À. — VÉGÉTAUX AUTOTROPHES TIRANT LEUR CARBONE DU RÈGNE MINÉRAL

æ Végétaux à chlorophylle dont le carbone provient de Panhydride carbonique atmosphérique.

& Certains micro-organismes ayant la faculté de vivre aux dépens de quelques carbonates ou mème du CO? de l'atmosphère,

B. — VÉGÉTAUX HÉTÉROTROPHES NE POUVANT VIVRE SANS COMPOSÉS CARBONÉS ORGANIQUES :

y Végétaux dépourvus de chlorophylle durant leur vie entière. d Futurs végétaux à chlorophylle mais dénués de pigments verts pendant leur germination.

Entre ces deux classes s'intercalent les mixotrophes : végéaux capables d'emprunter une partie de leur carbone à la manière des autotrophes, tandis que l'autre partie leur est fournie par des combinaisons organiques toutes faites.

Qu'appelle-t-on croissance ?

Comme Bohn, nous partirons de celle idée « que les particularilés morphologiques sont les expressions de la constitulion chimique et que les variations de constitulion chimique précèdent el déterminent les variations de structure » (1). En conséquence, pour comprendre le phénomène de croissance,

(1) La Chimie et la Vie, p. 248.

il n'est pas nécessaire, croyons-nous, d'en aborder ici l'étude au lriple point de vue morphologique, analomique et histologique, mais plutôt de bien saisir Ja liaison qui, d’une part le relie à la nutrilion, et, d'autre part, attache à la reproduction.

Il ne fait aucun doute aujourd'hui que la mulliphcalion se louve nêlre qu'une conséquence de l'accroissement, sorte de prolongement, lui-même talimement Hé au processus nulritif.

Tout être organisé naïîl, grandit, se multiplie et meurt. Schémaliquement, le développement en volume de l'être est subordonné à une prédominance des phénomènes d'assimilation sur ceux de désassimilation ; mais cel accroissement n'étant pas indéfini, 1l arrive fatalement un moment'où la cellule se segmeñte où bien, par quelque autre moyen, se dédouble ait profit d'un deuxième individu (cellule fille), siège, à son four, d'un nouvel accroissement. Or, s'il est vrai, comme nous le pensons, qu'en biologie les mêmes causes engendrent, grosso modo, des eflels analogues, du moins, vis-à-vis d'espèces. identiques, si d'autre part Fensemble des phénomènes vitaux résulte bien d'un nombre très grand mais défini de réactions intraproloplasmiques, comme il n’est point déraisonnable de le croire, où ne peut être laxé d'hérésie en attribuant laccéléralion de Ta croissance à une précipilalon des réactions inhérentes à l'assimilation, celle-éi élant alors non seulement accrue dans Pespace, mais également modifiée dans le temps.

Au point de vue physique, nous cilerons quant aux causes d'une telle accélération, le passage suivant, également emprunté à Bohn : « Dès 1897, F. R. Lillie et Knowlton, en étudiant l'influence de Ja tempéralure sur le développement des œufs de grenouille, ont indiqué que l'accélération avec la température rappelle celle des réactions chimiques. »

Au point de vue chimique, les études de Raulin éclairèrent d'une vive lumière ce chapitre de biologie générale, si bien

que l'on crut à un moment donné tenir le secret des vitesses de prolifération si diverses qu'offrent parfois des organismes identiques végétant en milieux différents. Toute oscillation à celte époque passait hormis quelques conditions physiques, pour n'être qu'une conséquence de la plus ou moims grande facilité qu'éprouve la cellule cultivée à couvrir ses besoins minéraux .

Nous savons, à l'heure actuelle, que ces phénomènes de croissance peuvent, même lorsque les conditions précitées sont remplies, être modifiés dans un sens ou dans l'autre par l'apport de quelques corps qui, pour n'être pas alimentaires, au sens plastique du mot, n'en ont pas moins une certaine influence sur la marche de l'accroissement protuplasmique : nous voulons parler du bichlorure de mercure, des lécithines, de certains phosphates, de l'acide pyruvique, elc., etc.., corps de nature chimique connue d’ailleurs, maïs nullement indispensables, plutôt néfastes même lorsqu'ils sont employés avec excès ou persistance, et d'action bien souvent décroissante, les êtres soumis à leur action s’habituant peu à peu à ces stimulants factices.

