ORDINAIRE
Poids de végétal
par 100 c.c.
ne En Jours de Alcool A l'état Par rapport Numéraculture 0/0 sec au témoin tion ec milligr. en milligr. A. Liquide de Mayer sans facteur accessoire adjoint.... 10 GoArx + 47 90 B. Liquide de Mayer avec facteur accessoire adjoint... 10 6°302 + 49 it 112 C. Liquide de Mayer sans Le teur accessoire adjoint.... 13 6°000 +39 91
D. Liquide de Mayer avec facteur accessoire adjoint.... 13 6°000 + 42 A) 90
Nous avons dit, tout à l’heure, que le saccharose chimiquement pur était débarrassé de corps accélérateurs, voici quelques chiffres relatifs à ce sujet.
TABLEAU XX : Cultures de S. cerevisiæ
I. — LE SACCHAROSE CHIMIQUEMENT PUR EST DÉPOURVU DE FACTEURS ACCES- SOIRES, TANDIS QUE LE SUCRE DE BETTERAVE ORDINAIRE EN CONTIENT SUFFI- SAMMENT POUR FAUSSER, DANS UNE NOTABLE MESURE, LES EXPÉRIENCES COMPARATIVES,.
Poids de Ricbesse en végétal à saccharose Jours l'état sec des cullures de Facteur Alcool par Numéau début culture accessoire 0/0 100 c.c. ration 1. Liquide de Mayer 26 16 o/o 4 — 30922 59 La (sucre ordinaire) .. 26 16 o/o 4 + 4°005 62 119 2. Liquide de Mayer 24 0/0 A — 0°/400 5 7 (sucre chim. pur).. 24 0/0 A + 20327 30 77 3. Liquide de Mayen 24 o/o 7 — 22/7 32 80 (sucre chim. pur).. 24 0/0 13 — 4°100 65 112 4. Liquide de Mayer (sucre ordinaire) .. 2/4 0/0 13 + 8°715 44 QI 5. Liquide de Mayer 26 0/0 20 — 9°919 4o 86 (sucre chim. pur).. 26 o/o 20 32 9°o6r 4x 90
On peut en conclure que les levures sont capables de se développer malgré l'absence totale de facteur accessoire quel qu'il fût, les constituants employés dans ces expériences n’en contenant pas, el ceci est un point intéressant à retenir.
S'il était besoin de confirmer ce fait, nous dirions que des milieux minéraux el organiques chauffés à l’autoclave, dans des conditions telles que ni le facteur À ni le facteur B ne pût subsister, se montrèrent pourtant aptes à l’évolution des saccharomyces.
Les saccharomyces peuvent se développer en milieu dépourvu de facteur accessoire quel qu'il soit.
Nous profiterons de la mise en évidence de ce facteur dans des composés organiques, comme le sucre de betterave, corps dans lesquels nous ne soupçonnions pas auparavant son existence, pour dire combien, dans les recherches de ce genre, 1l est uüle d'écarter tout ce qui n'est pas chimiquement pur,
C'est ainsi que l'eau de source, pourtant regardée comme pauvre en matière organique, s'est montrée riche en un composé, capable également, dans une certaine mesure, de fausser bien des expériences. Même observation au sujet de la verrerie employée au cours de la constitution des milieux minéraux : ces ustensiles, pour être irréprochables, doivent avoir été lavés (rès soigneusement à plusieurs eaux et, par mesure de prudence, flambés au four à 170 degrés, température nécessaire à la destruction des corps organiques actifs.
Dans le même ordre d'idées, il est préférable de n'employer, pour les ensemencements, que le fil de platine droit et fin, l’anse amenant un supplément de matières organiques plutôt nuisible en l'occurence.
#4 X 4 Existe-t-il un rapport entre la faculté qu'ont certains organismes de croître quasi indéfiniment sur milieu minéral, et la richesse plus ou moins marquée qu’acquiert leur milieu de
culture en facteurs accessoires de croissance ? Nous ne saurions l'affirmer, toujours est-il que le Mucor Mucedo, cultivé près de deux années en solution chimiquement définie, sans passer une seule fois sur milieu organique, s’est toujours révélé comme largement capable de synthétiser ces corps. Tandis que, la levure d’une aptitude moindre à ce travail dégénère sans trop tarder, si l’on ne prend soin de la repiquer quelquefois en milieu organique.
Quant au Penicillium glaucum, si mauvais ouvrier dans ce genre de synthèse, il ne résiste pas à quelques réensemencements en liquide de nature purement minérale.
