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Les ingrédients formant le Da Fano, particulièrement le nitrate d’argent et le réducteur, doivent être préparés au moment même, sinon ils ne donnent pas de résultats satisfaisants.

Mitochondries. — Sur les coupes virées du Da Fano, les mitochondries ont une faible couleur brun doré. Si on colore ces coupes par l’hématoxyline ferrique, les mitochondries deviennent noir brun et les sphères vitellines mitochondriales prennent une couleur noir de jais. Dans la fuchsine acide d’ALTMANN elles deviennent rouge clair. Dans la fuchsine acide de Champy-Küll, le bleu de toluidine et l’aurantia, elles sont faiblement colorées en rose et ne ressortent pas bien sur le fond du cytoplasme jaune d’or. Les coupes de Champy-Küll non colorées donnent aux mitochondries une couleur jaunâtre; par l’hématoxyline ferrique elles deviennent noires. Après le Flemming sans acide acétique elles deviennent noir grisâtre par l’hématoxyline ferrique; par la safranine et le vert lumière, on les voit très difficilement, car elles sont jaune pâle, les sphères vitellines mitochondriales étant rouges avec une bordure verte.

Substances nucléolaires issues du noyau. — On les étudie le plus favorablement sur du matériel fixé au picro-formol de Bouin, coloré au bleu de méthyl-éosine de Mann, ainsi que sur les préparations au Champy-Küll. Par le Flemming sans acide acétique suivi d’alun de fer et d'hématoxyline on ne les voit pas du tout: elles se différencient ainsi facilement des mitochondries qui sont fortement colorées. Par le Champy- Küll suivi de fuchsine acide, de bleu de toluidine et d’aurantia, les substances nucléolaires expulsées du noyau se colo-

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rent comme lès nucléoles en rouge foncé. Après le Bouin, ces substances deviennent rouge brique dans l’hématoxyline d'Ehrlich et l'orange G., et bleu foncé dans l’alun de fer, puis l’hématoxyline ferrique. Le bleu de méthyl-éosine de Mann fournit cependant l'épreuve cruciale, car il élimine toutes les autres inclusions cytoplasmiques et donne en même temps aux nucléoles et à leurs substances issues du noyau une couleur rouge foncé. Cette méthode exclut la possibilité de confondre les mitochondries et les substances nucléolaires expulsées du noyau.

Granules de Graisse et de vitellus. — [La différenciation des espèces variées de granules graisseuses et vitellines présente quelques difficultés. Les vacuoles graisseuses se montrent bien dans les préparations au Da Fano et au Mann- Kopsch et ne sont pas difficiles à identifier. Par le Nassonov, elles deviennent noir de jais et disparaissent par immersion prolongée dans l’essence de térébenthine. Les diverses espèces de sphères vitellines se différencient difficilement. Autant qu’on peut s’en rendre compte il n'existe chez les Tortues que des sphères vitellines mitochondriales. Elles consistent probablement en une couche périphérique d’oléine ou de quelque autre graisse non saturée qui se colore en noir grisâtre par le Da Fano et le Flemming sans acide acétique: et en un centre incolore de bases protéiques qui, après le Da Fano, devient noir dans l’alun de fer et l’hématoxyline, où

rouge dans la fuchsine acide.

B) LEZARD

Près d’une douzaine d'individus vivants du Lézard des sables, Uromastix hardwicki, ont été apportés des Indes en Eur rope par l’auteur. Quelques-uns moururent en chemin et les autres peu après leur arrivée en Irlande. Une seule femelle était utilisable sur l'ovaire de laquelle est basé ce travail. Presque tous les stades précoces et très avancés manquent ainsi. La pénurie de matériel ne m’a permis de le fixer que par quelques méthodes importantes seulement.

Les fixations au nitrate de Cobalt de Da Fano, de Mann- Kopsch, de Champy-Küll et de Bouin au picro-formol ont été employées. La méthode de Mann-Kopsch a donné des résultats très satisfaisants pour déceler les éléments de Golgi. Pour éviter la confusion avec la graisse, les coupes étaient traitées à la térébenthine pendant des temps graduellement variés. Après que la graisse est ainsi éliminée, l'appareil de Golgi montre sa couleur noire ordinaire après osmication. Pour une raison inconnue les mitochondries n'ont pas été bien fixées. Elles se sont colorées très faiblement dans l’hématoxyline au fer après la fixation au Da Fano. Par la méthode de Champy-Küll aussi on les voyait difficilement à la périphérie de l'œuf. La fixation au Bouin fut utile pour l'étude de l’épithélium folliculaire.