Les aliments normaux, habituels des animaux, des végétaux et des êtres inférieurs renferment-ils des corps dynamiquement semblables? L'analyse chimique nous révéla que leur présence ne revêt ni le caractère permanent, ni le caractère obligaloire.

Le processus nutritif chez les animaux

et le rôle des vitamines dans leur croissance.

Nous pourrions, afin de mieux faire saisir la différence qui sépare l'alimentation du règne animal, d'avec celle des végétaux, donner un bref exposé de la question, simple parallèle entre les deux modes de nutrition.

La physiologie humaine nous apprend que les premiers ont besoin, pour croître ou maintenir leur équilibre

À. D'une quantité suffisante d'énergie (graisse-hydrate de carbone :

B. D'une quantité suffisante d'aliments azotés sous forme organique complexe (albuminoïde) :

C. D'une certaine quantité d'aliments minéraux indis pensables ;

D. D'une quantité d’eau minimum

La biologie des grands végétaux et la microbiologie nous enseignent que les seconds, n'ont pas besoin de l'élément organique azoté, pouvant se contenter, sous forme de sels inorganiques dissous, des minéraux reconnus au cours de l'analyse de leurs tissus. (1)

A l'heure actuelle, une nouvelle question se pose : à côté de tous les éléments cités au cours des lignes précédentes,

(1) Il est nécessaire, toutefois, d’adjoindre à ces matériaux certains composés hydro-carhonés au cas où les êtres envisagés ne pourraient utiliser l'énergie solaire,

l'individu appartenant à l’un ou à l'autre règne, n'a-t1l pas besoin d'autres corps, pour mener à bien et dans les condtlions les meilleures, sa complèle évolution ?

En ce qui concerne les animaux supérieurs, la complexité des échanges n'élait pas de nature à simplifier celte question. Quant aux végétaux, il sembla longtemps qu'une solution saline bien établie, chose fort rare, leur était non seulement suffisante, mais supérieure à tout complexus organique.

Forts de régimes théoriquement établis, on sait à quelles difficultés de toutes sortes les physiologistes se heurtèrent quand ils voulurent élever certains animaux à l’aide d'aliments plus où moins synthétisés où simplement puriliés (1). Nous n'insisterons pas sur les nombreuses hypothèses émises pour tenter d'expliquer ces échecs et ne reliendrons que les faits suivants issus des travaux contemporains relatifs à l'alimenlation des vertébrés.

L'attention de certains observaleurs fût, au cours de ces dernières années, atlürée par les faits suivants : lorsque lon élablit deux lots de jeunes souris, par exemple, composés d'individus d'une même portée et sensiblement de même poids, nourris de ralions identiques, pouvant passer à juste litre comme normales ef suffisantes, mais avec la seule différence que le lot numéro 1 recoit ses aliments après stérilisalion prolongée à l'autoclave (une heure à 130 degrés), tandis que le lot numéro 2 les ingère crus, on ne tarde pas à voir les animaux du lot numéro 1 alteints d'accidents lopiques ou bien S'émacier, arrêler leur croissance el mourir, landis que les témoins du lot numéro 2 continvent leur évoluon normalement. Ces accidents se répèlent également si Ja subslance alimentaire, au lieu de passer à l'auteclave, subit une extraction alcoolique un peu approfondie.

Que s'est-il donc passé? Le régime alimentaire est devenu délicient ! A n'en pas douter, la chaleur avait détruit un ou

(1) Expression qui prendra une signification plus claire dans les pages suivantes,

des composés organiques indispensables au métabolisme de la cellule animale, composés non synthétisables par le sujet qui en est privé et, de plus, agissant à très faible dose, puisque 3 centimètres cubes de lait, représentant un extrait sec de 4 0/0 du poids total de la nourriture, administrés à ces mammilères, suffisaient pour leur éviter les accidents dont il vient d'être question.

