ET DES MATIÈRES ALBUMINOÏDES QU’ON EN EXTRAIT

Protéine du blanc d’œuf. — Il s’agit de la protéine de M. Mulder. L’albumine du blanc d’œuf coagulée, débarrassée de matières extractives par l’eau, l’alcool, l’éther, de phosphates terreux par l’acide chlorhydrique étendu, a été dissoute dans une lessive de soude caustique de concentration moyenne (8 à 10 parties de potasse pour 100 d’eau), et la solution chauffée à Ôo° cent, jusqu’au moment où l’on percevait nettement l’odeur de l’ammoniaque. La liqueur, refroidie, donna, par l’acide acétique employé en très léger excès, un précipité d’apparence caséeuse, qui a été lavé à grande eau et à l’alcool. Le produit possède deux des propriétés de la caséine : la solubilité dans l’acide acétique et dans le carbonate de soude.

Pouvoir rotatoire de la protéine du blanc d’œuf.

a. En combinaison acétique, séché à 1200 cent. :

aj = ô°’2\’ ftm 2, v=ôcy p = o%r, 43, cendres o&r,oo4, [«]/ = So0^"^.

b. En solution dans le carbonate de soude :

aj = 6°,o8\, /= 2,u = 5cc, p = osr,36i, cendres oSr,o88, [àt]j = 42°, i'"\.

Pour obtenir directement le pouvoir rotatoire, on a déterminé

312 M. A. BÉCHAMP.

ce que cette protéine représente de matière à i4o°, puis on en a dissous un poids donné, cendres déduites, sous volumes connus, dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau et dans une solution étendue de carbonate de soude. Trouvé.

a. En solution acétique :

aj=3°,33\, /=2, » = 35cc5, />= 1^,908, [a]y=3o°,9\;

b. En solution par le carbonate de soude :

aj = 5°,74\, /= 2, u = 6occ, p = 4gr,io3, [a]j=4a°\.

En vue de la purifier plus complètement, la solution de la . protéine dans le carbonate de soude a été reprécipitée par l’acide acétique. On s’est assuré que les liqueurs séparées du précipité ne contenaient presque pas de matière albuminoïde; on peut apprécier par là le genre d’homogénéité de la substance. Elle a été séchée à ioo° jusqu’à poids constant, la protéine perdant, d’après M. Mulder, toute l’eau hygroscopique à 1 oo°. Dans cet état de siccité, elle laissait seulement o.54 p. 0/0 de cendres. On en a de nouveau pris le pouvoir rotatoire :

a. En solution acétique (acide étendu) :

a.j= l— 2, ï> — 42cc, p — 4gIi 262, [a]y=3o°,i\; .

b. En solution dans le carbonate de soude (il a fallu oSr,2 85 de C02NaO pour dissoudre la protéine employée) :

a,j=8°,i'*\, /î=2, r = 43cc, p = 4gr,264, [a]y= 4o°18Ay

Les nombres obtenus pour le pouvoir rotatoire de cette protéine sont si voisins de ceux de l’albumine du blanc d’œuf, malgré la différence du dissolvant, que des doutes étaient permis et sur les nombres et sur la substance. Le résultat suivant a été ob-

tenu avec la protéine d’une autre préparation. 2 grammes de cette substance (supposée séchée à i4o°, cendres déduites) ont été dissous dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau. Trouvé :

aj=5°,65\, 7=2, = 2 6CC, p = 2ë%o, [a],- = 3 6°, 7\.

Il est donc possible, quand on se place dans les mêmes conditions , d’obtenir une matière à pouvoir rotatoire constant.

J’ai profité de l’occasion pour doser la quantité d’acide acétique que la protéine peut fixer. La solution acétique, évaporée, séchée sur la chaux dans le vide jusqu’à poids constant, a donné, après distillation, etc. :

Composé acétique . isr>99

Potasse titrée à 47/1000 . 10", 35

Acide acétique équivalent . o^ôai

Acide acétique (C4H303, HO) p. 0/0 . 3i.2

Il est nécessaire de faire remarquer que la protéine de ces expériences se dissolvait dans le Carbonate de soude et dans l’acide acétique, à la manière de la gomme ou de la caséine, sans se gonfler. Il convient de noter aussi quelle pouvait, superficiellement, être confondue avec la caséine; mais, indépendamment de son pouvoir rotatoire, qui est près dé trois fois plus petit, j’ai constaté qu’elle pouvait être chauffée à i4o° sans perdre sa solubilité dans les dissolvants indiqués.

