PRODUITS NORMAUX CORPS. IINDICAN

tionné de matière oxydante (eau de chlore, perchlorure de fer, etc.), la totalité de l'indoxyle passe à l'état d'indigo bleu. ChauiTé dans un tube, l'indoxylsulfate de potasse donne des vapeurs pourpres et un sublimé d'indigo. Ainsi que nous l'avons déjà dit, le dédoublement de l'indoxylsulfate de potasse s'opère aussi par l'influence du ferment de l'urée.

Pour reconnaître dans l'urine la présence de l'indican, l'opération est beaucoup plus simple. Il suffit de la mélanger avec son volume d'acide chlorhydrique concentré. On attend quelques minutes et l'urine se colore d'une teinte bleue variable suivant la quantité d'indican qu'elle renferme. On peut rendre la réaction plus rapide en versant quelques gouttes d'acide nitrique ou d'hypochlorite de chaux (solution au vingtième), mais il faut se garder d'en trop ajouter pour éviter la destruction de l'indigo. Souvent aussi il est avantageux pour la netteté de l'opération de traiter le mélange d'urine et d'acide par l'éther ou le chloroforme qui lui enlèvent la matière bleue. L'éther s'émulsioime moins avec l'urine, mais il dissout plus d'impuretés. L'extrait éthéré est parfois plus violet que bleu, l'extrait chloroformique est d'un bleu plus pur.

Pour la détermination quantitative, deux procédés de dosage ont été indiqués par Jaffé et par Salkowsky. Dans celui de Jaffé, on précipite de l'urine l'indoxylsulfate de potasse à l'état de persel de fer, le sel de fer est transformé par l'alcali volatil en sel d'ammoniaque, et c'est de ce dernier que l'on extrait l'indigo par l'acide chlorhydrique et le chlorure de chaux. Le précipité est lavé, séché et pesé. Il faut opérer sur un litre à un litre et demi d'urine.

La méthode précédente est longue et souvent inexacte, car, au dire de Jaffé lui-même, le filtre ne retient pas toujours la totalité de l'indigo; celle de Salkowsky, moins exacte peut-être d'après Lôbisch, plus sûre au contraire d'après Neubauer et, en tout cas, plus rapide d'exécution, est basée sur une évaluation colorimétrique. Après avoir déterminé par un essai préalable la quantité de chlorure de chaux (solution au vingtième) nécessaire à l'oxydation, on prend 10 centimètres cubes d'urine que l'on mélange avec 10 centimètres cubes d'acide chlorhydrique et la quantité convenable d'hypochlorite calcaire. Quand le maximum de coloration s'est produit, on ajoute à la liqueur une quantité de soude caustique presque suffisante pour la neutraliser, puis un excès de carbonate de soude, et les phosphates en se précipitant entraînent l'indigo. On filtre sur un filtre à plis, on lave jusqu'à disparition de la réaction alcaline et l'on épuise le filtre séché et coupé en lanières par du chloroforme bouillant. Pour une urine modérément chargée, 50 centimètres cubes de chloroforme suffisent. La solution chloroformique est comparée sous épaisseur égale avec une solution type contenant 7""^''^ 4 d'indigo pour 200 centimètres cubes. En général, la solution tirée de l'urine est trop faible et il faut l'additionner pour l'égalité des teintes d'une certaine quantité d'une solution plus forte à titre connu. Un calcul de proportion donne le poids cherché d'indigo.

A l'aide de sa méthode, Jaffé a trouvé une proportion moyenne de

URINE. — PRODUITS NORMAUX. SKATOL

gmiiiig g d'indigo dans 1000 grammes d'urine normale de l'homme (max. 19,5, min. 4,5). Celle du cheval est environ 25 fois plus chargée, 152 mill. pour 1000 (Jafie). L'urine du chien est également assez riche. L'urine des nouveau-nés ne contient pas d'indigo et on ne trouve dans le méconium ni indol ni phénol (Senator).

