URINE. — PRODUITS NORMAUX. PHÉNOLS

opiniâtre, obstruction, etc.). Saikowsky a vu dans Tileus la quantité de phénol éliminée en 24 heures monter à 315 milligrammes. Un fait analogue se produit quand il existe un foyer de putréfaction ou de gangrène en communication avec Tair : gangrène pulmonaire, carcmome de l'utérus; bronchite putride, empyème ou abcès fétide. Dans un cas d'empyème, Brieger a trouvé 630 milligrammes de phénol en 24 heures.

Si Fon voulait constater que les phénols sont à l'état d'acides sulfo- :oDJugués, il suffirait de précipiter préalablement les sulfates par le ihlorure de baryum en excès et de faire bouillir après séparation des •ulfates de bai^te et addition d'acide chlorhydrique ; un nouveau dépôt lesuiratebarytique prouverait la préexistence des acides sulfo-conjugués. W prouver la présence du phénol libre ou combiné aux alcalis il faubit distiller l'urine avec de Facide acétique qui n'est pas assez puissant lour décomposer les phénylsulfates.

i OH Phénols diatoniques C^H* ^^. Des trois phénols diatoniques que l'on

oonait, deux, l'hydro-quinone et la pyrocatéchine, peuvent apparaître pontanément et surtout après une absorption d'acide phénique dans orine de l'homme et des animaux. Le troisième, la résorcine, ne parait V montrer qu'après l'usage thérapeutique de cette substance. L'étude de es phénols dans l'urine est très-difficile, car ils y existent en quantité itrémement faible. Leur importance est relative à la question des urines cires ou noircissant à Tair, dites urines carboliques, qui se montrent oelquefois spontanément, mais surtout à la suite de l'absorption de acide phénique ou de la résorcine par les plaies ou le tube digestif, oates les fois qu'une urine noircit à l'air, on peut y soupçonner la présence es phénols diatomiques. L'urine de cheval, qui possède normalement ^te propriété^ contient toujours delà pyrocatéchine en partie libre et en iriie à Tétat de combinaison sulfurique. En général, ces substances érivent du phénol par oxydation comme le phénol de la benzine, mais Iles peuvent aussi provenir de l'alimentation. La production aux dépens c l'acide phénique est prouvée par ce fait que, lorsqu'on administre elle substance à un animal, la moitié environ disparaît dans l'orgaisme (Schaffer, Auerbach) et se retrouve sous forme de phénols diatoniques combinés à l'acide sulfurique. L'origine alimentaire résulte égasmentde l'expérience. Il existe en efTet dans quelques végétaux de l'acide fotocatéchique qui peut sous l'influence du ferment pancréatique se lédoabler en pyrocatéchine et acide carbonique, et Baumann a trouvé 'ans diverses espèces de fruit, surtout les pommes, le raisin et aussi Isnsie vin, une substance qui présente les réactions de la pyrocatéchine. 'Htin Hoppe Seyler a démontré que la pyrocatéchine peut dériver de tous <^s hydrates de carbone (cellulose, amidon, etc.) chauffés avec de l'eau ^n lubc scellée à la température de 200 à 280.

lae urine chargée de phénols diatomiques noircit à l'air de la surface 'ers la profondeur, particulièrement si elle est alcaline. Elle doit de plus iprès ébullition avec un acide minéral réduire à froid les chlorures d'or