Protéine de blanc d’œuf préparée sans l’application de la chaleur. — - Plusieurs auteurs affirment que, lorsqu’on dissout une matière albuminoïde, à la température ordinaire, dans la potasse diluée, et que l’on sature la solution par un acide, le précipité obtenu (qu’ils nomment protéine ) renferme tout le soufre de la matière albuminoïde , la solution alcaline ne dégageant d’ailleurs aucune trace d’hydrogène sulfuré pendant la saturation. La réaction du sulfure, disent-ils, ne se manifeste que si l’on emploie la potasse Sav. étrÀng. t. XXVIII. — N° 3.

314 M. A. BÉCHAMP.

concentrée et qu’on chauffe le mélange W. Il y a là une double assertion qui devait être vérifiée.

Le blanc d’œuf avait été précipité par l’alcool, et le coagulum, lavé à grande eau, encore humide, traité par une solution de soude caustique à 8 p. o/o. Le mélange forme d’abord une gelée : il n’y a pas dissolution, même quand on emploie une quantité de soude quatre à dix fois plus grande qu’il ne faut pour produire l’alhuminate théorique. La gelée alcaline, abandonnée à elle-même, après douze heures s’est trouvée liquéfiée; la solution était parfaite , et l’on percevait l’odeur ammoniacale. On précipite par l’acide acétique en très léger excès , et l’on constate un dégagement très net d’hydrogène sulfuré. Le précipité, d’abord floconneux, s’agglomère peu à peu; on le purifie par dissolution dans le carbonate de soude, reprécipitation par l’acide acétique, lavage à l’eau, à l’alcool, etc. La matière, séchée à 120°, a été dissoute dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau. La valeur de p est inscrite , cendres déduites. Trouvé :

aj === 5°,ÔNy, 7^=2», = 2 5CC, p = 1 £r, 4o 2 , [a)j = 49'>*V

Ce résultat prouve, contre les auteurs, le fait du dégagement d’hydrogène sulfuré, à froid; il prouve, en outre, que la protéine obtenue est quelque peu différente de celle qui se produit à chaud.

Protéine préparée avec de l’albumine du blanc d’œuf dans un état particulier. — Du blanc d’œuf avait été desséché, pulvérisé, lavé à l’alcool et à l’éther. Après ce traitement, qui laisse souvent à l’albumine sa solubilité, il se trouva qu’elle était en grande partie devenue insoluble. La matière, lavée l’eau, a été débarrassée de tout ce quelle contenait de soluble <2b Elle a été traitée par la soude caustique à 8 p. 0/0; chauffé à 5o° cent., etc. Au moment Ch. Gerliardt, Traité, t. IV, p. 5i5.

(2) fl s’est trouvé que la portion restée soluble ne donnait pas de précipité par

de précipiter, par l’acide acétique , l’odeur de l’ammoniaque a été nettement perçue. Pendant la précipitation, constaté le dégagement d’hydrogène sulfuré. La protéine obtenue , très blanche , bien lavée, encore humide, a été partagée en deux parties : l’une a été dissoute dans l’acide acétique, l’autre dans le carbonate d’ammoniaque, pour en prendre le pouvoir rotatoire. Trouvé :

a. Solution acétique, après destruction de la combinaison :

o/ = 2V4\, 1=2, tit='5œ, p = o&r, 102 , cendres o&r,oo2 , [a]j = 5 2

b. Solution dans le carbonate d’ammoniaque :

CLj = î °, 1 3^, l=i, v = 5CC, p = oSr,o53, cendres o&r,ooi , [a] j =

On voit que le pouvoir rotatoire de la protéine préparée de la même manière diffère selon que le blanc d’œuf a été diversement traité.

Sur la matière qui reste en solution après la séparation de la protéine. — La protéine ne représente jamais la quantité de l’albumine employée. Dans l’opération ci-dessus, les liqueurs filtrées précipitent par le sous-acétate de plomb. Le précipité plombique bien lavé a été décomposé par l’acide carbonique et un peu de carbonate d’ammoniaque, pour enlever l’oxyde de plomb. La solution a fourni le pouvoir rotatoire suivant :

aj = 2°>92\, ^=2> v = 5cc,

p = o£r, 1 9 3 , cendres 0^,024, [a]y = 37°,8Ny.

La matière dont il s’agit est donc soluble dans l’eau; elle est

l’extrait de saturne, mais bien par l’extrait de saturne ammoniacal. C’était donc surtout la leucozymase et une certaine quantité de secondovalhumine qui restèrent solubles.

316 M. A. BÉCHAMP.

albuminoïde, elle répand l’odeur de corne brûlée pendant l’incinération; sa solution précipite par le réactif de Millon, et se colore en rouge si l’on vient à chauffer.

