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puis on laisse refroidir lentement à 45-48 degrés. C'est alors qu à chaque tube d’agar, renfermant environ 10 centimètres cubes de masse liquéfiée, on ajoute 2 à 3 centimètres cubes de sang, avec toutes les précautions d'asepsie susceptibles d'assurer la certitude absolue de l'absence de quelque ensemencement que ce soit. On mélange aussi complètement que possible les deux liquides, et on verse le tout dans une boite de Pétri rigoureusement stérile. En quelques instants, le mélange voit sa température s’'abaisser, l’agar sanguin se solidifie peu à peu et bientôt tout le milieu de culture adhère au fond de la boîte de Pétri. Il est prudent de ne pas la retourner prématurément de peur de favoriser la chute du voile sanguin, en attendant quelque peu, tout danger de ce genre est évité.

La boîte de Pétri est mise à l’éfuve à 37 degrés, après avoir été ensemencée avec une ôüse de platine qu'on a promenée en quelques traits délicatement à la surlace du mélange où elle trace quelques sillons très superficiels. [l'est recommandé de ne pas faire pénétrer prolondement l’üse ; les cultures poussent moins bien et de plus, si l’on coupe complètement le milieu, les deux parties latérales rétractiles Tont écarter la lente ainsi produite et dénudent une grande partie du fond de la boîte. Celle-ci est laissée à l’étuve de 12 à 18 heures, temps après lequel on commence à voir apparaître, si l’üse de platine transportait du streptocoque une série de petites colonies en nombre variable, ressemblant à de petits points grisâtres ; mais ce quelles présentent de tout à fait caractéristique, c’est

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une auréole transparente qui se développe autour de la colonie dès le lendemain et pendant les 2 ou 3 premiers jours de la culture. Monsieur le professeur Fabre a proposé de Pappeler € l'auréole de résorption. » Car elle est due à la résorption, véritable digestion orgauique, de l’hémoglobine du sang par le streptocoque ou ses toxines.

Cette culture peut se trouver, avec ces caractères typiques, soit sur le sang d’une malade en proie à la septicémie puerpérale dont on a mêlé directement le sang à l’agar, soit sur le sang d’une personne normale ensemencé avec les lochies d’une accouchée. Il y a cependant quelques différences d'aspect. Sans doute ce sont les mêmes colonies petites et grises entourées d’une zône plus claire, mais dans le cas de septicémie, elles sont réparties au hasard sur la plaque et seules. Au contraire, dans le deuxième cas, 1l est facile de comprendre qu’elles poussent le long des stries tracées en surface par l’üse, commençant par résorber le fond du sillon, puis élargissent ensuite leur auréole; de plus les lochies contenant d’autres microbes, ces derniers poussent en même temps le long des mêmes stries, mais avec des caractères différentiels nets, peu de zône résorbante, colonies plus abondantes, plus larges, plus blanches et plus grosses.

Remarquons toutelois que, sur les vieilles plaques de Blutagar, datant de plusieurs jours autour des colonies blanchâtres abondantes, le plus souvent consütuées par des staphylocoques, se développe généralement une zône peu intense de résorption ; il s'agit

d'un phénomène banal, susceptible d’être réalisé par

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n'importe quel agent cultivé, et qui n'a aucune aleur. L'observation de la plaque de Blutagar ne prévaut que dans les trois premiers jours. Nous reviendrons d'ailleurs ultérieurement sur l'importance considérable de lappréciation de la rapidité de la résorption.

Quant on eut en main ce procédé simple de révéler le streptocoque macroscopiquement, et sans même avoir besoin de contrôler au microscope les caractères morphologiques du germe, on crut avoir trouvé un procédé infailhble, toutes les colonies résorbantes se révélaient au microscope sous forme de longues chainettes. Tous les autres microbes, au contraire, non résorbants se reconnaissaient à leur tour: staphylocoques, cohbacilles. Mais bientôt il fallait se rendre à l'évidence ; parmi les colonies non résorbantes, on décelait aussi du streptocoque en chaïnettes typiques et indiscutables. Il fallait admettre deux sortes de streptocoques : l’une hémolysante, l'autre non hémolysante.

Dès lors, quelles différences ou quelles relations fallait-1l admettre entre ces deux variétés ? Etait-ce la même, mais avec des différences de virulence, donc dangereuses toutes deux. Ou, au contraire, lhémolysant seul devait-il avoir des propriétés virulentes ? Autant de questions que les controverses modernes des auteurs allemands sont loin d’avoir résolues à l'heure actuelle d’une façon définitive, mais qui ont dès à présent, croyons-nous, un réel intérêt pratique. Voici, avant d'exprimer notre opinion personnelle, les avis autorisés des maîtres allemands.

Schottmüller proposa une classification des streptocoques qui paraissait résoudre de façon fort simple et très précise cette question complexe. Il les divisa en trois classes, d’après l'aspect de leurs cultures et surtout d'après leur action différente sur l’hémoglobme du sang.

La première catégorie comprenait le streptocoecus pathogène longus sen érysipelatos qui sur Buagar (Agar 5 eme — sang 2 emc) poussent en colonies entourées d’une auréole de résorption.

Le deuxième était constitué par le streptococcus mitior sen viridans qui présente sur le même milieu des petites colonies verdatres sans résorption.

Enfin, le troisième constitué par le streptococcus mucosus, ne résorbait pas non plus, mais se distinguait du mitior par un aspect plus étalé, plus glaireux des colonies.

Schottmüller appuie cette conception sur de nombreuses expériences : recherchant le streptocoque dans l’érysipèle ou dans ses complications, dans des phlegmons graves lorsqu'il s'agissait d'infections par ce microbe, et enfin dans un grand nombre de septicémies sanguines, ce fut toujours le streptocoque hémolysant que ses centaines d’ensemencement lui permirent de révéler. Et par contre Jamais dans ces cas graves il ne découvrit le streptococcus mitior et encore moins le mucosus qu'il ne rencontra en tout que 7 lois et dans des cas bénins. Aussi sans lui reluser toute action pathogène admet-il qu'il n'occasionne que des accidents peu graves. Done pour Schottmüller il y aurait dans

ce mode de culture un moyen très simple de diagnos-

üc du streptocoque virulent, puisque seul il donnerait naissance à l'hémolyse.

Bien mieux, cet auteur admet que la propriété hémolytique est une propriété stable et particulière du streptocoque longus ; jamais il ne serait parvenu à translormer une colonie mitior en longus, ou inversement. Il rejette donc toute idée qui tendrait à accorder la puissance hémolysante à tout streptocoque arrivé à un certain degré de virulence. Et ceci est très important si l'on songe que d’après les expériences de Marmorek, on peut exalter considérablement la virulence d'un streptocoque quelconque par des cultures et des inoculations successives.

Les conclusions de Schottmüller devinrent immédiatentent en Allemagne surtout l’objet de discussions, les uns confirmant, les autres se refusant à admettre une telle certitude expérimentale. “

Elles furent admises par Baumannqui conclut d’un grand nombre d ‘expérimentations que les streptocoques hémolysants proviennent toujours de cas de maladies humaines, tandis que ceux extraits du lait, des fèves, de la salive etincapables d’être pathogènes pour l’homme ne résorbent pas l'hémoglobine et se développent en colonies verdâtres. Niéter arrive aux mêmes conclusions.

Mais par contre Natwig se montre loin de partager ces théories, les expériences lui montrèrent une Îréquence beaucoup plus considérable de lhémolyse. Etudiant le mécanisme de près, il erut pouvoir soutenir que cette hémolyse pouvait se produire de deux façons : l’une résulterait évidemment de la production