‹ Nouvelles méthodes de dosage spécifique de quelques acides aminés: Alanine, valine, leucine, sérine et acide aspartiqueChapitre 18 sur 45 · MAUR |. HP · texte numérisé non relu

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Application à l'étude de quelques protéines

Il n’est pas sans intérêt de signaler ici que la méthode de dosage que nous avons ainsi mise au point, et qui vient d’être discutée, a été appliquée, au laboratoire, par P. Desnuelle [8] à l’étude de la teneur en alanine, en sérine et en acide aspartique, de quelques protéines : édestine, caséine, protéine du ferment jaune. Cette étude a d’ailleurs conduit Desnuelle à apporter quelques modifications à la méthode en question, modifications que nous croyons utiles de rapporter ici.

1. — DOSAGE STUFOPHOTOMÉTRIQUE DE L'ACÉTALDÉHYDE. — OBTENTION D’UNE COURBE DE RÉFÉRENCE.

La généralisation de l’emploi du stuphotomètre de Pulfrich rendait l’utilisation de cet appareil particulièrement intéressante ici. Voici comment l’on opère le dosage stufophotométrique de l’acétaldéhyde :

On prépare une solution d’acétaldéhyde en oxydant au permanganate une solution d’acide lactique. On fait barboter les vapeurs qui prennent naissance dans du bisulfite de sodium. Après destruction de l’excès de bisulfite par l’iode, l’acétaldéhyde est mis en liberté par addition de bicarbonate de sodium. On titre alors exactement par l’iode N/100. La liqueur ainsi obtenue est diluée à un volume connu. Soit L cette solution. On mélange dans un tube à essai a ce. de L contenant entre 200 et 700 y d’acétaldéhyde, (6— a) cc. d’une solution contenant, et dans les mêmes proportions, tout ce que contient la solution L, sauf l’acétaldéhyde, 1,5 cc. d’une solution saturée de pipérazine hydratée et 0,5 d’une solution fraîche de nitroprussiate de sodium à 4 %. Le volume final est ainsi de 8 cc. Après agitation, le liquide est placé dans la cuvette convenable de l’appareil de Pulfrich.

OO

Soient :

d l'épaisseur de la cuvette en cm.

D l'absorption en % correspondant au filtre (S 57) utilisé ici. Cette valeur est obtenue en faisant la moyenne de six lectures, trois faites sur le tambour de droite de l'appareil et trois faites sur le tambour de gauche. Ces six lectures sont effectuées au cours de la période de deux à trois minutes pendant laquelle l'intensité de la coloration reste constante.

k le chiffre correspondant à D dans la table livrée avec l'appareil.

Les éléments de la courbe yÿ=f(k) sont donnés par le tableau XI.

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