Protéine de primovalbamine. — La primovalbumine a été coagulée par la chaleur, le coagulum lavé à l’eau traité, encore humide , par la solution de soude caustique au huitième et à froid. Il se forma une gelée qui était fluidifiée seize heures après et sentait l’ammoniaque. Pendant la précipitation par l’acide acétique, il y a dégagement d’hydrogène sulfuré. La protéine, bien blanche, bien lavée, est dissoute, encore humide, une partie dans l’acide acétique, une partie dans le carbonate d’ammoniaque étendu. Trouvé :

a. Solution acétique , après destruction de la combinaison acétique :

CCj^ 2°,2Ô\, Z= 2, 1>=5CC,

p = oSr, 117, cendres nulles, [a]j = 4 8°^.

b. Solution dans le carbonate d’ammoniaque :

rl0,9i\,,=2, v=5cc’

p = 0^,10, cendres nulles, [ct\j = 47°>7*V

Il a fallu étendre les solutions, car elles absorbaient beaucoup de lumière, quoique presque incolores et parfaitement limpides.

Tels sont les résultats que j’ai obtenus en étudiant la protéine de blanc d’œuf. Malgré les différences des pouvoirs rotatoires, on peut admettre que la partie coagulable du blanc d’œuf en totalité (mélange de primovalbumine et de secondovalbumine) aussi bien que la primovalbumine donnent la même protéine. Des expériences plus précises sont nécessaires pour déterminer le rapport entre la protéine insoluble que l’acide acétique précipite èt

la matière qui reste en solution, et que l’on isole par le sousacétate ou par d’autres moyens. Les déterminations de cet ordre et l’analyse élémentaire conduiront à la solution du problème relatif à l’action des alcalis. Il y a bien d’autres données à acquérir ! Par exemple : s’il se dégage de l’ammoniaque dans la réaction (sur quoi on a passé bien légèrement), c’est, sans doute, qu’un ou plusieurs des composants complexes de la matière albuminoïde ont été détruits, tandis que les autres se sont arrangés dans d’autres conditions d’équilibre. Quoi qu’il en soit, ces résultats sont suffisants pour démontrer que les produits formés par les albumines coagulables du blanc d’œuf ne sauraient être confondus avec les produits de l’action de l’acide acétique et de l’acide chlorhydrique, dont les pouvoirs rotatoires sont plus grands de 18 à 20 degrés. Ils ne peuvent pas être confondus non plus avec la caséine , la fibrinine , la syntonine , etc. , sur quoi nous avons déjà insisté.

Action de la potasse sur la leucozymase. — Un échantillon de leucozymase dont le pouvoir rotatoire était — 73° a été traité, en solution très concentrée, par la solution de soude caustique a 8 p. 0/0; chauffé à 5o°. Constaté le dégagement d’ammoniaque. La solution refroidie, traitée par l’acide acétique, ne produit pas de précipité. Constaté le dégagement d’hydrogène sulfuré. La leucozymase ne donne donc pas de protéine. La solution acide, filtrée, est traitée par un grand excès d’alcool à 94° cent. Le précipité qui se forme s’agglomère en une masse molle, qui, lavée à l’alcool, se dissout dans l’eau sans résidu. Trouvé :

Uj= 1°, 1 l.\, /= 2, 10cc,

p = oSr, 1 4 1 , cendres 0^,019, [a]j =

Malgré l’abondance des cendres, il faut noter ce pouvoir rotatoire, qui est moitié plus petit que celui de la leucozymase, et le fait que celle-ci ne donne pas de protéine. Les eaux mères alcoo-

liques distillées laissent un résidu qui dévie encore à gauche. II y a donc encore un autre composé de la réaction!

Examen des produits qui résultent d’un autre mode d’action de la potasse ou de la soude sur l’albumine du blanc d’œuf.

Lorsque l’on ajoute une solution de potasse ou de soude caustique au blanc d’œuf non coagulé , ou à ses albumines après coagulation, il se produit une masse plus ou moins visqueuse et cohérente. Nous avons vu que cette masse se liquéfie peu à peu, à froid, et fournit une solution parfaite. Aussi longtemps que la masse reste visqueuse , on ne constate pas de dégagement d’ammoniaque; ce dégagement ne vient qu’après la liquéfaction, de sorte que, très probablement, celle-ci est l’indice d’une réaction déjà profonde. Nous savons déjà que le pouvoir rotatoire de la matière albuminoïde du produit fluidifié n’est celui d’aucune des matières albuminoïdes du blanc d’œuf et qu’il peut être notablement plus grand que celui de la protéine de Mulder, formée en chauffant.