L'alcool, de son côté, en dissolvant ces corps, les avait si bien entraînés, que rajouté à des rations primilivement épuisées, celles-ci recouvraient immédiatement leur valeur alimentaire intégrale ; valeur qu'elles n'avaient plus, même si l’on avait pris soin de jeur adjoindre les corps gras ou lipoïdes supposés solubilisés.

Nous laisserons volontairement de côté l'historique des recherches relatives aux accidents amenés par l'emploi d'une alimentation exclusivement constituée de riz décortiqué, ces travaux, présents encore à toutes les mémoires, ne nous apprendraient rien de neuf, aussi éviterons-nous une répéhition inutile, renvoyant pour ce sujet aux expériences de C. Funk, d'Eykman, etc. Même remarque à propos de l’intéressante théorie des symbiotes, émise par M. Portier, et que l'on trouvera exposée par l'auteur lui-même, dans le Bulletin de la Société d'Hygiène Alimentaire (vol: VIIT, n° 9 et 1021920):

De tout ce qui précède, le point biologiquement important est celui-ci : la cellule ne peut assurer son anabolisme, ou plus exactement sa croissance, qu'à la condition de pouvoir puiser parmi les matériaux qui lui sont offerts un ou des corps utiles à dose infinitésimale et d'origine eux-mêmes cellulaire.

Ces corps ont été divisés en deux groupes de nature chimique d’ailleurs inconnue, mais présumés être, à lort ou à raison, des acides aminés et dénommés, faute de renseignements plus précis, au moyen de leur faculté de solubilité, soit dans l’eau et l'alcool — facteur hydrosoluble B nécessaire à

la croissance du jeune — soit dans les graisses — facteur lvpo-soluble À indispensable à Féquilibre chez l'adulte.

Funk, le premier, réussit à extraire du son de riz une subslance cristallisable fondant à 233 degrés, capable de faire céder les accidents polynévritiques survenus chez des animaux soumis à un régime déficient.

Ayant cherché dans les lignes précédentes à exposer tant bien que mal un phénomène encore des plus obscurs à l'heure actuelle plutôt que d’avoir voulu mentionner l'ensemble des travaux qu'une telle découverte ne manqua pas de faire éclore, nous passerons sous silence les rapports qui, suivant certains auteurs, plaident en faveur d’une cause première, identique sinon analogue, quant à l'arrêt de croissance chez le jeune, la mort plus ou moins précoce de l'adulte, la polynévrile expérimentale de Gryns (forme nerveuse du béri-béri), les scorbuts, la pellagre, la maladie de Barlow, et en un mot tous les accidents que peut provoquer une nourriture déficiente ou, pour employer un terme que l'usage semble consacrer, une alimentation carencée.

Enfin, nous ajouterons pour mémoire que depuis les travaux de Funk, plusieurs auteurs désignèrent sous le nom de facteur C une vitamine antiscorbutique, d'action nettement différente des facteurs À et B, ceci dit, pour montrer combien la pluralité de ces composés tend à.s'accroître.

Quel rôle physiologique ces corps exercent-ils ? Il est difficile, en l’état actuel de nos connaissances sur celte question encore par trop nébuleuse de pouvoir assigner une action bien nette à ces composés : plusieurs hypothèses ont été émises Jusqu'à présent. Les unes voient en ces substances des corps utilisés directement par la cellule el indispensables à son chimisme: les autres ne leur accordent qu'uñe action de présence, véritable catalyseur des réactions intra-cellulaires.

Enfin, certaines rapprochent les vitamines de corps alcaloïdiques, leur attribuent un rôle dans l’activité des glandes à

secrélion externe, intéressant par là directement une période déterminée de l'acte digestif.

Pour mieux saisir l'esprit de la première supposition, il est bon d'avoir présent à la mémoire les fameux travaux d'Osborne et Mendel sur les acides aminés synthétisables et non synthétisables par l'organisme : parmi ces derniers, un certain nombre d'entre eux, indispensables à l’évolution des jeunes, devraient se trouver en proportion déterminée dans toute ration bien équilibrée. La question, en pareil cas, se ramèneralt, d'après Schaefler, à un besoin quantütatif d'amino-acides qualitativement indispensables.