Les conditions pathologiques qui donnent naissance à l'excès d'indigo sont à peu près les mêmes que celles qui produisent le phénol. Une urine riche en indican est généralement riche en phénol et réciproquement; toutefois la proposition n'est pas absolument vraie, car avec beaucoup de phénol il n'y a pas toujours beaucoup d'indican (Neubauer). La dissociation des deux substances s'explique par la remarque déjà citée d'Odermatt que dans la putréfaction de l'allDumine l'indol appartient aux premières phases et le phénol aux dernières, et par celle de Jaffé, qui considère l'indol comme un produit de la fermentation pancréatique et le phénol de celle qui a lieu dans le gros intestin. On a même appliqué ces données au diagnostic différentiel en disant que dans l'obstruction l'excès d'indigo indiquait une lésion de l'intestin grêle, son absence, un obstacle au gros intestin. Toutefois ces assertions de Jaffé, bien que justifiées parles considérations théoriques précédentes, par des expériences de ligatures faites à différentes hauteurs sur l'intestin des chiens, ainsi que par quelques observations pathologiques relatives à l'étranglement de l'intestin grêle et à quelques cas de coprostase, sont loin d'être prouvées. Ce qui ressort de plus net de l'enseignement clinique, c'est l'exagération de l'indigose urinaire dans le cas où les fermentations intestinales sont accrues, catarrhe gastro-intestinal, diarrhée, etc. C'est dans les diarrhées cholériformes (choléra nostras, choléra asiatique surtout) que la production de l'indîcan paraît atteindre son maximum ; on voit alors quelquefois l'urine prendre par l'addition d'acide une coloration bleue intense (Gubler).

Toutefois la fermentation gastro-intestinale et celle qui peut se produire dans un foyer putride quelconque ne doivent pas toujours être invoquées. Kletzunsky a constaté un excès d'indigo dans certaines maladies des reins et de la moelle épinière; Senator l'a observé dans la cirrhose rénale, la chlorose, la maladie d'Addison et, en général, les maladies chroniques consomptives ; Hennige, dans quelques intoxications chroniques (arsenic, plomb), dans la trichinose, la péritonite, le carcinome du foie, dans l'atrophie musculaire progressive ; dans l'anémie pernicieuse. En supposant que l'avenir confirme l'exactitude de ces assertions, on ne voit pas à 'pviovi d'explication commune pour tous ces f^its disparates.

Ajoutons encore que la quantité d'indican paraît augmenter après l'usage de l'essence de térébenthine, de la noix vomique et de l'essence d'amandes amères; qu'elle serait normalement très-élevée d'après Lawson dans l'urine des sujets habitant les contrées intertropicales, et qu'elle diminuerait au contraire par l'inanition et le régime végétal (Neubauer).

Skatol. — A l'étude de l'indican se rattache celle du skatol. Ce corps C^H^Azest un homologue supérieur de l'indol. Comme lui, il se présente sous forme d'écaillés blanches micacées, à odeur fécale, prend naissance

URINE

PRODUITS iXORMAUX. MATIÈRES COLOR. DE l'u.

dans la putréfaction de l'albumine et s'élimine en partie par l'urine sous forme d'éther sulfurique acide (skatoxyîsulfate) combiné à la potasse.

Le skatol se distingue de l'indol par son point de fusion plus élevé, 93^ à 95% et la coloration blanche du précipité qu'il donne en solution aqueuse par l'acide nitrique fumant. On ignore pourquoi dans la putréfaction de l'albumine il se produit tantôt de l'indol et tantôt du skatol. On sait seulement que les fèces de l'homme ne contiennent quelquefois que du skatol. Il est arrivé à Brieger de ne pouvoir trouver d'indol dans cinquante kilogrammes de matières fécales fraîches. Lorsque l'on traite l'urine par l'acide chlorhydrique et le chlorure de chaux, on trouve souvent que le mélange prend une teinte violette et non bleue. Cette coloration violette que Téther et le chloroforme n'entraînent pas serait due à l'existence du skatol (Brieger) .