M. Lieberkühn a étudié le produit de l’action de la potasse caustique sur le blanc d’œuf, avant la fluidification, pendant qu’il est encore cohérent et visqueux. L’auteur traite une solution très concentrée de blanc d’œuf par une solution également concentrée de potasse. Une masse élastique, d’autant plus consistante que, les solutions sont plus concentrées, prend naissance. En enlevant l’excès de potasse, l’auteur obtient un produit soluble dans l’eau bouillante et dans l’alcool. C’est celui que l’auteur considère comme identique avec la caséine du lait ( caseïn-alkali ) (l). J’ai répété l’expérience, et, cela est évident, si l’albuminate de potasse ainsi formé est identique avec la caseïn-alkali, réciproquement, la caséine traitée de la même manière doit produire un composé identique avec l’albuminate et, par conséquent, possédant le même pouvoir rotatoire. Je vais exposer les deux faces de la question, avec les expériences à l’appui.

:,) Jahresbericht. von Justus Liebig und Hermann Kopp für i852 , p. 692.

I. Une solution concentrée de potasse caustique est ajoutée goutte à goutte à une solution concentrée et limpide de blanc d’œuf. La masse, très épaisse et cohérente, est aussitôt reprise par l’eau distillée. Une grande quantité de matière entre en solution, mais peu à peu. Le filtre retient une petite quantité d’un produit sous forme de gelée.

Examen de la solution. — Si la potasse a pour effet de former la caséine avec le blanc d’œuf, la solution doit la contenir, car la véritable caséine se dissout dans ces conditions. On y ajoute de l’acide acétique; le précipité qui se produit n’est pas blanc mat comme la caséine, ou même comme la protéine, mais il a l’aspect muqueux du blanc d’œuf coagulé en liqueur étendue, ou tel qu’on l’obtient en le précipitant par l’alcool. Après lavage bien complet, à grande eau, la matière encore humide est traitée par l’acide acétique. Or, au lieu de se dissoudre, comme le ferait la caséine, elle se gonfle comme une gelée. Ne pouvant pas obtenir de solution à froid, je chauffe à l’ébullition et, en jetant bouillant sur le filtre, j’obtiens une liqueur qui est observée. Trouvé, après destruction de la combinaison acétique et dessiccation cà i4o° :

ûÿ^°°,6\, /=2,r = 22“, p = 0^,1 2 6, cendres o£r,oo5, [a]y = Ô2°,31sy.

Malgré l’incertitude qui tient à la petitesse de a j, nous sommes loin du pouvoir rotatoire de la caséine, dans les mêmes circonstances. Par ses propriétés le produit n’est donc ni la caséine, ni la protéine.

II. L’expérience a été répétée avec la même masse de blanc d’œuf et de potasse, mais la masse cohérente a été abandonnée à elle-même, à froid. Au moment où elle était presque complète^ ment liquéfiée, on l’a traitée par l’alcool à 94° cent, pour la dissoudre. La solution filtrée a été additionnée d’éther; il s’y pro-

M. A. BÉCHAMP.

duisit an précipité qui ne s’est déposé qu’au bout de quelques heures. Le dépôt, séparé, a été lavé à l’alcool, à 94° cent.

Examen du dépôt. — Il a été dissous dans l’eau bouillante; la solution refroidie, filtrée, a donné, dessiccation à 120° :

^ = 2°\> /==2> *>=iocc,

p = ôsr, 186, cendres ost,o34,

Si l’on admet que les cendres sont du carbonate de potasse dont le carbone a été fourni par la matière organique, o&l',o34 équivalent à oSr,oi î d’acide carbonique, qui doit être ajouté au compte de la matière albuminoïde ; alors p devient :

p'= 0^,197 et [“}/= 5o°,7t\.

Ce n’est donc pas de la caséine et ce n’est pas non plus l’albumine.

La solution alcaline a été précipitée par l’acide acétique. Le précipité bien lavé est blanc mat, comme la caséine, et non muqueux; de plus, il se dissout aisément dans l’acide acétique, et la solution, après destruction de la combinaison, a donné, dessiccation à i4oQ :

CLj = 2°, 2\, /=^ 2 , V = 5CC, p = oSr, 109, Cendres o&r,ooo3, [a] = 5o°,4^.

La matière a donc les propriétés d’une protéine.

III. L’expérience a été refaite avec la primovalbumine , dont la solution concentrée est traitée par la solution, également concentrée, de potasse. Le mélange pris en masse est aussitôt traité et broyé avec de l’alcool à 85° cent. Il se fait une solution et un résidu insoluble.

Examen du produit insoluble dans l’alcool. — II est traité par l’eau à l’ébullition; il y a un résidu insoluble dans l’eau bouillante. La solution filtrée a donné :

ctj = ■id,.66'\, 1=2, îp io™, p = oer,i44, cendres 0^,012, [cc]j= 5r]°,6'\.

Si l’on suppose que les cendres sont du carbonate de potasse , elles contiennent o&r,oo38 d’acide carbonique, qui fait partie de la matière organique brûlée; p devient :

//= 0^,1 4.78 et [a]j=56°, i\.