>WT, incT. wfft. «r ciiiB. XXXYIl — 26

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et de platine, le permaoganate de potasse, et à chaud la liqueur ^. Fehling a^ec séparation d'oxydule de cuivre (Neubauer). Toutefoii k^ réactions précédentes sont souvent insuffisantes, vu la dilution da liquide, et il faut pour caractériser ces produits les isoler de l'urine et constata leurs principales réactions. Pour extraire la pyrocatéchine et Thydroqùnone de Turine humaine, on doit opérer sur la plus grande quantité p(hsible de cette humeur. Avec Turine de cheval 250 granmies soffiscnl (Baumann). Neubauer indique la méthode suivante : Purine évaporée i la moitié ou au tiers de son volume est filtrée, puis bouillie quelque minutes avec un peu d'acide sulfurique et après refroidissement ^zM avec de Téther. Le rendu de Tévaporation de Téther est repris par Veau, neutralisé et précipité par l'acétate neutre de plomb qui entraîne la pyrocatéchine et non Thydroquinone. Pour obtenir celle-ci après séparai tion du précipité plombique, on élimine dans la liqueur l'excès de plonihj par de Tacide sulfurique étendu, on filtre et en faisant bouillir avec ^ carbonate de baryte on enlève l'excédant d'acide sulfurique. II ne rertf plus qu'à filtrer et agiter avec de l'éther qui s'empare de l'hydroquinoi^ et l'abandonne par éyaporation. On peut la purifier par cristailisat]<4 dans le toluène. Elle constitue des cristaux rhombiques, des aiguilles oé des tables qui fondent à 169^ et présentent, outre les propriétés réducli^fl signalées plus haut qui leur sont communes avec la pyrocatéchine. If deux suivantes qui leur appartiennent exclusivement : a. Ils donnent 4 la quinone par ébullition avec le pcrchlorure de fer. 6. Les cristaitf chauffés rapidement dans un tube ouvert donnent des vapeurs violette et un sublimé bleu (quinhydrone). La pyrocatéchine se retire JE précipité plombique lavé, mis en suspension dans l'eau et décomposé |i^ Tacide sulfurique étendu. On fait bouillir avec du carbonate de barti pour enlever l'excès d'acide sulfurique, et la solution filtrée refroidie d agitée avec de l'éther, qui prend et abandonne par évaporation la pyrocjll chine que Ton purifie par cristallisation dans la toluéine ou la beniine. Uj

cristaux sont des prismes droits à base carrée fusibles de 102 â 104 . solution, ils donnent avec le perchlorure de fer la réaction suivante qv est caractéristique : Si l'on ajoute à une solution très-étendue de percbk» rure de fer quelques gouttes d'une solution de pyrocatéchine, le mélan.t prend une belle teinte vert émeraude. En soufflant à la surface du liquîJs des vapeurs ammoniacales, la couleur passe au violet. On peut encor* ajouter au liqr'" * * j»--j- *— . ^-i^^- i-

précipitation di niaque liqnide,

C'est à la présence des corps précédents (pyrocatéchine et hydroqui nono.) que les urines dans l'intoxication phéniquée doivent la proprictt d'être noires verdatrcs à l'émission ou de noircir à l'air (Baumann). h les ajoutant à l'urine normale on la voit se foncer graduellement et dr venir noire de la surface vers la profondeur; probablement par oxydatio.". La nature des pigments formés est absolument inconnue. Exceptionnel' lenient i^>s urines peuvent devenir noires après l'ingestion de pruJuiL'

URINE. — PRODUITS HORHAUX. OXTACIDKS AROM. 403

aromatiques différents des précédents, tels que l'acide pyrogallique, le Daphtol, Taniline, le paramido-phénol, l'acide salicylique (Neubauer). Est-ce par la même réaction? Il en est de même après l'administration de la résorcine.

Oxyacides aromatiques. — Leur étude se rattache à celle des phélols, car, si les conceptions théoriques des auteurs qui le sont étudiés sont iiactes, ces corps, dans la putréfaction de Talbumine, seraient les inter- Dédiaires entre la tyrosine et les phénols. On en a isolé deux de l'urine lormale, ce sont les acides hydroparacoumarique.

C8H4 \ OW

^ " l CH«-CH«-CO.OH

t paroxyphénylacétique.