Corps non sériés. — Matières colorantes de f urine. — Malgré les nombreux travaux dont elles ont été l'objet, leur étude est encore fort peu avancée. On a admis pendant quelque temps, d'après Thudichum, que l'urine normale ne renfermait qu'une matière colorante jaune, l'urochrome, et que les autres pigments, résine (Prout), oxyde d'omychmyle (Scharling), urrhodine (Heller), urohsematine (Harley), uriane et urianine (Schunck), n'en étaient que des dérivés produits artificiellement. On sait aujourd'hui qu'il faut tenir pour erronée cette assertion, et que l'urochrome lui-même n'est pas un principe pur et défini. Les recherches spectroscopiques de Vierordt ont montré qu'il y a dans l'urine plusieurs principes colorants. Leur nombre n'est pas connu. Un seul a été l'objet de recherches sérieuses, c estV urobiline ou hydrobilirubine de Jaffé. ïlforme le pigment principal de l'urine d'où on peut l'extraire par différents procédés. Le plus simple est celui de Méhu. L'urine acidulée par l'acide sulfurique (1 à 2 grammes d'acide par litre) est saturée de sulfate d'ammoniaque. 11 s'en sépare alors des flocons bruns qu'on lave sur un filtre avec de l'eau acidulée et saturée de sulfate d'ammoniaque. Le résidu pressé est repris à chaud par de l'alcool absolu additionné de quelques gouttes d'ammoniaque, et l'évaporation de celui-ci donne l'urobiline. Antérieurement Jafle avait indiqué dans le même but la méthode suivante : De l'urine fortement colorée (urine fébrile) est alcalinisée par l'ammoniaque, filtrée et précipitée par le chlorure de zinc. Le précipité volumineux rouge ou rouge brun qui se forme est lavé à l'eau froide, puis chaude, jusqu'à disparition de la réaction du chlore, bouilli avec de l'alcool et séché. On le dissout après l'avoir pulvérisé dans l'ammoniaque d'où on le reprécipite par l'acétate neutre de plomb. Le précipité plombique lavé à l'eau est repris par l'alcool additionné d'acide sulfurique. On extrait l'urobiline de la solution alcoolique en ajoutant à celle-ci la moitié de son volume de chloroforme et un grand excès d'eau. De cette manière, l'urobiline passe dans le chloroforme et la solution cliloroformique lavée deux fois à l'eau abandonne le pigment par évaporation spontanée.

Ainsi obtenue, l'urobiline constitue une poudre amorphe rouge, d'apparence résineuse, presque insoluble dans l'eau, soluble dans l'alcool,

PRODUITS NORMAUX. MATIÈRES COLOR. DE l'u.

l'éther et le chloroforme. Les solutions ont une teinte jaune rouge, rose rouge quand elles sont très-étendues, et précipitent par les sels des métaux lourds. L'urobiline se dissout également dans les solutions aqueuses des sels alcalins, l'alcool acide et les alcalis caustiques. Les solutions alcooliques acides ont une teinte rouge variable avec la concentration. Elles donnent au spectroscope une bande d'absorption entre les raies è et F de Frauenhofer. Dans les liqueurs alcalines, la teinte est moins rou^e, et varie du brun au jaune ambré avec reflets verdâtres. La bande d'absorption plus foncée à contours plus nets est plus voisine de la raie b que celle des solutions acides. Elle est plus accusée avec les alcalis fixes qu'avec l'ammoniaque. Les solutions d'urobiline ne donnent pas la réaction de Gmelin ; neutres ou acides, elles ont une ttuorescence verte. Dans une liqueur ammoniacale additionnée de chlorure de zinc, la fluorescence est au maximum ; elle se produit alors, même avec des solutions tellement étendues qu'elles semblent incolores. Dans ces liqueurs zinco-ammoniacales la bande d'absorption est également très-prononcée.