L'esprit humain cherche toujours, quand un.cas nouveau se présente à lui, d'en connaître, outre les tenants et les aboultissants, les analogies et faits similaires.
Première analogie |
On connaît les vues d'Arthur Harden (1) sur la fermentation alcoolique ; on sait que cet auteur attribue un rôle prépondérant au phosphore dans le dédoublement des polysaccharides en alcoo! et anhydride carbonique. « L’addition d'un phosphate au suc de levure, dit-il, produit non seulement l'effet ci-dessus décrit (vitesse accélérée du dédoublement du sucre), mais encore rend un.volume donné de suc de levure capable de produire une fermentation totale plus grande en valeur absolue. »
Les expériences qui amenèrent Harden à concevoir la formation d'un héxos-phosphate intermédiaire au cours de l'équation théorique de Gay-Lussac (CH20$=2C2H°0 +2CO>?) sont trop longues pour êlre énumérées, mais le fait intéressant qui conslitua le point de départ de ses recherches fut la
(1) La fermentation alcoolique. HARDEN 1913, pages 49 et suivantes.
CHEZ LES VÉGÉTAUX INFÉRIEURS 1e
constatation d'une accélération notable de la production d'anhydride carbonique quand le suc de levure frais était additionné de son volume de suc de levure bouilli.
Pour cet auteur, les facteurs responsables de cette augmentalion sont : la présence de phosphate dans le milieu et l'existence dans le suc de levure d'un co-ferment ou co-enzyme dont l'existence est absolument nécessaire à la fermentation.
En ce qui concerne l'élément minéral, Harden estime que : « les phosphates subissent cette transformation earactéristique (en composé organique phosphoré) quand le sucre qui fermente est du glucose, du lévulose ou du mannose ». Mais, quant à la deuxième partie, il avoue que : « le rôle exact du co-ferment est encore plus obscur que sa nature chimique ».
Enfin, comme « l'addition d'un phosphate seul peut prolonger considérablement la période de fermentation du suc de levure », dit encore Harden, cela amène l’auteur à conclure : « qu'il faut chercher l'explication de l'augmentation remarquable de la fermentation totale produite par addition de suc bouilli : 1° à un mélange de sucre, de suc, de levure fraîche, de phosphate libre (qui se transforme en héxos-pliosphate) et de co-ferment ; 2° au suc de levure autolysé et bouilli, contenant du phosphate libre, mais pas de co-Îer ment ; 3° ou encore à la solution de phosphate seul ».
. Si l'hypothèse du rôle joué par ce phosphate organique est ingénieuse, par contre elle ne manque pas d’une certaine hardiesse, et ce n'est pas là la cause qui nous la fait citer, mais au contraire le fait que ce soit précisément du suc de levure bouilli qui ait pu fournir un tel phénomène in vitro, si nous avons bien saisi les expériences d'Harden, alors que nous avons enregistré des résultats analogues : 1° in uivo avec accélération considérable de la prolifération tout en éliminant dans une très grande mesure le processus fermentatil (large aérobiose) ; 2° au moyen d'une substance ne contenant pas de phosphore (voir analyse page 124) ; 3° avec des orga-
nismes ne‘présentant aucun caractère des ferments alcooliques (mucor mucedo non immergé) ; 4° par: l'emploi d'un corps carbone issu d'acide organique ou d'alcool (voir page 125).
H. Euler (1) pût, à son tour, en 1919, répéter les expériences d'Harden en partant d'un extrait de levure, mais obtint des résultats analogues avec du formiate d'ammoniaque ou des formiates des métaux alcalins.
E. Abderhalden et A. Kæhler (2) réussirent de leur côté à extraire de la levure par l'alcool absolu une substance favorisant la multiplication, non seulement des levures ellesmêmes, mais des autres végétaux inférieurs également. Cetle matière, par exemple, à l'inverse de celle que nous avons obtenue cristallisée, n'agit que sur les êtres Jeunes, n'ayant peu ou pas d'action sur les cellules présentant un mauvais état physiologique.
Sont-ce là diverses particules d’un tout? Nous ne savons : mais, en présence des faits relatés par Harden, la question vaut la peine d'être étudiée sur de nouveaux plans, car, à l'heure actuelle, on peul, non Sans raison, se demander si les transformalions chimiques du milieu ou prolifère la levure, par exemple, sont dues à la multiplicalion de cet organisme ; ou si celle multiplication résulte uu contraire indirectement de la modification survenue aux composants de son substra- Lum par l'apport de cullure chauffée contenant encore un coferment agissant au contact des premiers enzymes sécrétés.
