CARACTÈRES COMMUNS AUX TROIS TYPES D'HÉMATOZOAIRES
Procédé de Laveran. — Préparer, au moment du bain, le mélange suivant :
Solution d’éosine à 1 p. 100.......,...., 4 cent. cubes.
DISBOIPER 7. sn vesen sense ee À cent. cube.
TRE Re es LULU en de 10 cent. cubes.
Colorer pendant dix à quinze minutes (même précaution que pour le procédé de Romanowski : face en dessous). Laver à grande eau.
Faire agir, pour la différenciation, une solution de tanin à 5 p. 100 pendant cinq minutes environ. Laver de nouveau, sécher.
Les hématies sont colorées en rose, les noyaux leucocytaires en violet. Le protoplasma des parasites est bleu, la nucléole est rouge violacé.
Procédé de Giemsa. — Le procédé de Giemsaa pour but d'éviter l'emploi de deux liquides colorants ; on utilise un mélange de bleu et d’éosine.
Ce mélange se compose de bleu-azur II de Grübler et d’éosine, dissous dans la glycérine et l’alcool méthylique :
Solution d'écsine a 1pe1000,..,.......... 2 cent. cubes. Solution de bleu-azur II à 4 p. 1 000.... 1 cent. cube. Re CPE RER MO EMPIRE 8 cent. cubes.
Cette solution se trouve toute préparée dans le commerce.
Colorer pendant quinze minutes dans un bain obtenu par le mélange de dix gouttes de cette solution à 10 centimètres cubes d'eau distillée. Laver. Différencier par le tanin à 5 p. 100. Laver. Sécher.
Procédé de Leishman. — Le colorant de Leihsman s'obtient en dissolvant dans 10 centimètres eubes d'alcool méthylique des pastilles de tanin avec la poudre d’un mélange desséché, composé à parties égales de bleu de méthylène additionné de 0,5 p. 100 de carbonate de soude et d’éosine à 1 p. 1 000.
On verse sur la préparation II à IV gouttes de la solution obtenue ; laisser en contact pendant trente secondes, puis ajouter VI à VIT gouttes d’eau; laisser ce mélange en contact avec la préparation pendant cinq à dix minutes. Laver. Sécher.
La coloration est moins intense avec ce procédé qu'avec les précédents, mais elle a l'avantage d'éviter les dépôts de précipité.
Procédé de Marino. — Le bleu de Marino est versé sur la lame comme précédemment, mais, au lieu de l’étendre d’eau, on l’additionne d’éosine à 1 p. 1000. La coloration est faible.
Procédé de Hollande. — Hollande utilise un éosinate de bleu de
968 = HÉMATOZAOIRE DU PALUDISME.
méthylène transformé par la soude caustique. On le trouve dans le commerce sous l'aspect d’une poudre que l’on dissout à 4 p. 1000 dans l'alcool méthylique absolu. On laisse en contact vingtquatre heures.
Sans fixation préalable :
Verser sur l’étalement de sang non fixé douze à quinze gouttes de cette solution alcoolique ; laisser en contact pendant trois minutes qui permettent à la fixation de s’effectuer.
Recouvrir la lame d’un couvercle de boîte de Petri pour éviter l’évaporation de l’alcool; ajouter une même quantité d’eau distillée, tiède de préférence; nouveau contact de trois minutes.
Verser le colorant et faire agir la solution de bleu de Hollande pendant trente minutes.
Laver, sécher au papier buvard.
Ou bien, après fixation par l’alcool-éther durant dix minutes :
Verser sur la lame quinze à vingt gouttes d'une solution alcoolique dans 10 centimètres cubes d’eau distillée effectuée au moment de l'usage.
Laisser agir pendant vingt à trente minutes (sous couvercle de boîte de Petri).
Laver à l'eau distillée, sécher comme précédemment.
Procédé de Goubault. — Emploi de l’éosinate de bleu de méthylène transformé par le borate de soude et le bleu de méthylène pur; ce colorant a reçu de l’auteur le nom de pancolore.
Colorer sans fixation préalaïle à l’aide de douze à quinze gouttes de colorant; laisser agir pendant cinq minutes; ajouter douze à quinze gouttes d’eau distillée à 370. Faire agir pendant vingt-cinq minutes. Laver et sécher.
Ce procédé donne de bonnes colorations.
Procédé de Tribondeau. — Ce colorant est du biéosinate (éosinate simple de bleu de méthylène et éosinate de bleu Borrel en solution dans l'alcool éthylique absolu additionné de 10 p. 100 de glycérine).
Pas de fixation préalable.
Verser sur le frottis environ douze gouttes de ce colorant qu'on trouve tout préparé dans le commerce. Laisser agir trois minutes sous le couvercle d’une boîte de Petri. Ajouter douze gouttes d’eau distillée et mélanger avec le colorant. Laisser en contact huit à douze minutes. Laver, sécher.
Procédé au panchrome Laveran. — Solution alcoolique d’éosinate de bleu Borrel à l’oxyde d'argent (Legroux), qui s'emploie sans fivation préalable, comme précédemment.
PLASMODIUM VIVAX. 969
Etendre sur le frottis le panchrome pur ; couvrir la lame; laisser agir pendant trois minutes (fixation); renverser la lame, face à colorer en dessous, dans une boîte de Laveran ou de Petri contenant la quantité d’eau distillée correspondant à la quantité de panchrome. Agiter pour mélanger.
Laisser en contact pendant quinze à trente minutes suivant les éléments à colorer.
Laver, sécher au papier buvard.
Tous les procédés de coloration composée sont donc à base de bleu et d’éosine, chacune de ces substances ayant une affinité tinctoriale différente :
Le cytoplasma se colore en bleu plus ou moins vif, selon qu'il s’agit de schizontes ou de gamètes ; le noyau, qui retient électivement l’éosine, se teinte en rouge vif; la vésicule nucléaire en rose pâle ; la vésicule nutritive reste incolore.