Pour achever de prouver qu’il ne s’agit pas là de caséine, la solution alcaline a été précipitée par l’acide acétique. Le précipité , bien lavé à l’eau et à l’alcool, puis desséché : i° ne se dissout pas à froid dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau, il s’y gonfle seulement; 20 il se gonfle sans se dissoudre sensiblement dans l’ammoniaque.

Examen de la solution alcoolique. — Les liqueurs alcooliques sont traitées par l’acide acétique : il se fait un précipité floconneux, dont la quantité est à peu près le tiers du produit insoluble. La matière recueillie, lavée à l’alcool et à l’eau, est traitée-, encore humide, par l’acide acétique; elle se gonfle, mais ne se dissout pas, même à chaud, si ce n’est en opérant comme pour I. La solution était si peu concentrée qu’elle n’a pas pu être observée : le fdtre avait retenu la gelée insoluble.

IV. Une solution concentrée de secondovalbumine a été traitée de la même manière que celle de primovalbumine , par la potasse concentrée. Seulement, la masse presque dure a été abandonnée à elle-même; elle s’est trouvée liquéfiée une ou deux heures après. Ajouté de l’alcool pour dissoudre et à la solution de l’éther. Le Sav. étkang. t. XXVIU. — N? 3. 4 1

322 M. A. BÉCHAMP.

précipité que l'éther occasionne est déposé quelques heures après; il est recueilli et lavé à l’alcool à g4° cent.

Examen du précipité. — Il se dissout dans l’eau bouillante. La solution a été observée. Trouvé :

aj = 5°\,7=2,r = 5cc, p = oSr,2 2, cendres oSr,o45, [a]j = 56°, 8^.

Si l’on ajoute au poids de la matière organique les o£r, o 1 4 d’acide carbonique que représentent les o£r,o4Ô de carbonate de potasse, le poids p devient :

p = o8r, 2 34 et, par suite, [a]j=53°,4'\-

La solution alcaline a été précipitée par l’acide acétique. Le précipité ressemble à la caséine; il est blanc mat et se dissout aisément dans l’acide acétique. Après destruction de la combinaison acétique et dessiccation à i4o°, trouvé :

a7- = 3°,45'\, 1=2, y = 5cc, p= oSr,i8, cendres o8r, 002, [<*]/ =47°, 9%-

J’ai réuni tous les produits formés après la liquéfaction de la masse qui résulte de la première action de la potasse sur l’albumine, et qui ont été précipités par l’acide acétique. Ils ont été dissous dans l’ammoniaque et reprécipités pour les purifier. La matière ainsi purifiée a été observée en solution ammoniacale. Trouvé :

aj = 2°> 7\> /=â’ v = 5cc’ p = oS*', 12 3, cendres o&r,ooo3, [a]7 = 54°,8’\.

Cette substance est certainement la plus semblable à la caséine par sa solubilité dans l’acide acétique et dans l’ammoniaque , autant

que par l’apparence; mais comme elle en diffère par le pouvoir rotatoire, sans parler de sa composition élémentaire!

Remarques et conclusions. — Il résulte de ces expériences qu il y a deux manières d’agir de la potasse ou de la soude sur 1 albumine : la brève action sans liquéfaction et Y action suivie de liquéfaction, à froid ou à chaud.

Dans la première se produit la combinaison de 1 albumine avec la potasse ou avec la soude : c’est Y albuminate de M . Lieberkühn ; l’albumine qu’on en isole n’est plus l’albumine soluble qui a été employée, c’est l’albumine ordinaire coagulée, avec ses propriétés et sa composition, ainsi qu’en témoignent les analyses de Lieberkühn, qui sont d’accord avec celles de MM. Dumas et Cahours.

Dans la seconde il y a certainement transformation ; ce dont témoignent la liquéfaction, le dégagement d’ammoniaque, les propriétés de la matière isolée telle quelle est précipitée par l’acide acétique, ainsi que la substance qui reste en solution après cette précipitation. La matière que l’acide acétique précipite peut être appelée protéine, mais n’est pas de la caséine, ce qui est vérifié par l’analyse élémentaire; la protéine est plus carbonée. Et on voit par les pouvoirs rotatoires qu’il peut exister plusieurs de ces protéines, selon que la chaleur n’est pas intervenue ou est intervenue.

Ces faits et leur comparaison avec ce qui se passe dans Faction des acides infirment absolument la théorie de l’albummose de M. Würtz. Non, aucun des produits qui prennent naissance dans ces réactions n’est ni la caséine, ni la syntonine, ni aucun des autres corps que cette théorie confond arbitrairement.

Nous allons voir que, réciproquement, la caséine, dans les mêmes réactions, ne forme pas d’albumine : elle produit ce qui est conforme à sa nature.

