SPECTROSCOPIE DU SANG

Le spectroscope, cet instrument merveilleux, qui signala son apparition par la découverte de métaux

— MQOr—

nouveaux, fut, dès son origine, appliqué à l'étude de la matière colorante du sang. On constata que le sang en solution donne un spectre d'absorption caractéristique, qui n'appartient qu'à lui, et que, sous l'influence de phénomènes chimiques faciles à réaliser sur la solution, ce spectre peut se transformer en un certain nombre d’autres également caractéristiques, qui sont comme le contrôle du premier, et léveraient tous les doutes, si ceux-ci étaient possibles. Le spectroscope, comme on sat, est d’une sensibilité analytique prodigieuse : 0, mill. 0000003 de chlorure de sodium suffit à donner les raies du sodium très nettement : avec le sang, on n'arrive pas à une sensibilité si extraordinaire, mais elle n’en est pas moins considérable, puisque deux gouttes de sang dans un litre d'eau peuvent être décelées. D'après Hoppe- Seyler et Draggendorff, une solution de 1 gr. d’hémoolobine dans 10 litres d’eau, examinée sous une épaisseur de 1 cent. présente encore un spectre évident. En examinant sous une épaisseur dix fois plus grande, la sensibilité serait encore accrue.

Comme matériel, 1 faut un spectroscope : cet Instrument si précieux a été jusqu’aujourd’hui d’un prix trop considérable, aussi, se trouve-t-1il rarement entre les mains des experts; mais on en construit maintenant à l'étranger qui sont très accessibles, et certainement nos fabricants français nous en livreront bientôt de meilleurs dans d'aussi bonnes conditions de prix.

On a adapté au microscope ordinaire des spectroscopes à vision directe, qui sont très suffisants pour

l'analyse spectrale du sang : les uns sont simples et donnent uniquement le spectre. Ils peuvent suffire quand on est familiarisé avec les manipulations spectrales ; les autres sont munis de tous les organes du spectroscope de Grandeau : micromètre, fente mobile de collimateur, prisme à réflexion totale pour obtenir un spectre de comparaison. Ges Instruments sont irréprochables, ceux de Sorby et de Wrede surtout sont parfaits, et sont assez précis pour permettre de calculer exactement les longueurs d'onde.

Une bonne source de lumière est indispensable ; la lumière émise d’un nuage blanc, du ciel, sont préférables ; une lampe à gaz ou à pétrole sont très convenables. Certains spectres ne paraissent pas avec ces lumières ; on peut alors recourir à celle du magnésium. Il faut, en outre, un vase pour présenter le sang : M. Cazeneuve se sert simplement de son tube cffilé, qu’il présente à la fente du collimateur aussi réduite que possible. On peut employer des cuves spéciales à parois parallèles, hématinomètres ; des tubes à essais; des flacons en verre taillé, à faces parallèles et à base rectangle; si on dispose de peu de solution, et que celle-ci soit très diluée, on rode à ses deux extrémités un tube en verre de 4 à 5 mill. de diamètre interne et de 5 à 10 cent. de long; on y adapte deux lamelles de verre qu’on fixe avec deux bandelettes de caoutchouc : ce système représente un tube de Biot (PI. VI, fig. 2). Avec le microspectroscope, on emploie un verre de montre, ou si on dispose de peu de sang, on lutte, avee un peu de vernis ou de bitume de Judée, un petit tube en verre de 3 mill.

PORC ARE de diamètre intérieur, sur une lame porte-objet bien

propre, en ayant soin de ne pas souiller Le fond de ce petit appareil (PI. VI, fig. 3).

Manuel opératoire et spectres du sang. — La tache est dissoute dans de l’eau pure en petite quantité, et si la solution n'est pas d’une limpidité parfaite, 1l faut la filtrer dans un très petit filtre blane, qu'on lave ensuite avec un peu d’eau, pour ne pas perdre de substance. Si la tache se dissout mal, on ajoute à l’eau quelques gouttes d’ammoniaque. Le liquide obtenu peut être ou trop concentré, ou trop étendu : dans le premier cas, le spectre est presque totalement absorbé ; on ne voit que le rouge et un peu de jaune; dans le second, il est complet et ne présente pas de raies visibles.