Quant à l'explication de la seconde version, des discussions trop nombreuses ont été soulevées par ce sujet tant en chimie minérale qu'organique, pour que nous puissions faire mieux que d'en donner une définition générale sans chercher à pénétrer un mécanisme dont nous connaissons à peine les premiers éléments.

Nous dirons donc, avec Hollemann, que l’on entend par catalvse, l'action accélératrice (ou relardatrice dans certains cas) «xercée sur la marche d'une réaction par une substance étransère à celle-ci, substance pouvant agir à dose très velite.

Enfin, nous résumerons l'esprit de la troisième hypothèse par les vues de Lumière à ce sujet : « On peut considérer les vilamines comme des agents excilo-moteurs de l'appareil gastro-intestinal et excilo-sécréloire des glandes à sécrétion externe, dont l'aelivilé serait indispensable à l'assimilation des aliments. » (1)

Ces trois hypothèses furent tour à tour émises, soutenues, et très disculées. Les derniers travaux relatifs à ce sujet, n'ont pas encore réussi à éclaircir le mystère qui plane sur le mode d'action de ces corps. Les résultats enregistrés n'étant en définitive qu'une conséquence de troubles profonds ; cachés derrière la membrane cellulaire, l'histologie à peut-

(1) Bulletin de l’Institut Pasieur, Tome XIX, février 1921, p. 86,

être des chances d'ouvrir quelque peu une voie féconde à l'investigation physiologique dans ces recherches.

Pour nous, un fait est acquis : la prolifération des cellules d'un mammilère est liée à la présence dans la ration de celuici de corps organiques très instables, agissant à dose infinitésimale et provenant eux-mêmes du Jeu antérieur de cellules végétales, car il y a tout lieu de croire, quant à la provenance de ces corps, qu'amenés par voie alimentaire, ils ne soient en premier lieu originaires de ce règne.

Les vitamines sont-elles nécessaires

à la croissance des végétaux ?

De fil en aiguille, Ja question devait fatalement être posée au sujet des végétaux (ant pluri que. monocellulaires. Ces composés, ces vilamines, pour les appeler par leur nom, jouent-elles vis-à-vis des phanérogames le rôle par elles détenu dans l'alimentation animale? Ont-elles même une action quelconque sur la vie végétale ? Si oui, sont-elles de même nature ? Tels ont été les prem'ers points d'interrogation posés à ce sujet. É

D'après les travaux de Bottomley (1) sur la croissance de Lemna minor cullivées en milieu de Detmer, 11 semblerait pouvoir être répondu par lalfirmative ; toutefois, les expériences de ce savant anglais sont, croyons-nous, sujettes à critiques, non pas que nous conlestions les résultats acquis, mais plutôt l'interprétation de certaines expérimentations. En tous les cas, un fait certain constaté par Botlomley est l'augmentation du poids des plantules de Lemna cultivées sur milieu minéral lorsque celles-ci recoivent des quantités extrêmement faibles d'un extrail alcoolique de tourbe de sphagnum préalablement « bactérisée » et stérilisée par la suite (c'est-à-dire abandonnée à l'action de bacilles aérobies

(1) Proceedings of the:Royal Society. 2 August 1915.

isolés de la terre et maintenus quelque temps dans une cerlaine humidité à 26 degrés, puis chauffée avant utilisation).

Descendant plus bas dans l'échelle des êtres vivants, F. Mockeridge (1) oblint des résultats non moins surprenants vis-à-vis du Bacillus radicicola : celui-ci, en effet, cultivé dans une solution minérale appropriée, n'arrivait pas à fixer Île tiers d’azole que transformait le même bacille ayant reçu un extrait aqueux ou alcooïique de tourbe traitée de la même manière.

Bottomley et Mockeridge, par contre, n'eurent aucun succès chaque fois qu'ils se servirent d'extrait de tourbe n'ayant pas été préalablement ensemencée.