M. A. BÉCHAMP.

II. — SüR LA NON-IDENTITÉ DES PRODUITS DE l’aCTION DES ALCALIS CAUSTIQUES SUR LA CASÉINE AVEC CEUX DE l’aLBUMINE DU BLANC d’cküF.

PROTÉINE DE'. CASÉINE.

De même que l’albumine du blanc d’œuf ne se convertit pas en caséine, la caséine ne se convertit pas en albumine; elle fournit une protéine qui lui est propre.

Des produits de la brève action et de l’action prolongée de la potasse sur la caséine. La caséine ([a[y= 1 1 5°\ en solution ammoniacale) sèche et pulvérisée est traitée par une solution de potasse caustique au huitième, de façon à en faire une masse de la consistance du miel. Du mélange il est fait deux parts.

Première part. Aussitôt que la masse est devenue homogène et filante, elle a été traitée par l’alcool à 90° cent.; tout s’est dissous. Ajouté alors de l’alcool à 9 5° cent, jusqu’au moment où un louche apparut et ensuite de l’éther; une masse molle, qui a durci , s est séparée; elle a été broyée avec de l’alcool à 94° cent., pour la débarrasser des produits adhérents.

a. Produit précipité par l’éther. La matière a été reprise par l’eau à l’ébullition; la plus grande partie se dissout, et il reste une masse d’apparence gélatineuse W. La solution refroidie, filtrée, a donné :

aj=='50’9'\> ^=2, v = 5cc,

p = oSr,i4, cendres o^oSS, [a]7= io5°,3\.

Si l’on admet que les cendres représentent du carbonate de potasse, il faut augmenter p de tout l’acide carbonique de ce carbonate, savoir : de o&r,oi2; p devient alors

// = o«M5a et [a]/r=97"\.

■W .Cette matière se dissout par l’action prolongée de l’eau bouillante, mais la solution se colore en rouge.

La solution qui a donné ce pouvoir rotatoire a été traitée par l’acide acétique; le précipité a l’apparence de la caséine; bien lavé, il se dissout très facilement dans l’ammoniaque très étendue, à la manière de la caséine. Trouvé :

Oj = 3°,5%\, 1=2, v = 5cc, p = oëI,o8h , cendres nulies, fa]y= io4°,i,\-

Ce produit, s’il n’est plus la caséine, n’est certainement pas l’albumine.

b. Produit soluble dans l’alcool éthérê. — La solution a été traitée par l’acide acétique; il se forme un précipité peu abondant. Recueilli et bien lavé à l’alcool, il se dissout aisément dans l’eau faiblement ammoniacale. Trouvé :

rOj=8°,22^\, 1=2, V = 5CC, p = oSr,i 1 1, cendres o&r,oo2, [a]j = 72°,5'\.

Seconde part. — Elle est abandonnée au froid, jusqu’à ce que l’odeur de l’ammoniaque soit perçue; la matière, dissoute dans l’eau, est traitée par l’acide acétique. Le précipité est une masse grisâtre qui est abondamment lavée à l’eau, dissoute dans l’ammoniaque très étendue et reprécipitée par l’acide acétique. Le nouveau précipité est redissous dans l’eau faiblement ammoniacale ; la dissolution ne s’obtient limpide qu’en y ajoutant un peu d’éther et en fdtrant après y avoir battu du papier divisé. Trouvé :

aj==4°,44\, l— 2 , v = 5CC,

p = oSr, i 1 5 , cendres nulies, [a]j = 9 6°, 5^.

Cette matière, sèche, se dissout dans l’acide chlorhydrique fumant et donne, après avoir chauffé, une coloration mauve.

Quant à la matière qui reste dissoute après la précipitation par

226 M. A. BÉCHAMP.

l’acide acétique, elle n’est pas précipitée par l’alcool, mais elle précipite abondamment par le sous-acétate de plomb ammoniacal.

L’action prolongée de la potasse caustique sur la caséine engendre des corps plus ou moins analogues à ceux dont il va être question.

Action de la soude caustique à chaud sur la caséine. — 2 3 grammes de caséine sèche ([a]y= 1 1 2°\ en solution dans le carbonate de soude) sont dissous dans la soude caustique étendue, et la solution chauffée jusqu’au moment où apparaît l’ammoniaque. La liqueur refroidie est traitée par l’acide acétique; il se dégage de l’hydrogène sulfuré. Le précipité n’est pas caséeux, mais il forme une masse molle, étirable en fdaments. On obtient donc un précipité et une liqueur.

Les détails dans lesquels je vais entrer sont indispensables, car ils sont de nature à faire évanouir toutes les hypothèses concernant l’identité de l’albumine et de la caséine.

