CHAPITRE II

TECHNIQUE DE NUMERATION

Nous avons utilisé la méthode de Van Herwerden-Van Goidsenhosen avec adjonction. au liquide de dilution d’un colorant vital, le crésyl bleu (Benhamou et Nouchy).

Ce liquide de dilution suivant est préparé extemporanément :

Urée :.0 gr. 50

Eau distillée : 5 cc.

Nacl à 9 0/00 : 1 cc. 2

Bleu de crésyl : quelques parcelles pour colorer. Agiter et filtrer sur papier.

La numération des plaquettes est facile du fait de la lyse des hrématies par la solution d’urée. Le crésyl bleu rend les thrombocytes et les leucocytes très visibles.

La femme est couchée, La numération se fait toujours à la même heure, à distance des repas — au moins 4 heures après — pour éviter la plaquettose digestive (Benhamou et Nouchy). La prise de sang se fait au lobule de l'oreille avec vaccinostyle : il est nécessaire de piquer assez profondément pour que l'issue du sang se fasse sans qu'il soit nécessaire d'exercer de pression. La premier goutte de sang est essuyée avec un tampon sec, puis on plonge dans la deuxième goutte l'extrémité d’une pipette à leucocytes préalablement remplie jusqu'au trait 0,5 de liquide de dilution. On aspire le sang jusqu'au trait 1. Le liquide de dilution est aspiré ensuite Jusqu'au trait Il. On agite avec soin et

Tr.

l’on numère immédiatement les globulins afin d'éviter l’agglutination. Pour cela la moitié du contenu de la pipette est expulsée puis une goutte est introduite dans la chambre à numération de la cellule de Malassez. Avant de faire la numération il est nécessaire de laisser la cellule au repos pendant 20 à 30 minutes pour permettre la sédimentation des globulins.

Les thrombocytes se détachent en bleu, de même que les leucocytes dont le noyau est coloré en bleu, sur le fond clair de la préparation. I] faut éviter de compter les grains de poussière accidentels et manier constamment Ia vis micrométrique : le globulin coloré en bleu devient très réfringent quand on fait varier le point, tandis que le grain de poussière reste bleu ou disparaît.

Nous comptons les globulins se trouvant dans 10 rectangles de la cellule, soit dans 250 petits carrés. La chambre à numération étant graduée à 1/5 et le mélange étant à 1/20, chaque rectangle représente la 2000: partie d’un millimètre cube de sang.

Pour avoir le nombre de globulins contenus dans un mm° de sang il suffira de multiplier par 200 Ie nombre de globulins trouvés dans les 10 rectangles.

x 2000 NON 200

Nous comptons en même temps les leucocytes contenus dans les dix rectangles et faisons la même opération pour avoir leur nombre par mm“ de sang.

Cette méthode donne, chez les sujets normaux, un chiffre de 200.000 à 250.000 plaquettes par millimètre cube de sang.

Il est nécessaire de se servir toujours du même modèle de pipette car suivant le diamètre des tubes on peut avoir des chiffres très différents, du fait de l’accolement des pla-

quettes aux parois de verre.

Fans.