De son côté, Jones (2), en Amérique, enregistra des expériences aussi positives à cet égard ; des terres pauvres furent rendues d'une fertilité bien supérieure à la moyenne lorsqu'il les eût mélangées en diverses proportions à de la tourbe ayant subi le traitement suivant : 1° Mélange avec un peu de chaux ; 2° maintien d'une certaine humidité à 25 degrés pendant 30 jours, et ensemencement au préalable avec des bactéries isolées du sol: 3° stérilisation de ladite tourbe après ce laps de temps pendant une heure à l’autoclave : 4° réensemencement par azolobacters pseudomonas radicola et bactéries de la cellulose cultivées à nouveau 60 jours à l'étuve ; 5° enfin culture de radis en terres appauvries ayant recu par lot-et respectivement 0 gr. 5, 2 grammes et 10 grammes 0/0 de tourbe ainsi traitée.

Des témoins faits en assez grand nombre permirent à Jones d'établir que les récolles si luxuriantes de celte crucifère étaient dues à une fixation d'azote beaucoup plus marquée grâce à la tourbe primilivement ensemencée de bacilles divers, ceux-ci ayant favorisé sans doute par quelque déchet de leur vie cellulaire une prolifération bien supérieure d’azotobacters.

(1) Proceedings of the Royal Society, 1 june 1917. (2) Journal of Agricultural Research, 1919.

Maze (1) semble avoir fait faire un pas plus important à la question, il put étudier l'évolution complète du maïs cultivé en Solution minérale, « mais, dit-il, si l’on choisit avec quelque soin les produits commerciaux dont on fail usage et si l'on emploie en outre de l'eau disüllée d'une pureté convenable, on constate que la plante ne peut pas achever son cycle évolutif dans une solution ainsi épurée. « Le développement est plus régulier chez les plantes cultivées dans des solutions préparées avec de l’eau de source ou de l'eau distillée et des sels ordinaires. »

Maze termine ainsi son travail : « La conclusion qui se dégage de la deuxième série d'expériences est donc en faveur d'une mfluence bienfaisante des matières organiques ajoutées à la solution minérale ; mais celte même série d'expériences prouve en même temps que les malières organiques ne sont pas indispensables, si l'on en excepte, bien entendu, les réserves séminales, qui, elles, ne sont pas négligeables comme poids, puisqu'elles atteignent environ 4 à 5 décigrammes par graine. »

H. Agulhon et R. Legroux (2) étudièrent un sujet analogue à celui de Mockeridge, mais en partant d'extraits aqueux ou alcooliques de sang défibriné adjomts à des cultures du bacille de l'influenza (B. de Pfeiffer). Pour ces auteurs, les corps actifs se trouvent dans la partie figurée du sang, car ils reconnurent que le sérum restait inacüf tandis que les globules, subissant un laquage dans l’eau distillée, finissaient par rendre celle-c1 active.

Agulhon et Legroux estiment que le pouvoir de ces subslances n’est pas détruit à 110 degrés, enfin, leurs recherches les ont conduits à penser que : « les vitamines ne semblent être spécifiques pour une seule ou quelques espèces bactériennes. »

(x) Annales de l’Institut Pasteur. T. XXXIIT, 1919, p. 138. (2) Comptes rendus de l’Académie des Sciences. T. CLXVIT, r918, p. 597.

Pour Linossier (1), la question ne fait également aucun doute : « Entre les êtres, animaux ou végétaux, élevés en organisation, qui ne peuvent fabriquer des vitamines el sont obligés de les emprunter à leur alimentation et certains microbes qui en produisent en excès, se développent aisément dans les milieux avitaminés, les champignons inférieurs consliluent une classe intermédiaire d'êtres capables de fabriquer des vitamines, mais parfois en quantité insuffisante et perdant cette propriété quand leur vilalité est diminuée ou quand leur alimentation est d'utilisation difficile. »

Ses conclusions sont tirées d'expériences sur l'oidium laclis, le mycoderma vini et quelques autres végétaux inférieurs. Ajoutons que Linossier estime qu'une température de 135 degrés est insuffisante pour détruire complètement le pouvoir de ces corps lorsque ceux-ci se trouvent en abondance dans un liquide.