Examen du précipité visqueux. — Il a été redissous, à froid, dans une solution très étendue de soude , et de nouveau précipité par l’acide acétique. Il a le même aspect qu’avant la reprécipitation ; il est bien lavé à l’eau. Ce produit est très particulier et ne paraît pas être homogène. Il est soluble dans l’alcool à 85° cent., à chaud; par le refroidissement une partie notable se sépare avec l’apparence d’une résine molle, tandis que la liqueur tiède est presque limpide. La masse d’apparence résineuse est lavée avec de l’alcool tiède; il arrive un moment où plus rien ne paraît se dissoudre. Les liqueurs alcooliques tièdes sont mises à refroidir; elles déposent une certaine quantité de produit visqueux. Enfin les liqueurs alcooliques refroidies sont distillées; elles abandonnent un produit peu coloré et mou. On a donc : A, un produit insoluble dans l’alcool tiède; B, un produit soluble dans l’alcool tiède, se déposant à froid; C, un produit resté dissous dans l’alcool froid, Examinons-les.

A. Matière soluble dans l’alcool bouillant, insoluble dans l’alcool tiède. — Par la dessiccation, elle devient grisâtre et friable comme la colophane. Elle se dissout facilement dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau. La solution a dû être filtrée sur un peu de charbon animal pour être obtenue limpide. Trouvé :

a. Pour la combinaison acétique à ioo° :

aj = 3°,8\, 1—2,

p = o&r,i46, cendres 0^,001, [a]j=65°, iT\.

b. Après destruction de la combinaison acétique, dessiccation à i4o° :

. a,— 3°,8\, 1=2, v=5cc, p = oSr, 121, cendres 0^,00 1 , [a]j = 78°, 5\.

B. Matière soluble dans l’alcool tiède, déposée par le refroidissement. — Elle se dessèche en prenant la même apparence que A. En solution acétique, trouvé :

a. Combinaison acétique à 100-1 io° :

aj=8°,94'\, 1=2, v = 5CÉ, p = 0^,298, cendres oSr,oo2, [a]j= 750,\.

b. Après destruction de la combinaison acétique, dessiccation

1=2, v = 5cc,

p = 0^,275, cendres oSr,oo2, [a]j= 8 10^^.

D’autre part, la matière étant desséchée à 110-120° est dissoute dans l’acide acétique, sous volume donné; le poids de la matière, cendres déduites. Trouvé :

aj=7°,o5'\i 1=2, v = 2 30C, p = o&',g55, [a];-= 84°,9'\-

M. A. BÉCHAMP.

Cette substance fixe l’acide acétique comme la caséine. iSr,5o4 de matière séchée à 110-120° produisent 2&r,256 de composé séché dans le vide sur chaux vive. Augmentation : La

distillation en a séparé 0^,75 d’acide acétique (C4H3 O3, HO), soit 33.24 p. 0/0.

C. Matière restée dissoute dans l’alcool froid. — La matière molle a été traitée par l’alcool à 85° cent, à froid, de façon à obtenir une solution saturée; elle a donné :

La partie non dissoute a été observée en solution acétique. Trouvé :

a. Pour la combinaison acétique à 100-1 10° :

p = 0^,27, cendres oSr,oo2, [a]j = 85°,2r\.

b. Après destruction de la combinaison acétique, dessiccation à i4o° :

aj= 9°>2\> ^=2> v=5cc,

p = oSr, 228, cendres osr,oo2, [a]7= iqo0,8"\.

Le produit nest donc pas homogène, il est formé au moins de deux corps doués de pouvoirs rotatoires inégaux. Il en est de même de la totalité A, B, C.

Examen des liqueurs séparées du précipité visqueux. — Elles sont concentrées au bain-marie. Pendant l’évaporation les parois de la capsule se recouvrent d’une matière molle , que l’on sépare lorsque les 3/4 du liquide ont été évaporés. On a : i° un dépôt mou;

2° une nouvelle liqueur.

i° La matière molle est d’abord lavée avec un peu d’eau, puis à 1 alcool, qui ne la dissout pas. Elle est soluble dans l’eau; la solution, passée sur un peu de charbon animal, a donné :

ctj = 3°, 2 6^, 1=2, v = 5cc,

P = oSr, 1 0, cendres milles , [a ]j == 8 1 °, 5"^.

La matière desséchée a l’apparence d’une résine. Pendant la combustion, elle répand l’odeur de corne brûlée.

2° La nouvelle liqueur est précipitée par l’extrait de saturne; le précipité volumineux, recueilli, lavé à l’eau, est décomposé par un courant d’acide carbonique. La solution que l’on sépare par le filtre est traitée avec précaution par l’acide sulfurique , pour enlever le plomb resté. On obtient enfin une solution incolore, qui a donné :

OLj = ,3°,o4\, /= 2 , v = î occ,

p^o&, i65, cendres 0^,02 5, [a]j= 92 °, i\.

