CHAPITRE I

suffisamment serrées pour qu’il puisse retenir les traces de sel de plomb insoluble qui est si divisé qu’il rend la solution opaline. Voici comment on prépare ce filtre.

On choisit un papier épais et très égal, et on le charge 1 de sulfate de baryte très pur, que l’on broyé dans l’eau au moment de s’en servir. On verse du liquide trouble jusqu’à ce que les parois du filtre soient recouvertes d’au moins un demi-millimètre de ce sel; puis, avec précaution, après que le filtre est bien égoutté, on verse la solution albumineuse, et, presque du premier coup, on arrive à avoir des solutions d’une limpidité parfaite. Ce sont ces liqueurs qui vont servir à prendre le pouvoir rotatoire de la matière dissoute. Je décrirai, plus loin, et en détail, la manière d’opérer pour cette détermination si importante.

M. A. Béchamp a ainsi trouvé, pour les deux albumines vraies du blanc d’œuf de poule, les pouvoirs rotatoires suivants :

Primovalbumine [a], = 34°, 14 |

Secondovalbumine id. = 52°, 7 ^

Mais, comme je l’ai dit, on trouve habituellement, à côté des albumines ordinaires, quelque zymase. Cette dernière, quand il s’agit de l’œuf de poule, n’est jamais précipitée ni par l’acétate neutre de plomb, ni par l’extrait de saturne. Elle l’est toujours au contraire par l’extrait de saturne ammoniacal, et par conséquent se trouve mêlée à la secondovaibumine. Pour la séparer de l’albumine, on acidulé légèrement la solution par l’acide acétique, et ou ajoute au moins trois volumes d’alcool à 90° centésimaux. Le précipité est recueilli sur un filtre et lavé à l’alcool à 80°. On essore et on reprend par l’eau. La zymase entre seule en solution ; il faut laisser macérer le précipité pendant quelques heures, puis on filtre. Le liquide filtré ne contient pas encore la zymase pure, les matières albuminoïdes se dissolvant facilement les unes les autres. Aussi faut-il la reprécipiter une seconde fois par l’alcool, reprendre par l’eau pour séparer une nouvelle portion de l’albumine entraînée devenue insoluble. Il faut, en général, répéter celte opération une troisième fois. Enfin, après une dernière

précipitation, on en prend le pouvoir rotatoire. M. A. Bécliamp a ainsi trouvé :

Leucozymase [a],- == 78° 6 \

Mais on ne manquera pas de remarquer que la secondovalbumine est devenue insoluble et qu’on n’a pas pu prendre son pouvoir rotatoire directement. A la vérité, on peut chercher un dissolvant : l’acide acétique par exemple. Mais j’ai fait remarquer combien il fallait être prudent dans l’emploi d’un dissolvant chimique.

M. A. Béchamp est arrivé à prendre le pouvoir rotatoire de la secondovalbumine en solution aqueuse, c’est-à-dire à l’isoler pure, exempte de zymase, en procédant par précipitations fractionnées. En effet, si on ajoute une quantité insuffisante d’extrait de saturne ammoniacal à la solution albumineuse, la première portion du précipité ne renferme que l’albumine, la zymase reste en solution, mêlée à la portion de secondovalbumine non précipitée. C’est à l’aide de ce même procédé que j’ai pu prendre le pouvoir rotatoire d’albumines pathologiques correspondant à la secondovalbumine, sans mélange de zymase.

Il est utile de faire remarquer que la zymase n’est pas un produit d’altération sous l’influence des réactifs ou de tout autre cause : elle préexiste dans le blanc d’œuf. Si, en effet, on précipite une solution de blanc d’œuf de poule normal, préalablement neutralisé par l’acide acétique, par trois volumes d’alcool à 90°, si on essore et reprend par l’eau , la primovalbumine et la secondovalbumine restent insolubles, et la zymase seule entre en solution : elle a exactement le même pouvoir rotatoire que celle isolée par l’extrait de saturne ammoniacal et les mêmes propriétés. Je dois ajouter que les choses se passent identiquement de la môme façon pour les liquides d’épanchements.

En opérant exactement comme je viens de l’indiquer, on arrive à isoler des matières qui ne contiennent plus que deux à trois millièmes de cendres et même, comme on le verra, des traces seulement que la balance n’accuse plus.