Enfin, la question fut traitée à deux reprises différentes par Auguste Lumière (2) : « Quelques biologistes ont prétendu que les vitamines étaient nécessaires à la croissance des végétaux et celte opinion, généralement admise d’ailleurs, résulte d'expériences dont nous ne contestons nullement les résultats, mais dont l'interprétation ne semble s'accorder ni avec d'autres faits, ni avec les nombreux essais personnels que nous avons poursuivis dans ce domaine. »

Cet auteur attribue les effets bienfaisants de quelques goutles d'extrait de corps organiques — de raisin sec en l'oceurrence — au fait que celte adjonction s'effectua toujours à des milieux très pauvres et insuffisants : « Nous avons pu, dit Lumière, nous assurer qu'un grand nombre de produits chimiquement définis, minéraux el organiques élaient susceplibles, en proportions minimes, de fournir les mêmes résultats que ceux qu'on obtient par celte addition d'infusion de raisin

(2) Comptes rendus des séances de la Société de Biologie n° tx (12 avril 1919) et n°11 (20 imars 1920).

CHEZ LES VÉGÉTAUX INFÉRIEURS al

sec et parlois même des résullats meilleurs, tous ces matérlaux ne sauraient êlre considérés comme des vitamines, »

La résistance de ces composés organiques aux hautes lempératures (250 degrés, jusqu'à carbonisalion», leur filtrage possible sur la terre à foulon, leur non précipitauon par l'acide phosphotungstique, sont autant de faits cités par Lumière pour prouver la non identité de ces corps d'avec les vitamines. « Ces substances ne semblent donc pouvoir être assimilées aux vitamines dont elles ne possèdent aucune des propriétés caractéristiques. »

« On sait, dit encore cet auleur, qu'il est possible de culliver certains microbes et certains champignons sur des milleux chimiquement définis et ne renfermant pas trace de vitamines : non seulement la pullulation abondante de ces êlres inférieurs est réalisée d'un façon parfaite dans des bouillons complètement dépourvus de toute substance vitaminique, mais 1l est encore possible d'assurer la croissance el le développement complet des végélaux supérieurs avec des solutions nulritives purement minérales. »

Dans un dernier et récent travail, l’auteur de ces lignes, après de nouvelles recherches résume ainsi ses travaux (1) « Il résulte de ces expériences que tous les caractères des vilamines coustiluant les propriétés spécifiques propres à les définir : indispensabilité, impossibilité de remplacement par des composés chimiques définis, sensibilité à la chaleur, précipitation par l'acide phosphotungstlique et par les réactifs des alcaloïdes, absorption par la terre à foulon et le réactf de Lloyd manquent aux substances qui peuvent, dans les milieux de cullure pauvres, insuffisants, el dans ces milieux seulement, améliorer la croissance des végétaux.

« Ces substances stimulantes occasionnelles ne semblent donc pas pouvoir être assimilées aux vitamines, »

(1) Auguste Lumière : Influence des vilumines el des auximones sur la croissance des végétaux. Ann. de l’Inst. Pasteur. T. XXXV. Janv. 1921, p. 102.

>armi les diverses conclusions que tire À. Lumière de ses derniers travaux, nous citerons celle-ci : « L'addition de ces extraits organiques aux mieux pauvres peut être avanlageusement remplacée par ladjonclion de sels minéraux chimiquement définis, tout au moins dans le cas des mucédinées qui ont été utilisées au cours de ces recherches. »

On voit, malgré quelques contradictions et la briéveté des exposés précédents, qu’un certain rapport semble lier la question des vitamines chez les mammilères à la découverte de corps accélérateurs d'auximones, suivant le terme de Bottomley, chez les végétaux. Nous dirons même, sans dépasser les faits, que les échecs répétés auxquels se heurtèrent bien des expérimentateurs dans la recherche d'une alimentation synthétique se trouvent éclairés d'un jour nouveau à la lueur d'expériences bouleversant actuellement les théories classiques de la nutrition.

