CHAPITRE XXXIX

MYCOSES.

A.— Procédés d'examen.

Les procédés varient avec le matériel à examiner. L’examen directdes champignons, sans coloration, après dissociation, se fait soit dans le lactophénol de Amann, soit dans le liquide de Pinoy.

Lactophénol de Amann :

Acide phénique cristallisé pur. 1pr Acide lactique. . FTRTIEE Legr:

Glycérine. 2 gr.

Eau distillée. gr:

Liquide de Pinoy :

Hydrate'de-chloral ER PME RP ONIRMIE 40 cc.

Glycérine. +. . LU mn hrs EM ON ARE 20 cc.

Eau ; 20 cc.

Sol. alcoolique d’acétate de plomb à 2 op. k 10Fcct

EXAMEN DES SQUAMES ÉPIDERMIQUES ET DES POILS POUR LA RECHERCHE DES CHAMPIGNONS PARASITES. — Les squames ou poils sont déposés sur une lame, lavés à l’éther, puis immergés dans une goutte de solution de potasse caustique à 40 p. 100, recouverte d'une lamelle, et portés à 1000 sur la flamme de la veilleuse, pendant 15 à 20 secondes. La préparation est alors éclaircie. On peut l’'examiner. Ou bien la laver et colorer 24heures dans une solution alcoolique saturée de bleu de méthylène étendue de moitié d'eau; laver à l’eau soigneusement ; faire agir la solution de Gram pendant 5 minutes ; laver à l’eau. Décolorer par le mélange de :

Xylol. . LL RE ANS dec.

Huile. d'aniline. «4:14 US PE 2ICC:

Laver au xylol pur et monter au baume.

(Favus, Teignes, Trichophyties.)

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On peut aussi examiner à froid les poils parasités dans le chloral-lactophénol composé de :

Hydrate de chloral cristallisé. . . . 2 parties en poids Acide phénique cristallisé. . . . , 1 »

Éadelacique FU Li. - 1 »

Ce procédé est plus simple que celui de la potasse et éclaircit suffisamment.

Pour les dermatomycoses (Püyriasis versicolor et Erythrasma microsporoides minutissimus), dissocier les squames épidermiques dans une goutte d'acide acétique glacial, laisser sécher et fixer à l'alcool absolu, puis colorer à chaud avec le bleu de toluidine à 1 % et différencier à l’essence de girofle, colorer le fond à l’éosine : le parasite est coloré en bleu violacé.

Pour le Muguet, colorer au violet de gentiane phéniqué.

Pour l’Actinomycose, traiter le produit de raclage par la potasse à 40 p. 100, laver et colorer par la méthode de Gram, puis par l’éosine qui colore les massues en rose, alors que les filaments prennent la couleur violette (voir ch.vir).

PRÉPARATION DES MOISISSURES. (Wéthode de Pinoy.) — Choisir une très jeune fructification. La saisir par la base au moyen d'une pince à pointes fines et la poser sur une lame.

Déposer sur la lame, auprès de la moisissure, une goutte d'alcool ammoniacal et l’amener au contact de la moisissure au moyen d’une pointe d’aiguille. L'alcool commence à mouiller la moisissure et permetaux liquides employés ultérieurement de pénétrer les tissus.

Faire agir ensuite le liquide de Flemming :

Acide osmique à 2 p. 100. . . . . . . . 4 cc. Acide chromique à/1 p.100 + : 15 cc.

ATIDOIACCIQUER 0e ee NU TT re Ice:

Laver à l’eau. Appliquer une lamelle sur la préparation et examiner.

Si l’on veut obtenir une préparation persistante, remplacer l’eau par de la glycérine ; on dépose une gouttelette de glycérine d’un côté de la lamelle et on absorbe l’eau du côté opposé avec une bandelette de papier buvard. On borde ensuite à la paraffine.

GOMMES RAMOLLIES, PUS. — Examen direct entre

lame et lamelle, la réfringence des filaments mycéliens permetde voir ces éléments. Si l’examen est négatif, faire, après fixation, une coloration par la méthode de Gram.

GRAINS DES MYCÉTOMES. — Examen direct après dissociation dans le lactophénol. Après fixation, faire des inclusions et des coupes. ke

BRONCHOMYCOSES. — Examen direct et après, coloration des crachats par la méthode de Gram.

B. — Milieux de culture des champignons.

Pour l'isolement des champignons deux milieux sont suffisants : 1° la carotte préparée suivant la technique indiquée pour la pomme de terre ; 2° la gélose maltosée de Sabouraud.

a) Milieu d'épreuve de Sabouraud :

EAU: 2 Pit re NN PRES PRIT Re Gélose ti. sc NME) CONTACTE ONE MES. 18 gr.

Maltose brute de Chanut, . . . . . : . 40 gr. Peptone granulée de Chassaing. . . . +. . 10 gr.

Mêéler le tout dans un ballon ; porter à l’autoclave et monter lentement avec une couronne de gaz jusqu'à 120°, éteindre et laisser descendre. Agiter en sortant de l’autoelave, filtrer à chaud sur papier Chardin, répartir en tubes ou en fioles, boucher au coton. Stériliser à l’autoclave en montant lentement jusqu'à 120°et éteindre.

b) Milieu de conservation de Sabouraud.

Même formule que ci-dessus en supprimant les hydrates de carbone.

EXAMEN DES CULTURES DE CHAMPIGNONS. — Prélever un fragment de la culture à examiner, le dissocier délicatement dans le lactophénol et examiner entre lame et lamelle.

Dessiner les mycéliums,les formes de reproduction, l’as-

pect de l'appareil sporifère, les dimensions des spores et fixer leurs dimensions respectives.

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