Is y existent en très-petite quantité ; de cent litres d'urine Baumann n*a «extraire qu'un gramme de chaque acide. Ils paraissent s'y trouver en artie libres ou à l'état de sels, en partie à l'état d'éthers sulfuriques cides, car, en agitant avec de l'éther l'urine concentrée et additionnée *acide acétique, une partie seulement de ces acides passe dans l'éthec; autre n'est enlevée par ce dissolvant qu'après action de l'acide chlorhyrique. Pour les isoler, on évapore l'urine fortement et le résidu préalalement acidulé est agité avec de l'éther. On purifie par des dissolutions qK'tées dans l'eau et l'éther. Les deux acides se distinguent l'un de l'autre prieur solubilité différente,. et la température de fusion de leurs cris- |ui (148* a. para-oxyphenil, 127^ a. hydropara). Ils ne sont pas entraînés irla vapeur d'eau, et donnent par rébullition avec le réactif de Millon pe coloration rouge intense. En l'absence de procédé rigoureux d'estilation, Baumann conseille une méthode d'évaluation approximative basée n la réaction précédente : 20 centimètres cubes d'urine sont mis à igérer au bain-marie avec un peu d'acide chlorhydrique étendu. Après efroidissement, on agite avec de l'éther que l'on renouvelle trois fois. Les Kiraits éth<^rés réunis sont agités avec une solution aqueuse de carbonate e soude qui s'empare des acides, tandis que les phénols qui agiraient de léme sur le réactif de Millon restent dans l'éther. La solution sodique ^euse des oxyacides est acidulée faiblement par l'acide sulfurique et gitéeavec de l'éther. Après évaporation de celui-ci, le résidu est dissous ^ 20 centimètres cubes d'eau et chauffé avec 12 gouttes de réactif de lilloQ;rintensité de la couleur rouge produite permet de présumer la pantité des acides cherchés. A l'aide de ce procédé, Baumann a constaté, ^r six malades atteints d'affections différentes et dont les urines étaient "iches en phénols, que la quantité des oxyacides aromatiques était de deux (huit fois plus élevée qu'à l'état normal. C'est dans un cas d'intoxication >bosphorée au quatrième jour, quarante-huit heures avant la mort, que on a obtenu la réaction la plus intense. Chez des chiens empoisonnés par le phosphore, Baumann a également trouve du deuxième au quatinème

40é liftlNE. — PRODUITS NOBMAUX. IflOlCAK.

jour la réaction des oxyacides trois ou quatre fois plus forte qu*à Velit normal.

Indicsan. — I/élude de Tindican des urines fait naturellement suite i celle des phénols, car les deux sortes de produits s'y rencontrent en quantité anormale dans les mêmes circonstances et sous des formes chimiques qui présentent la plus grande analogie.

Dans des cas exceptionnels^ Turine est émise fortement colorée en blea (Indigurie de Beneke) ou abandonne à l'air un sédiment bleaàtre, soit sur les parois du vase, soit à la surface du liquide. Il s*agit toujours dansées cas d^urines pathologiques ayant une réaction fortement alcaline. C'est précisément cette réaction ou plutôt ce sont les microbes dont ellepro vient qui mettent en liberté le pigment par destruction du composé qui en dissimulait la présence. On cite des cas où l'on a trouvé des calculs constitués en grande partie par de la matière colorante bleue.

Ce pigment bleu des urines décrit pour la première fois par Bracoonot sous le nom de cyanourine a été envisagé par Robin et Verdeil comme un dérivé urique et par Yirchow comme provenant de l'hématine, opiniom qui sont aujourd'hui reconnues inexactes. Gubler, en France (choléra de 1854)» et plus tard Schunck (1858), reconnurent l'identité de cette féstance avec Tindigo. Dès longtemps déjà les recherches de Haller (18*2^1 avaient prouvé que la matière colorante bleue existe à Tétat latent dam nombre d'urines qui ne la déposent pas spontanément et qu'elle y est sous forme d'un chromogène capable de fournir le pigment bleu par i nifluence des acides ou de la putréfaction. La nature de ce chromogèoei longtemps exercé la sagacité des chimistes. Schunck le considérait comm^ un glucoside identique à celui qui existe dans les plantes indigo(eres ft lui donnait pour ce motif le nom d'indican. Son opinion fut quelque temps acceptée et l'on admit que l'indican se dédoublait en trois sub* stances, sucre, indirubine (indigo rouge) et indiglaucine (indigo bleiii. Hoppe Seyier, le premier, montra que l'opinion de Schunck est inexacte et que l'indican urinaire est beaucoup plus stable que celui des plante^. Plus récemment, les beaux travaux de Baumann et Brieger ont établi que le chromogène est un éther sulfurique de l'indol et qu'il existe dar» l'urine à l'état d'indoxylsulfate de potasse.

