I. PAR EXTRACTION

Méthode de Kellner. (10)

Cette méthode s’adresse à la coloration propre du produit, qui après avoir traversé l'organisme apparaît dans les urines. Le produit est extrait de l’urine par un solvant approprié en éliminant autant que possible l’urochrome, et dosé colorimétriquement. Kellner a choisi un mélange d’acétone et de pyridine, et procède par relargage à l’aide du sulfate d'ammonium.

Protocolle:

À une partie d'urine, alcalinisée par la soude, on ajoute 5 parties de pyridine et du sulfate d’ammonium à saturation. On agite et laisse reposer. Le colorant passe dans la pyridine mais en même temps il y passe un peu de l’urochrome. Pour éliminer cet urochrome, Kellner ajoute 5 parties d’acétone, l’urochrome précipite et le colorant azoiïque seul reste dans le mélange pyridineacétone. On filtre et procède à la colorimétrie.