L'urobiline existe dans l'urine normale, Jaffé l'a rencontrée quarantecinq fois sans exception, et cependant sa présence n'est peut-être pas constante, du moins au moment de l'émission. C'est dans les urines foncées des fébricitants qu'elle existe en ' plus grande abondance. S'il en faut croire les recherches de Gerhardt, c'est à elle que les urines de l'ictère hémaphéique doivent leur coloration, et chez les ictériques, avant et après la période où l'urine donne la réaction de Gmelin, elle présenterait souvent à un très-haut degré celle de l'urobiline. C'est également à la présence de l'urobihne dans le sang et la lymphe que seraient dus l'ictère hématique traumatique (Poncet) et l'ictère hématique des nouveau-nés (Gerhardt).

Pour constater la présence de l'urobiHne dans l'urine, on se basera sur les réactions suivantes :

1° L'urine foncée et rouge s'éclaircit et passe au jaune clair par l'addition d'ammoniaque en excès; si l'on ajoute un peu de chlorure de zinc, elle offre après redissolution du précipité qui se produit d'abord une fluorescence verte manifeste.

2° La réaction la plus sûre est la recherche de la bande d'absorption caractéristique.

Si l'urine est ictérique ou contient de l'hémoglobine, on précipitera les pigments biliaire et sanguin par un lait de chaux et l'excès de chaux par l'acide carbonique avant de rechercher Turobibne (Salkowsky).

Quand la constatation faite directement dans l'urine laisse quelque doute, on essaie de la manière suivante, indiquée par Salkowsky. On agite 50 à 100 cent, cubes d'urine avec un égal volume d'éther exempt d'alcool et d'acide; on évapore l'extrait éthéré et on reprend le résidu par quelques centimètres cubes d'alcool absolu. La solution alcoolique doit montrer la bande et la fluorescence spéciales. En cas d'insuccès, on opère sur une plus grande quantité d'urine (200 c. cub.) que l'on précipite par l'acétate basique de plomb. Le précipité plombique est mis en

URINE. PRODUITS NORMAUX. MATIÈRES COLOR. DE l'u.

macération pendant vingt-quatre heures dans de l'alcool additionné d'acide oxalique ou sulfurique. Dans le liquide alcoolique, on cherche ensuite l'urobiline par l'ammoniaque et le chlorure de zinc. Au besoin on purifierait préalablement l'urobiline en la faisant passer dans le chloroforme comme il a été dit plus haut.

L'urobiline n'ayant pas été obtenue à l'état cristallisé, sa pureté n'est pas certaine et sa composition centésimale, comme sa formule, un peu indécise. Elle semble pouvoir dériver de la matière colorante du sang. HoppeSeyler a obtenu, en faisant agir sur l'hématine en solution alcoolique de l'étain et de l'acide chlorhydrique, une substance qui se transformait par oxydation spontanée en un corps identique à l'urobiline. Cette réaction est à rapprocher de l'expérience physiologique, qui montre après une injection intra-veineuse d'hémoglobine l'urine chargée de pigment. L'urobiline peut également provenir, comme l'a montré Maly, de la bilirubine traitée par l'amalgame de sodium d'après la réaction suivante :

Bilirubine. Hydrogène. Urobiline.

C'est probablement de cette manière qu'elle prend naissance dans l'économie et surtout chez les ictériques. Les actions réductrices sont communes dans le tube digestif; les fermentations butyrique et putride qui s'y développent dégagent de l'hydrogène qui, à l'état naissant, peut agir sur la bile versée dans l'intestin. La réalité de cette action est prouvée par la présence de l'urobiline en grande quantité dans les fèces. La stercobiline de Masius et Van Lair paraît en effet identique avec l'urobiline (Jaffe). C'est donc la partie résorbée de ce pigment qui se retrouve dans l'urine. Maly a du reste vérifié que l'urobiline existe dans le sérum sanguin et que, injectée sous la peau, elle passe abondamment dans l'urine. Malgré le progrès important réalisé par ces recherches, la question présente encore bien des obscurités et tout ne se réduit peut-être pas à une simple élimination. Il n'est nullement prouvé que l'urobiline provienne toujours et exclusivement de la bile versée dans l'intestin. La clinique [Ictère hémaphéique de Gubler) montre que l'urobiline peut dériver d'une déglobulisation excessive, et enfin dans l'urine elle-même l'urobiline n'est pas toujours sous la même forme.