Les cendres contenaient du plomb. A l’incinération, odeur de corne brûlée.

La quantité de matière isolée par l’acide carbonique ne paraissait pas en rapport avec la masse du précipité plombique. Après avoir constaté que l’on ne peut pas employer l’hydrogène sulfuré (le sulfure de plomb reste dissous, et les liqueurs deviennent brunes), essayé de décomposer par l’acide sulfurique, sans l’employer en excès. J’ai fini par obtenir une solution qui dévie à gauche. Il s’est trouvé qu’en ajoutant de l’acide chlorhydrique à cette solution, il s’y formait un précipité visqueux. Ce précipité, lavé rapidement avec un peu d’eau, s’est trouvé soluble dans l’eau. La solution, passée sur charbon animal, a donné, dessiccation à 1 1 o° :

. CLj-y. 6°, l6'\, 1= 2,D = 5cc, p= o&r,i65, cendres o£r,oo2, [a]j = 78°,2'\.

Sav. étrang. t. XXVIII. — N» 3.

330 M. A. BÉCHAMP.

Cette matière répand aussi l’odeur de corne brûlée pendant l’incinération; traitée par le réactif de Millon à chaud, elle se colore en rouge.

Il est bien évident que, dans tous ces détails, rien ne rappelle l’albumine ni les produits quelle fournit, dans les mêmes conditions. Bref, l’action de la potasse sur la caséine diffère beaucoup de celle qu’elle exerce sur l’albumine dans les mêmes circonstances.

Ces faits établissent d’ailleurs que les produits de l’action de la potasse sur la caséine sont plus nombreux que ne le suppose la théorie de la protéine. Je ne prétends pas que les corps dont j’ai indiqué les pouvoirs rotatoires sont autant de substances particulières. Mais les faits prouvent qu’il doit en exister plusieurs, et que la caséine est, même sous ce rapport, une substance absolument distincte des albumines du blanc d’œuf et, comme nous le verrons, de plusieurs autres matières albuminoïdes.

Cette étude sera reprise et éclaircie par l’analyse élémentaire; elle montre, par le détail, quelle voie il faut suivre pour faire avec fruit un travail sur les albuminoïdes. Peut-être, et certaines propriétés portent à le croire , que plusieurs des matières que l’on obtient sous l’influence des alcalis ou des acides sont entre elles comme les fécules solubles et les dextrines, c’est-à-dire des corps de même composition avec des propriétés et des pouvoirs rotatoires différents.

Recherchons maintenant comment d’autres matières albuminoïdes se comportent dans les mêmes circonstances.

III. — Protéine des granulations moléculaires du jaune d’oeuf épuisées

PAR LE CARBONATE DE SOUDE (lÉCIHISTOONINE).

La lécihistoonine a été traitée par une solution de potasse caustique au dixième. A froid, la matière se gonfle sans se dissoudre et forme une gelée épaisse. Chauffé à 70°, le mélange se liquéfie et dégage de l’ammoniaque. Arrêté aussitôt faction en refroidissant. La solution, traitée par l’acide acétique, donne un précipité

qui a toute l’apparence de la protéine de blanc d’œuf. Je n’ai pas pu constater de dégagement d’hydrogène sulfuré pendant la précipitation. Le précipité, abondamment lavé à l’eau et à l’alcool, a été mis à sécher sur l’acide sulfurique. La matière, séchée à l’air, a l’aspect corné et perd 2 3.3 p. o/o à i/io°. Pris le pouvoir rotatoire en solution acétique sous volume connu, la matière supposée desséchée à i4o°, cendres déduites :

aj= 2°,6"\, 2, v= 52cc, p= 1^,3647 > [«Jy= 49°,5^y.

Dosé l’acide acétique de la combinaison séchée dans le vide sur chaux vive, à poids constant :

Combinaison acétique . . . i£r,3o

Acide acétique (distillé) . o ,399

Acide (C4 H3 O3, HO) p. 0/0 . 3o,7

Une autre détermination a donné , après destruction de la combinaison acétique et dessiccation à 1 4o° :

a,j=3°\, 1=2, v=5cc, p = oSr,i46, cendres o&r,oo4, [a]j = 5 10,3^.

Cette protéine se dissout très difficilement dans le carbonate de soude , même lorsqu’on tente la dissolution sur de la matière encore humide.

Ce résultat doit être rapproché de ce qui a été rapporté des propriétés de la lécihistoonine dans l’histoire des granulations moléculaires du jaune d’œuf. Il faut remarquer avec soin que la protéine de lécihistoonine n’a rien de commun avec celle de la caséine. On se rappelle que Lehmann considérait la vitelline insoluble comme étant « alkali freies-caseïn » : on voit bien, une fois de plus, que c’était une opinion préconçue.