II. — Magenta-picro-carmin d’indigo (Ramon y Cajal

Les coupes sont plongées dix minutes à froid dans la solution suivante :

Solution saturée de Magenta dans l’alcool absolu. . 5 cent, cubes.

Eau . . . . . 45 —

Laver à grande eau.

Colorer dix minutes dans :

Carmin d’indigo sec . . . 0 gr. 25

Solution saturée d’acide picrique dans l’eau. i . 100 cent, cubes.

Rincer à l’eau distillée.

Laisser deux minutes dans :

Eau distillée . . . 100 cent, cubes.

Acide acétique . . . . R gouttes.

Alcool absolu, en surveillant au microscope, xylol, baume.

Par cette méthode, les noyaux sont colorés en rouge rubis, les protoplasmas en jaune verdâtre, les“ fibres conjonctives en bleu, les fibres musculaires en gris, les fibres élastiques quelquefois en rouge assez franc. La différenciation du cytoplasme est faible.

HL — Coloration au safran et a l’éosine (P. Masson).

La solution de safran, toujours aqueuse, s’obtient en faisant bouillir 1 gramme de safran dans 100 centimètres cubes d’eau de source pendant une demi-heure. . .

Filtrer et ajouter V gouttes de formol ordinaire.

FOIE

La solution se trouble au bout de quelques jours, mais conserve ses propriétés pendant deux ou trois semaines, rarement plus.

De préférence les pièces sont fixées au liquide de Bouin.

Les fixateurs à base de formol, de sublimé, le Zenker donnent aussi de bons résultats.

Les coupes sont d’abord colorées à l’hémalun de Mayer.

Il est indispensable que ce réactif ménage le tissu conjonctif en blanc Si ce tissu présentait une teinte violacée, même légère, il faudrait différencier dans le mélange :

Alcool à 90

Laver à l’eau de source.

Bleuir dans une solution de carbonate de litbine à 1 p. 100. Laver à grande eau pour éliminer toute trace du réactif alcalin qui empêcherait l’éosine de prendre.

Colorer dix minutes dans :

Éosine W. g. de Grübler.

Eau de source . .

ou, si l’on préfère, deux heures et même davantage dans :

Éosine W. g. de Grübler . . . : . 1 gramme

Eau de source... . . . 100 cent, cubes

Laver à grande eau.

Verser la solution de safran sur les coupes et laisser au contact pendant cinq à dix minutes.

Laver rapidement à l’eau.

Alcool absolu, xylol, baume ou dammar.

Ces indications sont les meilleures si l’on se sert de safran d’Espagne. Si l’on emploie le safran du Gâtinais plus énergique, il sera bon d’augmenter d’un tiers la durée du bain d’éosine.

Certains échantillons de safran, datant de plusieurs années, colorent avec une très grande lenteur.

Avec cette méthode, les noyaux sont bleus, les protoplasmas roses, rouge saumon ou orangé avec différenciations très fines, les fibres nerveuses, élastiques et musculaires rose franc très vif; les granulations éosinophiles ont une coloration intense, les fibres conjonctives sont jaune d’or brillant.

Conserver les préparations à l’abri de la lumière.