Souvent, en effet, l'urine, au moment de l'émission, n'en contient pas. Or cette même urine reste telle dans un flacon bien bouché, mais abandonnée à l'air elle se fonce peu à peu de la surface vers la profondeur et donne alors les réactions caractéristiques : il semble donc que dans ces Cas l'urobiline ne préexiste pas, mais dérive d'un chromogène encore inconnu. Ce chromogène est précipitable de l'urine par les sels métallique (Disque) et en particulier par [l'acétate de plomb (HoppeSeyler).

L'alcool additionné d'acide sulfurique décompose le précipité plombique et dissout le chromogène qui par oxydation se transforme en urobiline. Au point de vue pathologique, ce que l'on peut dire de plus certain, c'est que la quantité d'urobiline est augmentée dans toutes les urines fortes

URINE

PRODUITS NORMAUX. CORPS SULFURÉS DE l'u.

Mi

(fièvre, affections chroniques du foie, cirrhose, etc.); il en est de même, comme nous l'avons déjà dit, dans le cours de certains ictères biliaires et dans l'ictère biliphéique. Nous aurons ultérieurement à revenir sur ce point (Voy. partie pathologique. Pigment biliaire).

L'estimation quantitative de la quantité d'urobiline est fort difficile. Si l'urobiline était le seul pigment urinaire, on pourrait, de la connaissance de son coeflicient d'extinction pour une région déterminée du spectre, déduire sa proportion dans l'urine par la méthode spectrométrique de Vierordt {Voij. l'exposé de cette méthode à l'article Sang, t. XXXÏI, p. 5^^1). Il en serait de même, si elle était mélangée à une autre matière bien définie, hémoglobine ou bilirubine. Vierordt a dressé la table des coefficients d'extinction dans les diverses régions du spectre pour l'urine normale et les solutions d'urobiline, de bilirubine, d'indigo et d'hémoglobine. Mais, en raison de la complexité des pigments physiologiques et de leur variabilité chez un même individu à l'état sain, les coefficients d'extinction de l'urine normale n'ont rien d'absolu et l'incertitude des résultats est considérable.

Corps sulfurés de Vurine. — Outre l'acide sulfurique qu'elle renferme, comme nous le verrons plus tard, à l'état de sulfates ou de sels sulfoconjugués, l'urine normale de l'homme et des animaux contient encore des corps sulfurés dont la nature est imparfaitement connue. Le procédé suivi pour les mettre en évidence consiste à séparer par l'ébuUition à chaud avec de l'acide chlorhydrique et du chlorure de baryum l'acide sulfurique préformé ou sulfoconjugué.

L'urine débarrassée par liltration du sulfate de baryte est additionnée de nitrate de potasse, évaporée et calcinée. En reprenant par l'eau, on trouve un résidu de sulfate de baryte formé aux dépens des corps sulfurés de l'urine. Les générateurs de ce sulfate peuvent être des sulfocyanures, des hyposultites (urine de chien, les hyposulhtes manquent dans l'urine humaine), de la cystine, des dérivés biliaires (taurine, acide iséthionique), peut-être enfin d'autres corps inconnus.

Salkowsky a proposé de désigner le soufre de cette provenance sous le nom de soufre neutre. Lépine, Flavard et Guérin, qui ont récemment étudié cette question du soufre neutre, ont trouvé qu'à l'état normal il forme de 16 à 17 7o du soufre total contenu dans l'urine. Ils ont montré de plus que ce soufre neutre peut exister sous plusieurs états. Une partie résiste assez énergiquement à l'oxydation par le chlore ou le brome et ne s'oxyde bien que par fusion avec du salpêtre, de telle sorte que l'on pourrait distinguer dans l'urine trois espèces de soufre :

1"* Du soufre à l'état de sulfate ou de sel alcalin d'un éther sulfurique acide ;

2*^ Du soufre facilement oxydable, pai' l'eau de brome, ou le chlorate de potasse et l'acide chlorhydrique;

S"" Du soufre difficilement oxydable. Ce dernier serait principalement de provenance biliaire (la taurine et ses dérivés résistent énergiquement au chlorate de potasse et à l'acide chlorhydrique, et surtout au brome).