Deuxième analogie :
On peut, sans conteste, établir un rapprochement entre les phénomènes qui nous ont frappés dans ces recherches, et les réactions que l’on obtient ih vuilro, au cours des sérodiagnosties (réaction de Wassermann par exemple). Dans l'un et l’autre cas, un système de trois substances semble devoir
(or: EuLer. Zeitsch. F. Techn, : Biologie. T. VIT, 1919, page 155. (2) E. Abpeniazpen et À. KornLer. P. flâger's Archiv : T. CEXXVI, 1919, page 209.
CHEZ LES VÉGÉTAUX INFÉRIEURS té
êlre présent pour que le processus puisse s'effectuer (subslance lermentescible, ferment et co-lerment, ce dernier obtenu de la même manière en sérologie).
Troisième analogie
I ne fait aucun doute que les corrélations fonctionnelles des êtres supérieurs ne se font pas uniquement par l'intermédiaire du système nerveux : « Tout un ordre de faits nouveaux, dit Gley, a été découvert, d'où il ressort que de telles coordinaüons résultent aussi d'actions purement chimiques. » Ces corps proviennent de glandes à sécrétion interne que les physiologistes divisent aujourd'hui en deux groupes : les harmozones à action morphogène, et les hormones vraies agissant en excitant fonctionnel spécifique ; ce sont de ces dernières dont nous voulons parler. Ces corps « n'apporlent pas d'énergie aux éléments qu'ils influencent, ils Hbèrent de l'énergie préexistante, ils ordonnent et déclanchent le travail physiologique. » (E. Gley) (1).
N'est-ce pas précisément le mode d'action qui nous a frappé dans l'emploi des facteurs stimulant la croissance des levures et autres végétaux du même ordre? Il n'y a peut-être là qu'une apparente similitude ne correspondant ni au processus chimique, ni au fait physiologique : mais l'analogie valait la peine d’être signalée, ne serait-ce que pour montrer linfinie ramificalion des réactions biologiques rassemblées dans un même horizon.
Nous devons signaler deux exceptions à la loi commune présidant au phénomène d'activité étudié 11.
Ces anomalies sont, en quelque sorte, inverses l'une de l'autre et, en tous les cas, nellement définies, formant ce que l'on pourrait appeler des exceptions confirmant la règle, si un tel aphorisme nous était permis.
(Hi) Traité élémentaire de physiologie. T. I, page 1195.
Première exception. — De tous les milieux biologiques employés : culture microbienne, extraits végétaux, elc., seuis les jus de citron et d'orange n'ont eu besoin d'aucun chauffage préalable pour dévoiler leur action: sur l'évolution des êtres monocellulaires. }
La première hypothèse formulée était d'en attribuer le rôle au facteur B, soluble dans l’eau, et précisément rencontré en abondance parmi ces fruits. Mais alors, s'il devait en être ainsi, force était d'en détruire l'effet par une ébulliuon prolongée à 120 degrés ou, tout au moins, de diminuer notablement cette action par un tel procédé.
Or, nous n'y sommes pas arrivé, un chauffage à l'autoclave de 1 heure à 130 degrés n'eût aucune influence sur la marche du phénomène ; il devenait done difficile, sinon impossible, en pareil cas, d'attribuer aux véritables vitamines le rôle que nous venions de leur prêter.
À tout hasard, nous avons cherché si l'acidité du jus devait alors être mise en cause ; pour cela, 1] fût préparé des témoins additionnés d'acide citrique chimiquement pur et en des proportions identiques à celles où cet acide se trouvait dans le liquide emprunté au fruit lui-même. Le résultat, ici, fût encore négatif, comme les chiffres suivants le prouveront.
TABLEAU XXI : Cultures de S. cerevisiæ ANALYSES EFFECTUÉES 4 JOURS APRÈS ENSEMENCEMENT
Poids de végétal
100 ec.
TS Alcool à l'état par rapport 0/0 sec au témoin Numération en mgr. en mgr.
I. —— RECHERCHE DU POUVOIR ACTIVANT DANS LES JUS DE CITRON ET D'ORANGE PORTÉS 5 M. À 1102 ET I HEURE À TOO À. Liquide de Mayer, témoin. 1°700 16 17 B. Liq. de Mayer nature... 82454 67 OT innombrable + jus orange.. 5 m. à 110° 82102 68 00 innombrable
TD: T0 0 8:01 69 Eh) innombrable
CHEZ LES VÉGÉTAUX INFÉRIEURS il
Poids de végélal
100 ce.