CHAPITRE II

Ce chapitre comprendra trois paragraphes. Dans le premier j'exposerai les résultats obtenus, concernant les poids secs de Penicillium et les rendements pour cent grammes d’aliment consommé, avec les cultures provenant de tous les milieux organiques.

Pourcesdéterminations, on effectue habituellement lesrécoltes au moment où l'aliment est complètement disparu des liquides de culture. C’est ainsi que j'ai procédé pour étudier l'influence nutritive de doses croissantes d'acide sur le végétal.

Mais, dans le cours de mes essais, j'ai cru remarquer que les valeurs maxima du poids sec et du rendement p. 100 avaient plutôt une certaine corrélation avec le phénomène, si apparent, de sporulation du Champignon qu'avec l’utilisation complète de l'acide. Aussi, afin d’élucider ce point intéressant, j'ai récolté le mycelinm aux trois états végétatifs suivants : 1° au début de la sporulation, caractérisé macroscopiquement par une légère teinte verte du mycélium; 2° en pleine sporulation, c'est-à-dire lorsque les spores sont vert-franc; 30 à un stade plus avancé, fixé par la couleur vert-foncé ou brun-vert que prennent ensuite les spores; et au moment précis où le liquide ne renferme plus d'acide. J'ai ainsi reconnu que tous les rendements et, en général, les poids secs étaient maxima au début de la sporulation el que celle-ci se produisait avant la consommation totale de l'acide organique. Comme, d'une part, la sporulation ne vient que tardivement et que, d'autre part, les diverses récoltes. pour un même acide, sont assez espacées les unes des autres, surtout quand il s’agit d’un végétal qui double son poids en quelques Jours, les faits constatés peuvent manquer de précision, dans le temps et bien d’autres ont pu échapper à l'observation. C'est pourquoi j'ai, dans d’autres séries de recherches, prélevé le mycélium à des intervalles de temps beaucoup plus rappro-

chés : deux ou trois jours. Chacune deces considérations entraine une division du paragraphe.

Dans le deuxième, j'étudierai les variations des acidités fixe et volatile, que j’aidéfinies dans Le premier chapitre, des milieux de culture durant le développement du Penicillium. Elles me permettront, d'abord, de montrer la formation progressive d'acide nitrique, mis en liberté par l'assimilation d’une quantité correspondante d'ammoniaque du nitrate ammoniacal que renferme normalementle Raulin ; et, ensuite, sa disparition plus ou moins accentuée, selon les besoins en azote du mycélium. Il résulte de cette nutrition azotée du végétal, dont l'origine est double, des fluctuations incessantes, qu’il est utile de

* connaîlre, dans la teneur en acide nitrique et en ammoniaque des liquides de culture.

L'acidité volatile est égale, je le rappelle, à la différence entre les acidités totale et fixe : elle n’est pas négligeable puisqu'elle atteint toujours dans chaque milieu, une valeur maxima qui correspond à 087,20 environ d'acide nitrique.

La production etla destruction de cetacide minéral sont, en outre, à un tout autre point de vue, très importantes à suivre de près car elles me fourniront l'explication des variations de l'acidité des milieux Raulin ou analogues, signalées par quelques auteurs. Dans les liquides que j'ai expérimentés, sauf celui contenant le glucose, l'augmentation momentanée de leur acidité que Kiesel considère, avec juste raison, comme générale avec l'Aspergillus niger, ne peutse constater, comme j'en donnerai plus loin la raison bien simple.

Après avoir dosé les quantités d'acide nitrique libre qui se forme ainsi dans les divers milieux, il était indispensable pour en préciser l’origine, de se renseigner sur les teneurs concomItantes de lammoniaque. Et, du rapprochement des chiffres trouvés pour l’un et l’autre je déduirai des remarques sur l'utilisation de l'azote ammoniacal et la mise en liberté d'acide nitrique, dont l'opposition constituera une deuxième preuve, pour ainsi dire biologique, de l'existence à l'état libre de cel acide dans les milieux de culture. Ce sera l’objet du troisième paragraphe.

SI. — DÉTERMINATION DES POIDS SECS ET DES RENDE- MENTS. P. 100 D’ALIMENT CONSOMMÉ DES CULTURES DE PENICILLIUM.