PRÉPARATION DU SÉRUM. MILIEU

Préparation du sérum Milieu.

S’il en est ainsi, il ne nous reste, à l’heure actuelle, qu’à vacciner les chevaux contre le plus de streptocoques possibles. Si, dans le nombre, il s’en trouve plusieurs pareils, conlre lesquels les chevaux vont réagir de façon identique, le mal ne sera pas grand.

En revanche, en multipliant le nombre d’échantillons, nous augmentons les chances d’avoir un sérum réellement polyvalent, c’est-à-dire, le seul qui réponde aux besoins de la pratique journalière.

En discutant le problème de l’unicité ou de la multiplicité de streptocoques, nous avons indiqué, chemin faisant, les principaux types de sérums actuellement employés. Nous allons décrire maintenant celui que depuis huit ans nous préparons à l'Institut Pasteur (1).

La question du milieu a été, pour le streptocoque, toujours une de celles qui préoccupaient le plus les bactériologistes. Marmorek, qui essaya un grand nombre de milieux, s’arrêta finalement au bouillon-ascite. Plus près de nous, Aronson, auquel nous devons un des sérums les plus actifs, se serL de bouillon glucosé, milieu excellent, mais tort capricieux. D’autres bactériologistes ont employé des milieux plus ou moins compliqués, mais toujours à base de bouillon .

Nous avons dérogé à cel usage : nous opérons sur des streptocoques cultivés en milieu solide. Or, sur gélose, le streptocoque forme des colonies très petites et souvent, comme c’est le cas pour le microbe de Marmorek, c’est à peine si l’on y distingue une trace de culture. Il faut, cependant, pour immuniser les chevaux, avoir de grandes quantités de corps microbiens.

Pour cela, nous avons recours au procédé suivant.

Tous les échantillons de streptocoques — et nous en possédons plus de 40 — sont ensemencés et conservés dans notre milieu qui est un mélange de parties égales de bouillon Martin et de sérum chauffé (56°, une demi-heure) de cheval ; dans ce milieu, les streptocoques restent longtemps vivants eL conservent très bien leur virulence.

Après s’être ainsi habitués à vivre en présence de sérum, les streptocoques poussent ensuite très abondamment sur la gélose que l'on a eu soin d’arroser préalablement avec un peu de sérum de cheval.

Nous faisons nos cultures dans des boîtes de Houx, ayant 22 centimètres de longueur sur 11 centimètres de largeur. Une heure avant

(I) Annales île l’Inslitut Pasteur , juin 1004.

282 A. BESREDKA. — SÉROTHÉRAPIE ANTISTREPTOCOCCIQUE.

de procéder à l’ensemencement, nous ajoutons dans chaque boîte de gélose 1-1,5 centimètre cube de sérum chauffé de cheval. Sur une gélose ainsi préparée, puis largement ensemencée, on a, vingt-quatre heures après, une culture si riche que, pour être injectée dans les veines d'un cheval, elle a besoin d’être diluée dans 100 centimètres cubes environ d’eau physiologique.

Ce milieu de gclosc-sérum, tout en fournissant une grande quantité de corps microbiens, offre cet avantage qu’il permet un dosage assez précis du virus injecté, ce qui n’est pas à dédaigner, vu la sensibilité extrême des chevaux aux injections intraveineuses, les seules que nous pratiquons pour les immuniser.

Injection de streptocoques aux chevaux.

A chaque injection, nous introduisons dix différents streptocoques dont tous, sauf un seul, ont été isolés dans les slreplococcies humaines (scarlatine, érysipèle, fièvre puerpérale, phlegmon, septicémie, etc.). Ces streptocoques de provenance humaine, étant généralement peu pathogènes pour les animaux de laboratoire, ne peuvent guère servir au dosage du sérum ; c’est pourquoi nous leur adjoignons un streptocoque qui, par des passages successifs, avait été rendu très virulent pour la souris et pour le lapin.

En admettant — ce n’est qu'une hypothèse — que le cheval s’immunise dune façon à peu près égale vis-à-vis de tous les streptocoques qu’on lui inocule, il y a lieu d’espérer que le streptocoque virulent, le streptocoque de passage, pourrait servir en quelque sorte d’indicateur de l'état d’immunité du cheval vis-à-vis de la totalité des streptocoques.

Chaque injection est suivie d'une forte réaction thermique (plus de 40°) qui, du reste, ne se maintient pas longtemps; après quarantehuit heures, tout rentre dans l’ordre.

De temps à autre, on observe cependant ceci : un cheval qui paraissait complètement rétabli, est de nouveau pris de fièvre dix à quinze jours après l’injection. Tantôt il accuse des troubles articulaires, tantôt il présente des phénomènes inflammatoires à quelque distance des articulations. Dans ce dernier cas, on voit apparaître dans l’épaisseur des muscles un liquide séreux qui finit par se frayer un passage au dehors. L’anirual maigri 1 cl pendant des semaines il est hors de service. Dans un cas, le cheval esl mort après quelques jours de maladie; à l'autopsie faite par M . Krascy, médecin-vétérinaire de l’Institut Pasteur, on a trouvé les muscles de la région malade infiltrés de masses gélatineuses baignant dans un liquide