J’ai donc appliqué cette méthode à l’analyse des matières albuminoïdes des blancs de divers œufs et des liquides

d’épanchements. Pour ce qui est de l’analyse du blanc des œufs, je n’aurai plus guère à y revenir. Pour le jaune, la méthode est particulière, je la décrirai au moment voulu. On avait considéré cette partie de l’œuf comme formée par des matières grasses et la lécithine mêlées à la vitelline. Nous verrons qu'il y a dans le jaune des albumines solubles et une matière insoluble : les microzymas. Nous y reviendrons.

Quant aux matières albuminoïdes contenues dans les liquides d’épanchements, il est nécessaire de faire une remarque importante.

Les albumines, en général, possèdent la double fonction d’acide et de base. Dans l’œuf, dans le sang comme dans les liquides d’épanchements, elles sont à l’état d’albuminates de potasse ou de soude. D’un autre côté, elles peuvent s’unir aux acides et en fixer des quantités vraiment considérables. En voici des exemples :

Acide acétique fixé par la secondovalbumine = 30,45 p. °/0 id. chlorhydrique id. id. = 10,00 p.%

Mais parmi les matières albuminoïdes, il en existe qui sont douées à un haut degré de la fonction acide. Je citerai d’abord l’exemple de la caséine. Elle est insoluble dans l’eau, mais peut se dissoudre dans le carbonate de soude en donnant une solution à réaction acide : elle peut, en un mot, former un vrai bicaséinate. Je citerai encore une albumine du lait, la lactalbumine, dont le sel de plomb est indécomposable par l’acide carbonique (1).

Il en est de même de certains albuminoïdes pathologiques. Ainsi que je le ferai remarquer, les albumines "précipitées des liquides pleurétiques ou ascitiques par l’acétate neutre de plomb, donnent comme la lactalbumine des albuminates sur lesquels l’acide carbonique est sans action. J’ai alors tenté de produire l’attaque en provoquant une double décomposition à l’aide d’un sel dont la base formerait avec la matière albuminoïde une combinaison soluble, l’acide avec l’oxyde de plomb une insoluble. Celui qui réussit le mieux d’une façon générale est le carbonate

Cl) A. Béchamp. Mémoire aur les matières albuminoïdes. Revue des Savants étrangers, t. XXVIII, n° 3, 1881.

neutre d’ammoniaque. Cependant il y a des cas où son action paraît ôtre nulle, puisque l’albumine ne se trouve pas en solution. Il est très probable que l’albuminate a blé décomposé, mais que la matière albuminoïde est devenue insoluble dans le milieu; elle se dépose en même temps que le carbonate de plomb formé. Dans ces cas, j’ai dû renoncer à déterminer le pouvoir rotatoire.

Si la décomposition s’effectue et que la matière albuminoïde entre en solution, le mélange épais de l’albuminate de plomb et de l’eau se liquéfie. Le carbonate de plomb ne se sépare qu’avec une extrême lenteur; à cause de sa grande ténuité, il est maintenu eu suspension par la viscosité du milieu, et il faut plusieurs jours d’attente pour que le dépôt soit entièrement effectué. La séparation du précipité par la filtration demande aussi un temps très long. On ne peut employer que des filtres à mailles très serrées, dont les pores sont très rapidement bouchés par le composé insoluble. Pour donner une idée de la durée de la filtration et du lavage, qui sont indispensables dans le cas d’un dosage, quoique la quantité de matière albuminoïde dissoute ne soit que de 3er pour 100cc à 150ccde liquide, j’ai constaté qu’il fallait compter sur un temps d’au moins 96 heures pour obtenir des liqueurs suffisamment limpides pour être observées au polarimètrc.

J’ai déjà parlé de l’emploi des filtres garnis de sulfate de baryte qui donnent d’excellents résultats; mais il faut noter qu’on ne peut pas les employer pour filtrer des liquides qui ne contiendraient qu’un excès, même très léger, d’alcali. Il faut bien remarquer que les liquides naturels, quoique alcalins, peuvent être aisément filtrés : la potasse ou la soude n’y sont pas à l’état de liberté , mais bien à Tétâtd’albuminates. Quand, au contraire, une solution albumineuse contient une de ces bases ou l’ammoniaque à 1 état de liberté, leur emploi devient désastreux. Le sulfate do baryte est attaqué, il acquiert une quasi-solubilité dans le milieu albumineux, les liqueurs deviennent opalines, et sont désormais inobservables au polarimètrc. On peut, dans ces cas, remplacer le sulfate de baryte par le carbonate de cette base ou le carbonate de chaux qui donnent aussi de très bons résultats.