LES MÉTHODES DE LA BACTÉRIOLOGIE

que Ton veut cultiver, on varie la réaction dans certaines limites. Les milieux nutritifs une fois prêts, on y sème les bactéries que l'on veut étudier. On appelle cela un ensemencement ou une inoculation. Veut-on, par exemple, cultiver le charbon. On recueille avec une aiguille de platine que Ton a préalablement stérilisée en la passant dans la flamme d'un bec de Bunsen ou d'une lampe à esprit-de-vin, une gouttelette du sang d'un animal mort du charbon, sang qui contient le bacille spécifique, et on l'ensemence dans un ballon de bouillon. Il est clair que, pour empêcher la culture d'être souillée par des germes étrangers, cet ensemencement doit être pratiqué avec des précautions spéciales. Ainsi, on désinfecte, avec du sublimé à 1 p. iOOO , la peau de l'animal, avant de l'ouvrir, et toutes ces opérations sont pratiquées avec des instruments parfaitement stériles. On tient le bouillon à une température appropriée et les bacilles ensemencés s'y multiplient abondamment. Il est facile alors de les étudier en portant une goutte du bouillon qui les contient sous le microscope. On appelle cela des cultures pures. Toutefois, il n'est pas toujours facile d'obtenir ces cultures à l'état de pureté. On a souvent affaire à un mélange de bactéries

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variées, par exemple dans des liquides en fermentation ou en putréfaction, dans le lait, etc., et il faut commencer par les séparer. Dans ce but, on emploie des milieux de culture solides. En ajoutant de la gélatine ou de l'agar (plante japonaise) aux bouillons, on obtient des milieux nutritifs qui se prennent en gelée aux températures usitées pour la culture des bactéries (15 — 37 degrés). L'agar est employé pour les températures dépassant 22 degrés, la gélatine se liquéfiant au-dessus de cette dernière température. Pour séparer les espèces bactériennes contenues, par exemple, dans un échantillon d'eau ou de lait, on commence par fluidifier un de ces milieux gélatineux contenu dans un tube de verre à une température de 45 degrés environ (si Ton employait des températures plus élevées, les bactéries ensemencées risqueraient d'être tuées), on y ajoute une goutte ou moins encore du liquide à analyser, on agite pour bien répartir les germes et on verse cette gélatine (agar) dans un récipient à fond plat, stérilisé préalablement. En se refroidissant, la gélatine (agar) redevient solide et forme ce qu'on appelle une culture sur plaque. Quand on a lieu de supposer que le liquide à analyser est très riche en bactéries, on commencé par le diluer