URINE. CORPS APPARTENANT A LA SÉRIE AROMATIQUE. A. HIPPURIQUE

connu que depuis les travaux de Liebig, 1840. 11 existe en abondance dans l'urine des herbivores (cheval, bœuf) et en moindre quantité dans l'urine humaine. Le poids moyen de l'acide hippurique éliminé en vingtquatre heures par un homme adulte varie suivant ^

des influences encore mal connues de 1 gramme à plus de 2 grammes (Lûcke et Duchek).

C'est un corps cristallin qui se présente sous la forme de prismes quadrangulaires terminés aux deux extrémités par deux ou quatre facettes de troncature (fig. 47). 11 se dissout dans 600 parties d'eau froide et plus facilement dans l'eau bouillante en donnant une solution fortement acide. 11 est également soluble dans l'alcool et l'éther acétique, moins dans l'éther sulfurique, qui cependant l'enlève à sa solution aqueuse. L'éther de pétrole et la benzine ne le dissolvent pas, circonstance qui permet de le séparer facilement de l'acide benzoïque.

Parmi ses réactions, les suivantes ont de l'importance au point de vue physiologique.

1" Chauffé avec les acides minéraux étendus ou les alcalis caustiques, il absorbe une molécule d'eau et se dédouble en glycocolle et acide benzoïque :

CU'^-Azll-lCni^O) ( C^H^ ( ClI^-AzIP

CO-OH ( GO-OIf ( CO-OH

Ac. benzoïque. Glycocolle.

FiG. 47.

Acide hippurique

Eau.

Ac. hippurique.

Il éprouve la même décomposition sous l'influence du ferment de l'urée {Micrococcus ureœ), mais de plus l'action du microbe détruit le glycocolle mis en liberté. Cette réaction importante explique la nécessité d'opérer toutes les recherches relatives à l'acide hippurique sur de l'urine fraîche, sous peine de ne plus trouver que de l'acide benzoïque.

2" L'acide hippurique forme, avec les alcalis et les terres, des sels solubles qui sont précipités par le nitrate d'argent et le perchlorure de fer. L'hippurate de fer est une poudre rouge isabelle, très analogue au benzoate de fer et soluble à chaud dans l'alcool. Salkowsky a proposé un mode de dosage de l'acide hippurique dans l'urine basé sur l'insolubilité de ce sel. L'hippurate de cobalt est absolument insoluble dans l'alcool, ce qui, d'après Lœbisch, pourrait également servir pour l'isolement de l'acide et son dosage.

5*" Chauffé en tube fermé, l'acide hippurique fond d'abord en un liquide huileux qui se prend par refroidissement en une masse cristalline Si l'on continue à chauffer, la masse devient rouge et un sublimé d'acide benzoïque apparaît sur les parois du tube, en même temps qu'il se développe une odeur d'amandes amères par formation de benzonitrile et d'acide cyanhydrique.

4^" Chauiîë avec de l'acide nitrique, l'acide hippurique, quand on évapore l'excès d'acide et décompose le résidu par la chaleur, développe

392 URINE. — CORPS appartenait a la série aromatique, a. hippurique.

également une odeur d'amandes amères par formation de nitrobenzine. Cette réaction, dite de Lûcke, est extrêmement sensible, mais non absolument probante, car elle réussit avec beaucoup d'autres acides aromatiques, notamment l'acide benzoïque et l'acide cinnamique.

Nous avons vu plus haut que l'acide hippurique peut être envisagé comme un acide copule capable de se dédoubler en glycocolle et acide benzoïque avec absorption d'eau. La réaction inverse est également possible et les chimistes ont obtenu l'acide hippurique par combinaison du chlorure de benzoïle et du glycocollnte d'argent. C'est même probablement par un processus analogue qu'il se produit dans l'organisme. On trouve, en effet, dans l'économie l'acide benzoïque et le glycocolle.

