CHAPITRE II

Observations cliniques avec autopsie et examen

histologique.

A. — Technique.

L'examen histologique de ces cas a été pratiqué presque constamment à l'aide de la méthode de Marchi ; c'est dans ce but que nous avons presque exclusivement utilisé des cas de lésions récentes.

La méthode de Marchi a déjà donné des résultats remarquables dans l'étude des dégénérescences secondaires, bien qu'elle ne date que de quelques années. Mais comme l'interprétation des coupes colorées par ce procédé a créé des divergences d'opinion au sujet de sa valeur exacte, nous pensons qu'il n'est pas inutile de nous expliquer sur ce pointetd'indiquer la technique suivie dans nos recherches.

Cette méthode consiste dans l'imprégnation en masse d'un fragment de moelle ou de cerveau durci ou mordancé au préalable par le liquide de Millier ; l'acide osmique a une action élective sur les produits de désagrégation de la myéline qu'il colore fortement en noir ; on reconnaît ainsi facilement les points frappés de nécrose et les dégénérescences secondaires. Mais dès le début, quelques histologistes ont fait la remarque qu'on voit sur des coupes de moelle normale traitées par ce procédé des points noirs plus ou moins nombreux, semblables à ceux que l'on trouve sur le trajet des fibres dégénérées (SingeretMûnzer, Obersteiner, Sandmeyer).

Ferrier et Turner (1), en présence de ces objections, ont fait une série d'expériences pour vérifier la valeur de cette méthode ; ils ont trouvé que les granulations noires s'observent déjà en très petit nombre sur des fragments de moelle normale, recueillis immédiate-

(1) Ferrier et Turner. Loc. cit. Philos. Trans., vol. 185, 1894, p. 721.

OBSERVATIONS PERSONNELLES

ment après la mort ; elles sont plus nombreuses si l'autopsie n'a lieu que 16 heures après la mort, et enfin l'aspect d'une dégénérescence secondaire n'est que l'exagération de cette coloration observée sur des moelles saines ; ils en concluent qu'on ne peut admettre la présence d'une dégénérescence secondaire que dans les points où les granulations noirâtres sont très abondantes. Ils acceptent avec Murât ow (1) la conclusion qu'on ne peut affirmer la dégénérescence que si on trouve à côté des petits points noirs, de plus grosses boules formées de myéline fragmentée.

D'autres auteurs ont fait une objection encore plus grave : partant de l'hypothèse que les fragments de myéline désagrégée sont repris par les globules sanguins, ils supposent que l'acide osmique peut colorer un corps granuleux ou une granulation moléculaire loin du siège de la dégénérescence.

Depuis qu'on a acquis une plus grande expérience de la méthode de Marchi, on a reconnu que ces critiques ne sont pas absolument exactes, mais qu'elles justifient certaines précautions.

Dans nos recherches, nous nous sommes abstenu de prendre des fragments dont l'épaisseur dépassât 4-5 millim. ; et comme l'imprégnation se fait plus lentement si le fragment est volumineux ou si la pièce a été trop durcie par le liquide de Mùller, nous avons utilisé dans ces cas de grandes quantités de liquide. Dix jours suffisent en général à l'imprégnation d'un morceau de moelle ou de bulbe ; pour les fragments volumineux, il faut une vingtaine de jours. On n'a pas de surcoloration si on a soin de laver longtemps les fragments pour enlever l'excès d'acide osmique; sans aller aussi loin que Gee et Tooth qui disent qu'il faut laisser les morceaux huit jours au lavage, nous pensons qu'il faut en moyenne 36 heures avec un courant d'eau continu.

La deshydratation (alcool, alcool absolu, mélange d'alcool et d'éther) peut se faire très rapidement en 2-4 jours, même si les fragments sont volumineux; il n'est pas non plus nécessaire défaire, comme pour la méthode de Pal, une inclusion lente à la celloïdine; ce dernier procédé n'évite pas la nécessité du collodionnage des coupes lorsque les fragments sont friables ou un peu volumineux.

(1) Mukatow. Arch. fur Anat. u. Phys., 1893, p. 99.