Le terme malheureux de vitamine avant été plus d’une fois attribué à des corps dépourvus, nous semble-t-il, de toute propriété vitaminique, 1l est prudent, au seuil de ce travail, d'en définir les caractéristiques essentielles, ou tout au moins celles qui, vu l'état actuel de nos connaissances à ce sujet, nous autorisent à une certaine délimitation, sans pour cela prétendre en donner une définition ne varietur, bien entendu.

Nous appellerons done vilamines (de Funk) ou facteurs accessoires (de Mc. Collum et M. Davis) où auximones (1) (dé Bottomlev), des composés organiques solubles soit dans l’eau et l'alcool, soit dans les graisses, indispensables ou non, suivant les théories au développement des êtres vivants, agissant

(x) Sans préjuger de la parenté qui peut exister entre ces corps.

toujours à dose infinitésimale, destructible par la chaleur, et enfin ne donnant leur maximum d'action qu'adjoints à des milieux nutritifs répondant entièrement —— moins ces corps — aux besoins des organismes expérimentés,

Nous profilerons également de cette mise au point pour

mettre en garde le lecteur contre certaines expressions pouvant prêter à confusion el rencontrées au cours d'articles écrits sur cetle question. C’est ainsi que nous avons relevé le qualificatif « vivant » exprimant l’état sous lequel doivent se trouver certains facteurs accessoires pour agir, c'est-à-dire n'ayant pas été détruits par la chaleur. Ou bien le terme. « mort » pour indiquer linverse. Ces corps élant des composés organiques et non organisés il ne peut être question de vie où de mort, mais plutôt de synthèse ou de destruction. Le mot « ferment », également rencontré, nous semble impropre.

. Au cours de ce’travail, les expressions suivantes furent fréquemment employées : matières ou substances actives ou aclivantes, corps où composés organiques aclifs; tous synonymes du terme vitamine qui ne nous plait qu'à moilié. Loin de nous la pensée d’avoir voulu baptiser une substance ayant déjà un nom de famille : facteur accessoire, lui suffisant jusqu'à plus ample information.

Nous nous sommes donc proposé

Premièrement ; de rechercher si les végétaux inférieurs avaient un réel besoin de certains corps organiques à action spécifique, et si l'absence de ceux-ci constituait une raison sine qua non à leur développement.

Deuxièmement ; s'il était possible d'obtenir ces corps

34 LES FACTEURS ACCESSSOIRES DE LA OROISSANCE

par voie biologique à partir d'éléments minéraux chnniquement définis. |

Troisièmement; si leur extraction à létat pur élal réalisable et dans l'affirmative, leur véritable nature, leur composition chimique.

Ces trois paragraphes formeront dans les pages qui vont suivre l'objet du présent travail, mais avant d'entrer dans Île vil du sujet, il est, croyons-nous, utile de le délimiter après l'avoir situé au cours des lignes précédentes.

Nous avons employé principalement dans ces recherches un saccharomyces cerepisiæ qui, normalement, prohfère bien en milieu artificiel, À cet effet, notre choix s'est fixé sur la levure haute de brasserie portant le numéro 315 dans la collection du laboratoire de microbiologie de l'Institut National Agronomique, dirigé par M. Kayser.

Afin de n'être pas accusé d'avoir trop circonserit le problème, nous avons tenu, au moyen d'expériences diverses, à prouver que les faits observés 1e ne S'appliquent pas aux saccharomyces en particuker, mais que, bien au contraire, les végélaux mono ou pluri-cellulaires sont d'une facon générale influencés au même tre que les levures par certains produits de la vie végétative.

D'autre part, 1 ne nous à pas semblé ulile de chercher à identihier les micro-organismes producteurs de corps actifs pour la raison bien simple que les aérobies en sont à peu près tous créaleurs, leur différence à cel égard sera donc plutôt une question de quantité où de quahilé qu'un partage entre bacilles posiiils et négatils.