Il est trop concentré : On l’étend d’eau, jusqu’à ce qu'on ait obtenu une teinte vineuse pâle, ou fleur de pêcher ; on observe après chaque addition d’eau, et l’on s'arrête, dès qu'on voit nettement apparaître entre les deux bandes situées entre D et E, une bande bien lumineuse.

Le liquide est trop étendu : On le concentre à une douce chaleur (35°) ou mieux sous la cloche à acide sulfurique. Dans des cas bien rares, le liquide réduit à deux ou trois gouttes ne donne encore aucun spectre visible : alors il faut évaporer totalement dans un verre de montre, que l’on présente lui-même devant la fente spectrale. Si le liquide très étendu présente un volume considérable, il est plus commode d'y ajouter, selon les indications de M. Caze-

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neuve, une solution de chlorure de zinc, puis de précipiter par de l’ammoniaque. Le précipité qui contient toute la matière colorante, est traité par de l'éther chargé d'acide oxalique, en quantité aussi minime que possible, et la solution obtenue est présentée au spectroscope. On peut aussi traiter ainsi que nous l’indiquerons plus loin (taches sur étoffes colorées, lavées dans l’eau de savon), par des solutions de tungstate de soude ou de molybdate d’ammoniaque contenant de l'acide acétique en excès ; le précipité obtenu est dissous dans l’ammoniaque. Ges solutions donnent des spectres très purs.

Le liquide préparé, on dispose le spectroscope: si celui-ci est muni d’un prisme à réflexion totale, permettant d'obtenir un spectre de comparaison, on peut faire arriver par ce prisme un rayon de lumière solaire afin de pouvoir comparer le spectre du sang avec les raies de Frauenhofer. Si l’on opère avec le tube de M. Cazeneuve, ou avec le tube rodé (tube de Biot), on masque avec du papier noir toute la partie de Ja fente du collimateur devenue inutile. Le tube de Biot est disposé horizontalement devant la fente, de façon que le rayon de lumière émis, soit par une lampe à lumière très vive, soit par un nuage blane ou le ciel, le traverse dans toute sa longueur. Si le spectroscope n'est pas muni du prisme de comparaïison, on observe d’abord le spectre solaire et on note avec soin les positions des raies surtout des raies B CD E, entre lesquelles se passent les phénomènes caractéristiques. Les échelles micrométriques varient d'un mstrument à un autre, en sénéral elles sont telles

RE que tout le spectre visible soit partagé en 180 ou 260 divisions. Dans ce dernier cas, on peut placer la raie

D (raie du sodium) sur la division 80. Les autres raies auront alors les positions suivantes :

Avec ces indications, il sera facile de se rendre compte de la position, par rapport aux raies du spectre solaire, des bandes que l’on obtiendra avec le sang.

Après chaque observation, on doit comparer éga- Jement la position des bandes obtenues avec la solution de la tache, avec celles que donne du sang auquel on fait subir les mêmes opérations. Sile spectroscope possède un prisme de comparaison, on compare simultanément le spectre de la tache et celui du sang. Les deux spectres doivent toujours se superposer rigoureusement.

Spectre de l'oxyhémoglobine. — C'est celui que donne une tache qui n’est pas vieille, ou qui n’a pas subi d’influences chimiques. Il est caractérisé par deux raies foncées, séparées par une bande Jumineuse : l’une, étroite, foncée, située près de la raie D de Frauenhofer ; l’autre, plus large, mais moins foncée, située déjà dans le vert (ou à la limite du jaune et du vert). Elle commence assez exactement entre D et KE et s'arrête un peu avant E. Jaderholm a mesuré d'une façon précise la position de ces deux bandes dans le spectre normal, et a trouvé une longueur d'onde : À — 577 1/2 millionièmes de millimètre, et B — 539 1/2. Ces raies sont beaucoup