L'acide benzoïque dérive de sources multiples. Chez l'homme et surtout chez les herbivores les aliments (fourrages, etc.) contiennent, en effet, une certaine quantité d'acide benzoïque ou de corps susceptibles, comme l'acide quinique, de passer dans l'organisme à l'état d'acide benzoïque. D'un autre côté, dans une multitude de réactions, notamment sous l'influence des oxydants (bichromate d'ammoniaque et acide sulfurique), des fermentations pancréatique ou putride, il se développe de l'acide benzoïque ou des corps tels que l'acide phényl-propionique, susceptibles de le devenir dans l'économie (Saikowsky). Il est donc naturel d'admettre qu'une partie de l'acide benzoïque se produit au sein des organes par oxydation ou dans le tube digestif par putréfaction. La réalité de cette conception est prouvée par ce fait que chez les animaux inaniliés, malgré l'absence d'apport, l'organisme continue à éliminer de l'acide hippurique. Quant au glycocolle, il existe dans la bile à l'état de glycocholate de soude, et les recherches de Nencki ont montré que sous l'influence de la trypsinc les substances gélatinigènes en donnent une certaine quantité.

La présence dans le corps des deux constituants de l'acide hippurique permet de supposer, mais non d'aftirmer, qu'il résulte de leur union. L'expérimentation, qui peut seule en fournir la preuve, a répondu positivement. Si, en effet, on administre à un homme ou à un animal une certaine quantité d'acide benzoïque, il se combine dans l'organisme avec du glycocolle et apparaît dans l'urine sous forme d'acide hippurique. Cette copulation d ailleurs n'est pas spéciale à l'acide benzoïque; ses dérivés nitrés et chlorés, l'acide cinnamique, l'acide salicylique, d'autres encore, éprouvent dans le corps une modification identique.

La combinaison reconnue réelle, il restait à déterminer en quel point elle s'elfectue. Partant do ce fait que le glycocolle existe dans la bile, Kïihne et Hallwacks ont cherché à prouver qu'elle a lieu dans le foie. Ils ont montré, par expérience, que chez les animaux à sang chaud, en liant les vaisseaux du foie on empêche la Iransi'ormation du benzoate en hippurate de soude. L'exactitude de cette assertion a été reconnu^) par Bunge et Schmiedeberg, mais ils attribuent le phénomène à Tébranlement de l'économie par le traumatisme expérimental.

D'autre part, chez les grenouilles qui survivent à l'ablation du foie, l'acide hippurique continue à se former après cette opération (Bunge et

URINE. *CORPS APPARTENA^iT A LA SÉRIE AROMATIQUE. A. HIPPURIQUE. 595

Schmiedeberg). Donc, si le foie fabrique de l'acide hippurique, il n'est pas seul chargé de ce rôle, et il est même douteux qu'il en produise, car, d'après W. Kochs, du sang chargé d'acide benzoïque et de glycocoUe ne renferme pas d'acide hippurique après macération à 40*^ avec du tissu hépatique. D'autre part, le rein paraît avoir la propriété d'effectuer cette combinaison. La preuve semble avoir été faite par Bunge et Schraiedeberg à l'aide des expériences suivantes : Après une double néphrotomie, l'organisme des chiens ne fabrique plus d'acide hippurique; il continue, au contraire, à en produire et à en accumuler après la ligature des uretères. La combinaison s'effectue également dans le rein séparé du corps de l'animal quand on y fait circuler un courant de sang artérialisé, chargé de glycocolle et d'acide benzoïque en proportions convenables. Il s'en produit enfin par macération avec le tissu du rein.

Il s'agit ici d'un processus lié à la vitalité des cellules rénales, car, si le rein est extrait depuis trop longtemps ou si le protoplasma de ses cellules est altéré par la quinine, l'opération échoue (A. Hofmann). D'un autre côté, la présence des globules rouges du sang est indispensable, car un courant de sérum sanguin ne détermine pas la combniaison. Elle n'a pas lieu non plus quand les globules sont paialysés par l'oxyde de carbone, ïl serait donc prouvé, si l'avenir confirme le résultat des précédentes recherches, que l'acide hippurique peut prendre naissance dans le rein, mais il n'en résulterait nullement qu'il ne peut se former ailleurs. Le contraire serait plus probable, s'il en faut croire l'expérience de Salomon qui, sur des lapins préalablement néphrotomisés, a rencontré dans tout l'organisme (foie, sang, muscles, etc.) des quantités notables d'acide hippurique après ingestion d'acide benzoïque. Concluons que la plus grande réserve est nécessaire avant de rien déduire pour l'organisme humain des expériences précédentes.