Après nous être convaincus de l'exactitude des fails préciés au moyen de nombreuses cullures pures de microbes isolés de lerre prélevées en diverses régions, et dont on trouvera, pour quelques-unes, les caractéristiques essentielles page 47, nos ellorls se sont plus spécialement portés sur un

CHEZ LES VÉGÉTAUX INFÉRIEURS 5) organisme doué d'une rare aptitude quant à la synthèse de ces composés spéciaux, nous voulons dire le Mucor Mucédo (1).

ÏH fallait, d'autre part, pour la bonne marche des expériences, arriver à isoler un deuxième être capable également de se développer sur milieu minéral, mais ne possédant pas, ou presque pas, la qualité essentielle nous ayant fait adopter celle mucédinée. Il était tout naturel que nous nous adressions, à cet effet, à l’auteur d’une infection, dont le résullat ne se traduisall en aucun cas par l'amélioration du milieu contaminé : après quelques recherches, notre choix s'est arrèlé sur le Penicillium glaucum.

Il est presque superilu d'ajouter que toutes nos cullures s'eflectuèrent à l'état pur, et dans des conditions toujours comparables, tant physiquement que chimiquement, nous interdisant à cet égard la moindre approximation. Chaque résullat enregistré 1c1 fut répélé à plusieurs reprises afin d'écarter la part d'erreur possible que toute exXpérimentalion nouvelle peut comporter lorsqu'elle n'a pas été suffisamment contrôlée. |

Enfin, les méthodes employées offrent à tous les points de vue le maximum de garanties nécessaire : nous allons d’ailleurs les énumérer une fois pour loutes, nous réservant d'indiquer dans le texte les réactions parliculières afférentes à certaines recherches.

Pour apprécier la vitesse de prolifération, 3° méthodes lurent employées simultanément, à savoir

1° La voie pondérale.

Le poids de végétal acquis en un temps donné,

Ce poids fut obtenu par la pesée des filtres ayant servi à séparer les êtres de leur milieu : opération effectuée sur filtres larés, ronds, sans pli et lavage à l’eau disüllée, afin d'en

(1) Pierre Gov. Comples rendus des séances de l’Académie des Sciences. T. CEXXII, p. 242, séance du 24 janvier 1927.

écarter le sucre restant, puis dessiccalion jusqu'à poids constant.

2° L'examen microscopique.

La numéralion des globules par champ (lorsqu'il s'agissait de monocellulaire).

Avec homogénéisation préalable, mais sans dilution, la moyenne portant sur b-essais différents.’

3° La voie chimique.

Le quantum d'alcool produit pour un poids connu de sucre quand nous agissions avec un ferment alcoolique.

Ce troisième indice offrant, durant les premiers jours de la fermentation, un rapport très net entre les poids d'alcool et de végétal, lorsque celle-ci a lieu dans des conditions identiques.

Les graphiques suivants, obtenus à la suite de nombreuses expériences, vont nous éclairer à ce sujet:

L'alcool! fût toujours titré par la méthode du compte-gouttes de Duclaux ; les distillations s’effectuèrent en deux parties, lout d'abord, le liquide à distiller était additionné de quelques gouttes d'acide phosphorique destiné à empêcher la formation d'ammoniaque dans le disüllat, car les milieux employés contenant du nitrate d’ammoniaque et de la potasse auraient pu en former sous l'action de la chaleur, d'où erreur possible avec ce mode de titrage. Ensuile, le premier distillat recevait une quantité Juste suffisante de polasse pour y neutraliser les acides volatils passés avec l'alcool. Ce n'est qu'après ces deux opérations qu'une seconde distillation nous permettait d'obtenir l'évaluation rigoureuse de la richesse alcoolique des cultures traitées.

Le saccharose fut toujours dosé au moyen de la liqueur de Fehling, et l'acidité par une solution de potasse titrée en se servant de la phénolphtaléime comme indicateur.

L'azote recherché à l’aide de la chaux sodée et du papier tournesol, son dosage s'eflectua par la méthode de Kjeldaähl, modifiée par Maquenne.

Les deux principaux milieux synthétiques employés furent : le liquide de Cohn (1), convenant bien à la culture de nombreux microbes, et la solution de Mayer (2), particulièrement

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