412 URINE. — p. NORMAUX, pepsine, 3néphroz\mase, acide cryptophanique.

Sa présence dans l'urine en grande quantité serait un indice de résorption biliaire et de troubles hépatiques (?).

La quotité du soufre se déduit de celle du sulfate de baryte formé en multipliant celle-ci par 0,13754.

Pepsine. — Brûcke a signalé dans l'urine normale des traces de pepsine. Pour les isoler, il opère sur une grande quantité d'urine qu'il additionne d'acide phosphorique et neutralise ensuite par un lait de chaux. Le phosphate calcaire en se précipitant entraîne la pepsine. Le précipité lavé et redissous dans l'acide chlorhydrique faible contient de la pepsine dont on constate la présence par une digestion artificielle.

Nephrozijmase. — En précipitant l'urine normale avec trois fois son volume d'alcool à 90°, le précipité lavé à l'eau possède la propriété de transformer à la température de 60 à 70 degrés l'amidon en sucre. Béchamp, qui a signalé le fait, le considère comme caractérisant la présence d'un corps particulier, la néphrozymase. Von Yingtschgau et CorbelU croient ce corps identique avec la ptyaline, ils le décrivent comme soluble dans l'eau et sans action digestive sur la fibrine.

Acide cryptophanique. — Thudichum a donné ce nom à une matière azotée amorphe, isolée par lui de l'urine à l'aide d'un traitement successif par la chaux, l'alcool et l'acétate de plomb. Les sels de cet acide sont comme lui incristallisables, aussi la plupart des chimistes qui ont répété les recherches de Thudichum considèrent-ils ce produit comme un mélange (Maly, Salkowsky, etc.). Hlasivetz et Habermann ont émis l'hypothèse qu'il s'agissait peut-être d'un acide glutaminique impur, hypothèse absolument inacceptable d'après Lôbisch.

Corps le'voyyre de Haas. — Toute urine même exempte de sucre et d'albumine possède un très-léger pouvoir rotatoire à gauche. Cette propriété inappréciable avec l'appareil de Soleil exige, pour être manifeste, le polarimètre de Wild (t. XXXII, p. 77) et une colonne liquide de un mètre. La rotation dans ces conditions varie de 3 à 10 minutes (Haas). La substance qui donne à l'urine cette propriété n'est pas volatile, elle se dissout dans l'eau ou l'alcool et précipite par l'acétate de plomb ammoniacal. On n'a pu l'isoler du précipité (Haas).

Corps chloré de Steinauer. — D'après cet auteur, l'urine normale soumise à la dialyse et débarrassée par elle des chlorures donnerait pour résidu une substance contenant 6,5 7o de chlore organique et réduisant à chaud la liqueur de Barreswill sans dépôt d'oxydule de cuivre.

Corps azoté de Baumstark. — Il faudrait environ quarante litres de liquide pour en faire la recherche dans l'urine normale. Il serait plus abondant dans l'urine ictérique, mais pourrait néanmoins ne pas s'y trouver. Pour l'isoler, l'urine est évaporée à consistance sirupeuse, et précipitée par l'alcool absolu. Le résidu de l'évaporation de l'alcool est agité avec de l'éther qui lui enlève l'acide hippurique et précipité ensuite par l'acétate de plomb ammoniacal. Le dépôt plombique est suspendu dans l'eau et décomposé par l'hydrogène sulfuré. Après filtration et évaporation, l'eau abandonne de l'urée et une substance cristalline insoluble dans