimètre cube d'azote. On multiplie par le nombre de centimètres cubes de gaz dégagé. Le chiffre obtenu est divisé par le nombre de centimètres cubes de sérum employé. On a ainsi le chiffre d'azote par litre qui, multiplié- par 2,1 5, donne le poids en grammes d'urée contenu par litre de sérum^
Ce qu'il faut dire
Fig. 70
Uréomètre
Leune-Bour-
nîgault.
Grande azotémie si le chiffre de l'urée dépasse 2 grammes. Moyenne azotémie si le chiffre de l'urée est entre i et 2 grammes.
Petite azotémie au-dessous de i gramme.
Le professeur Widal a attaché au taux d'azotémie une signification pronostique :
Azotémie supérieure à 3 grammes = mort dans un délai très court.
— entre a et 3 grammes = mort en quelques semaines
ou quelques mois.
— entre i et 2 grammes = la survie dépasse rarement
une année.
— entre 0,60 et i gramme = pronostic plus favorable. Mais il faut savoir que ces taux se rapportent à des azotémied
chroniques constatées à plusieurs examens répétés. Dans les néphrites aiguës, les maladies infectieuses, les états cardiaques, on peut observer des azotémies aiguës plus ou moins élevées. Ces azotémies - n'ont pas les mêmes pronostics et peuvent disparaître après guérison de Tinfection ou amélioration de l'état circulatoire.
Dosage de Turée par la méthode de Foet^e ^
La méthode est basée sur la précipitation dé l'urée par le xanthydroi. Deux molécules de xanthydrol s'unissent à une molécule d'urée pour fornier une combinaison insoluble qui a reçu le nom de xanthylurée ou uréîne, dont le poids moléculaîi'e est 7 fois plus élevé que l'urée.
Le xanthydrol précipite 'totalement l'urée de sa solution et n'a aucune action sur les substances qui peuvent accompagner l'urée dans les liquides de l'organisme, urine, sang, liquides séreux, etc.
Cette méthode permet donc un dosage simple et très précis de l'urée dans les milieux les plus complexes.
1 . Nous remercions le docteur René Clogne, chef de laboratoire à Thôpital de la Charité, docteur en pharmacie, des précieux renseignements qu'il nous a donnés pour ce feuillet et le suivant.
Ce qu'il faut :
i^ Un verre à pied, un agitateur ;
2° Une pipette graduée, un entonnoir ;
3® Une balance de précision ;
4® ^ne étuve à loo® ;
5** Une solution de xanthydrol au i/io dans Talcool méthylique.
Réactif iodomercurique de Fosse :
Chlorure mercurique .... 2,71
lodure de potassium .... 7,20
Acide acétique crist 66 centimètres cubes.
Eau distillée Q. S. p. 100 cent, cubes.
6^ Les réactifs suivants :
Acide acétique, alcool à 90**.
Ce qu'il faut faire :
DOSAÛE DAJIS l'urine !
I** Dans un verre à pied on verse successivement ;
Urine filtrée et diluée au 1/iO . . 10 centimètres cubes.
Acide acétique crist 35 — —
Solution de xanthydrol .... 1 — —
^ Dix minutes après, on ajoute de nouveau i centimètre cube de la solution de xanthydrol et ainsi de suite de dix en dix minutes jusqu'à ce qu'on ait versé 5 cen|im êtres cubes, après quoi on laisse le tout au repos pendant une hçuxe et on recueille le précipité de xanthylurée par filtratîon sur un filtre sans pli ;
2** On lave le précipité avec quelques centimètres cubes d'alcool éthylique, en ayant soin de le rassembler dans le fond du filtre. On porte le filtre à l 'étuve à 100** pendant une heure environ ;
3* Aprèfe dessiccation, le précipité se détache ; on le recueille avec précaution el on le pèse. Le poids obtenu divisé par 7 donne le poids d'urée contenu dans un centimètre cube d'urine.
Pour. rapporter au litre, on multiplie par 1000 le résultat.
Normalement, Thomme adulte élimine en moyenne 28 grammes d'urée en 24 heures (d'après Maillard, 27,64).
Dosage dans le sang :
I® Dans un verre à pied, verser : 20 centimètres cubes de sérum, 20 oentimètres cubes de réactif ; mélanger avec un agitateur et jeter sur un filtre ;
2** Recueillir^ 20 centimètres cubes de liquide clair correspondant à 10 centimètres cubes de sérum, les placer dans un verre à pied, ajouter 20 centimètres cubes d'acide acétique et 2 centimètres cubes de solution de xanthydrol. Agiter, laisser reposer une heure, filtrer, laver le précipité pendant une heure. Peser.
Le poids du précipité 4ivisé par 7 donne le poids d'urée contenu dans 10 centimètres cubes de sérum.
Chez Vindividu normal^ avec une alimentation moyenne, le taux de l'urée du sérum est de o gr. 3o p. 100 environ.
