Le pigment noir
11 existe encore des pigments dérivés :
4. La pyoxanthose, matière colorante jaune provenant de la pyocyanine.
5. Le pigment rouge-brun qu'on observe dans les vieilles cultures et qui est différent du pigment noir.
Etudions d’abord les caractères chimiques de ces pigments.
. La pyocyanine est le pigment caractéristique ; on l'obtient
facilement par le procédé indiqué par M. Gessard. Les milieux
liquides alcalinisés par l'ammoniaque sont agités avec le chloroforme qui dissout la pyocyanine en même temps que des matières grasses. Pour se débarrasser de ces impuretés on filtre le chloroforme et on l’agite avec de l’eau acidulée par de l'acide sulfurique : les matières grasses sont retenues par le chloroforme : L'eau prend une teinte rouge parce qu’elle a dissous la pyocyanine qui à viré au rouge sous l’action de l'acide. On la décante, on ajoute de l’ammoniaque ; elle redevient bleue. De cette solution aqueuse filtrée, à nouveau on extraira la pyocyanine au moyen du chloroforme. Par évaporation le chloroforme abandonne de petits cristaux d'un bleu foncé, réunis en masse : dissoute dans l’eau, qu'on évapore ensuite, la pyocyanine se présente en aiguilles, en octaèdres, ou en tables rhombiques.
La pyocyanine est soluble dans l'eau, l'alcool, le chloroforme, insoluble dans l’éther, le xylol, le sulfure de carbone. Elle vire au rouge par l'action des acides. Les agents réducteurs, l'acide sulfhydrique, l'hydrogène naissant, font passer la solution bleue au vert puis au jaune : la couleur réapparait par agitation à l'air. Les alcalis sans excès à froid n'ont pas d’action sur la pyocyanine.
Elle est très vite altérée par l'oxydation qui la transforme en pyoxanthose. Ce pigment dérivé existait à côté de la pyocyanine
dans le liquide d’où on a extrait celle-ci. Il se retrouve dans le chloroforme qui a cédé la pyocyanine à l’eau acidulée : on pourrait l’en extraire. On l’obtient très facilement en battant à l’air une solution aqueuse de pyocyanine alcalinisée avec la potasse. Il se forme une combinaison violette caractéristique : on traite cette solution par un acide qui ramène au jaune, puis par le chloroforme qui dissout la pyoxanthose et l’abandonne par évaporation sous forme de petites aigrettes jaunes. Cette réaction montre bien que la pyoxanthose est un produit d’oxydation de la pyocyanine.
Les vieilles cultures en bouillon prennent communément une teinte rouge-brunâtre. Pour M. Gessard, cette teinte est due à l'oxydation de la pyocyanine ou de la pyoxanthose.
Le pigment vert fluorescent n’est pas spécial au bacille pyocyanique : il est sécrété par un grand nombre de germes. Il est encore assez mal connu. Lorsqu'on a séparé la pyocyanine d’une culture en bouillon peptoné au moyen du chloroforme, le liquide peut garder une couleur verte et de la fluorescence. L'alcool précipite le pigment sous forme d’une poudre jaunevert renfermant en outre des impuretés. L'eau le dissout et devient fluorescente : les acides minéraux ou organiques le font disparaitre : les alcalis le régénèrent et exaltent la nuance.
La production des pigments dépend de plusieurs conditions qui peuvent se ramener à deux :