Ce que l'on peut affirmer, c'est que chez l'homme sain, et dans la plupart des cas pathologiques, la quantité d'acide hippurique éliminé croit toujours après l'ingestion d'acide benzoïque ou de corps qui peuvent en fournir, que ceux-ci soient des aliments comme les prunes, les airelles rouges, etc., ou des corps chimiques proprement dits, alcool benzylique, essence d'amandes amères, etc. La quantité d'acide benzoïque ainsi susceptible de transformation est-elle illimitée? Évidemment non, car dans certains cas l'acide benzoïqne se retrouve en nature dans l'urine fraîche. Mais quel est le chiffre maximum de la quantité transformable; subit-il de grandes variations dans l'état pathologique ; ces variations supposées réelles, pourrait-on en tirer parti pour le diagnostic? Autant de questions auxquelles, dans l'état actuel delà science, il est impossible de répondre. D'après Jaarsvell et Stokwis, la combinaison du glycocolle et de l'acide benzoïque ne se ferait plus chez les malades atteints de néphrite parenchymateuse aiguë ou chronique et s'effectuerait encore, ou du moins serait peu influencée par les autres affections du rein telles que néphrite amyloïde, interstitielle, etc. D'après Weyl et Aurep, elle serait également compromise ou suspendue par l'état fébrile chez le chien ou

394 URINE. — CORPS appartenant a la sérïe aromatiqde. a.* hippurique.

le lapin. Nous croyons que ces assertions auraient grand besoin de confirmation. Il en est d'ailleurs de même de tout ce qui a été écrit sur les variations pathologiques de l'acide hippurique : aussi ne nous étendronsnous pas plus longuement sur ce sujet. Nous dirons seulement que les assertions relatives à l'excès de cette substance dans le diabète (W. Wicke), dans l'état fébrile (Lehmann), et à sa diminution ou disparition dans les affections hépatiques avec ictère (Kùhne et Halwachs), sont absolument contestées. On sait simplement que dans certaines conditions, d'ailleurs mal définies, la quantité d'acide hippurique peut subir une forte élévation. Ainsi Schultzen a analysé une urine qui, pour 6°''6 d'urée et O^'^OV d'acide urique, ne contenait pas moins de l^'^lô d'acide hippurique, et Bouchardat a fait connaître (Compt. rend. acad. Sciences, 1840) que parfois, sous l'intluence du régime lacté et dans quelques états névropathiques, l'acide hippurique et ses sels augmentent considérablement. Il a, dans ces conditions, obtenu jusqu'à 2si'25 d'acide hippurique par Utre d'urine.

Pour retirer l'acide hippurique de l'urine des herbivores, il suffit de précipiter par un lait de chaux la majeure partie du pigment, de filtrer, d'évaporer au cinquième du volume primitif et de précipiter par l'acide chlorliydrique. Il se sépare des cristaux d'acide hippurique que l'on purifie par redissolution et décoloration à l'aide du charbon animal. Si, malgré ce traitement, les cristaux restent colorés, on les traite en solution alcaline par un agent oxydant (permanganate, chlore), qui détruit les impuretés sans altérer l'acide. Si l'acide hippurique était mélangé d'acide benzoïque, on enlèverait ce dernier par l'éther de pétrole ou la benzine.

Dans l'urine humaine la préparation est plus compliquée. Parmi tous les procédés de recherche et de dosage qui lui sont applicables celui de Cazeneuve (de Lyon) par sa simplicité nous semble mériter la préférence.

250 centimètres cubes d'urine fraîche sont évaporés au bain-marie au dixième et additionnés ensuite de 5 centimètres cubes d'acide chlorhydrique et de 50 grammes de plâtre calciné. La masse desséchée et pulvérisée est traitée dans un appareil à déplacement par de l'éther exempt d'alcool et d'eau. L'extrait éthéré est distillé et le résidu repris par l'eau bouillante, puis filtré et évaporé à la chaleur du bain-marie, abandonne l'acide hippurique cristallisé que l'on sèche et que l'on pèse. L'opération demande environ quatre heures. Si l'éther est bien exempt d'alcool et d'eau, l'extrait éthéré et par suite l'acide hippurique sont très-peu colorés. L'urine ictérique se prête très-bien à l'opération. Quand, malgré ces précautions, l'acide est coloré, Cazeneuve conseille de le purifier en faisant passer dans sa solution quelques bulles de chlore qui n'attaque guère que les impuretés. Prenant en considération que ces impuretés proviennent en grande partie des éthers sulfo-conjugués de l'urine et que ceux-ci ne sont pas décomposés par l'acide acétique à la température d'ébullition de l'élher, Lœbisch propose de remplacer dans l'opération