II résulte de ces recherches que l'origine de l'indigose urinaire ti rindol (C^H^Az), substance fondamentale de tous les composés indigotiqo^• Sans faire ici l'étude chimique de coproduit, nous dirons simplementqve l'indol est un corps solide en écailles micacées comme l'acide benzoîque. fusible à 52°, exhalant une odeur fécale très-prononcée. Soluble facilement dans l'alcool et l'éther, il se dissout moins bien dans Tean. Sa solution aqueuse, traitée par l'acide nitrique fumant étendu, donne solvant sa concentration une teinte rouge de sang ou un précipité flocooneux de même couleur. En injectant sous la peau d'un chien de l'indoUn provoque constamment l'apparition de grandes quantités d'indican dao^ I urine (JafTé, Masson). L'indol dans ces expériences ne semble pas avi>K Ht; propriétés toxiques ; son élimination très-rapide est complète eo vingt*

URINE. — PRODUITS KORMâUX. UtDICÀH. 405

quatre heures. En l'absence d'apport extérieur, l'indol prend naissance dans lorganisme, grâce aux fermentations digestWes. Dans Texpérience déjà citée (macération du tissu pancréatique avec de la fibrine ou de

I alboffline dans l'eau à 40"), Nencki a observé un développement d'indol.

II s eu produit également toutes les fois que l'albumine se putréfie (Uoppe Seyler, Kûhne). D'après la remarque d'Odermalt, dans la putréfaction pancréatique l'indol se montre le premier et pendant un certain temps seul; le phénol n'apparait guère qu'après le sixième jour et sa quantité croit avec la durée de l'expérience.

Pour obtenir le chromogène qui donne naissance à l'indigo et déterminer sa véritable nature, Baumann et Brieger ont opéré de la manière iuivante. Ils réunirent l'urine émise pendant cinq jours par un chien qui svjjt pris dans cet espace de temps 20 grammes d'indol pur. L'urine fut évaporée à cristallisation et Teau-mère traitée par l'alcool à 90°. Dans Textrait alcoolique, l'urée qui avait échappé à la cristallisation fut précipitée par une solution alcoolique d'acide oxalique et l'excès de celui-ci éliminé par une solution de potasse caustique dans l'alcool. Après sépalation des précipités par filtration, le liquide alcoolique fut évaporé à deux litres environ et mêlé avec son volume d'éthcr. Il se sépara du mélange un précipité qui fut à plusieurs reprises redissous dans l'alcool boaillant et reprécipité par l'éther (l'éther retient des traces d'urée et, à chaque traitement par l'alcool, il reste un résidu insoluble d'extractif). La purification jugée suffisante, la solution alcoolique fut additionnée déther jusqu'à trouble persistant et la liqueur abandonnée à froid déposa sn corps cristallisé en paillettes brillantes d'un blanc éclatant, assez nluble dans l'eau et l'alcool chaud. L'analyse assigne à ce corps la for* mule suivante : C'H'AzHSO^ C'est l'indoxylsulfate dépotasse. Il peut sans décomposition résister plusieurs heures à une température avec 160 à 1 70*^ Béme en présence de la potasse caustique (différence de l'indican des plantes). Chauffé avec un acide minéral étendu, il se dédouble avec absorption d'eau comme tous les sels des éthers sulfuriques acides en nlfate acide et radical hydroxylé :

S0« I o.K*^^* + ^*^ = C»H«Ai.OH + SO» | ^^ Indoxylsulfate de potasse. Indoxylc. Suif, acide de pousse.

Pendant cette décomposition, le liquide se colore et une odeur féca* ioîde ae développe ; il peut même, si la solution est assez concentrée, se séparer des gouttes huileuses. L'indoxyle ainsi mis en liberté est peu ^ble.A l'abri del'air, la majeure partie se change en un produit de coodeusation brun amorphe peu étudié qui se dissout dans l'alcool, lether et le chloroforme avec une teinte rouge (indirubine de Schunck?); une petite partie se transforme, grâce à des traces d'oxygène, en indigo bleu:

2((?HHx.0H) + 0« = C*«H*oAi«0« + 2IP0

Indigo bleu. Ean.

A Pair, ou quand l'acide qui sert à opérer la décomposition est addi-

406 URINE. PRODUITS normaux corps. I5DICAX.

tionné de matière oxydante (eau de chlore, perchlorure de fer, elo, la totalité de Tindoxyle passe à Tétat d'indigo bleu. ChaulTé dans un tuU. rindoxylsulfate de potasse donne des vapeurs pourpres et un subliiué d'indigo. Ainsi que nous l'avons déjà dit, le dédoublement de rindoxylsulfate de potasse s'opère aussi par l'influence du ferment de l'urée.

Pour reconnaître dans Turine la présence de l'indican, l'opératioD e<t beaucoup plus simple. Il suffit de la mélanger avec son volume d'acide chlorhydrique concentré. On attend quelques minutes et l'urine se colore d'une teinte bleue variable suivant la quantité d'indican qu'elle renfense. On peut rendre la réaction plus rapide en versant quelques gouttes d'acide nitrique ou d'hypochlorite de chaux (solution au vingtième), mais ilfaul se garder d'en trop ajouter pour éviter la destruction de l'indigo. Souvent aussi il est avantageux pour la netteté de l'opération de traiter U mélange d'urine et d'acide par l'éther ou le chloroforme qui lui enlèveat la matière bleue. L'éther s'émulsionne moins avec l'urine, mais il dis^oQt plus d'impuretés. L'extrait éthéré est parfois plus violet que bleu, l'extrait chloroformique est d'un bleu plus pur.

Pour la détermination quantitative, deux procédés de dosage ont élr indiqués par Jaffé et par Salkowsky. Dans celui de Jaffé, on précipite de l'urine l'indoxylsulfate de potasse à l'état de persel de fer, le sel de ier est transformé par l'alcali volatil en sel d'ammoniaque, et c'est de ce dernier que l'on extrait l'indigo par l'acide chlorhydrique et le chlorure dt chaux. Le précipité est lavé, séché et pesé. Il faut opérer sur un litre i un litre et demi d'urine.

La méthode précédente est longue et souvent inexacte, car, au dire di- Jaffé lui-même, le filtre ne retient pas toujours la totalité de Tindiiiv : celle de Saikovrsky, moins exacte peut-être d'après Lôbisch, plus Mm au contraire d'après Neubauer et, en tout cas, plus rapide d'exécution, t?t basée sur une évaluation colorimétrique. Après avoir déterminé par oc essai préalable la quantité de chlorure de chaux (solution au vingtièiw nécessaire à l'oxydation, on prend 10 centimètres cubes d*urine que IVo mélange avec 10 centimètres cubes d'acide chlorhydrique et la quantilr convenable d'hypochlorite calcaire. Quand le maximum de coloration ^'(^ produit, on ajoute à la liqueur une quantité de soude caustique prex|u( suffisante pour la neutraliser, puis un excès de carbonate de soude, h les phosphates en se précipitant entraînent l'indigo. On filtre sur vt filtre à plis, on lave jusqu'à disparition de la réaction alcaline ci \<^ épuise le filtre séché et coupé en lanières par du chloroforme bouiilact Pour une urine modérément chargée, 30 centimètres cubes de cblurforme suffisent. La solution chloroformique est comparée sous épii.«^<«^ égale avec une solution type contenant T""'^'*',! d'indigo pour "ÎW ceob mètres cubes. En général, la solution tirée de l'urine est trop faible tH -I faut l'additionner pour l'égalité des teintes d'une certaine quantité doc« solution plus forte à titre connu. Un calcul de proportion donne le p'> cherché d'indigo.

A Vn\Ai^ de ga méthode, Jaffé a trouvé une proportion moyenne ■