II. Examen dea cultures liquides avec coloration

a. Technique ijénérale. — Pren(îz une lamelle, essuyez-la; versez sur une des faces une goutteli'tl,i; lie la culture recueillie dans une pipette Pasteur; étalez cette gouttelette sur la lamelle avec l'extrémité de la pipette promenée à plat sur la surface de celle-ci; séjcliez la lamelle (ca I ('l'action i en la plaçant, la lace enduite l(juruée en haut, sur

Pn. I)K MICHOIIIF.. 0

une platine chauffante (V. fig. 40) ; lorsqu'elle est sèche on la passe deux ou trois fofs dans la flamme ; puis on la dépose, la /'ace enduile en dessous, dans la solution colorante choisie. Lorsqu'on juge la coloration suffisante, on retire la lamelle en la saisissant avec une pince, on la lave dans un cristallisoir contenant de l'eau distillée, pour enlever l'excès de couleur. Avec un linge fin on essuie la face non enduite, et on sèche sur la platine

Fig. 40. — Platine chaulTmile.

chauffante. Lorsque la lamelle est sèche, on éclaircit la préparation en versant sur la face colorée une goutte d'essence de girofle, de bergamotte ou d'huile de cèdre ; on enlève l'essence avec le xylol. On verse alors une goutte de baume sur la face colorée de la lamelle, qu'on dépose aussitôt sur une lame : le baume s'étale, et la préparation montée est prête pour l'examen.

L'examen se fait ici avec des grossissements variables, mais toujours avec l'éclairage Abbé et le miroir plan .

Quel que soit le procédé de coloration employé, le mode de montage do la lamelle est le même : aussi ne reviendrons-nous plus sur ce sujet dans la suite.

b. Technique spéciale. — Nous allons maintenant

pasrici' en revue les divers procédés de coloration des lamelles.

1. Coloration des lamelles dans les solutions hydroalcooliques. — Placez la lamelle, la l'ace enduite en bas, sur la surface de la solution; laissez-la cinc] minutes dans les solutions rouges ou violettes, un

■ quart d'heure dans la solution bleue.

Les solutions rouges et violettes colorent d'une façon intense, niais grossissent les éléments. La solution bleue colore plus légèrement, mais donne des préparations d'une finesse extrême.

2. Coloration des lamelles par la méthode de Lôffler. — Placez la lamelle, la face enduite en bas, sur la surface de la solution bleue de Lôffler, préalablement filtrée et contenue dans un verre de montre, et laissez pendant cinq minutes au moins, une demi-heure au plus.

Décolorez rapidement dans de l'eau acidulée [)ar l'acide acétique (une ou deux gouttes d'acide pour le contenu d'un verre de montre).

Lavez avec soin pour enlever toute trace d'acide, séchez, montez.

Les microbes sont colorés en bleu foncé, le reste de la préparation en bleu paie.

3. Coloration des lamelles pur la méthode de Malassez 'i Vlgnal. — Placez la lamelle, lu face enduite en bas, sur la surface d'une solution fraîche et filtrée de bleu Malassez. Laissez colorer pendant cinq minutes au moins, une demi-heure au plus.

Décolorez rapidement dans la solution suivante :

SriUilKiii af|ueiise de carbonate de soude à 2 p. 100. '2 ce. Alcool aljsolii i —

Liiv(:z, séchez, montez.

I-cs microbes seront colorés en bleu foncé, le reslf lie la yiréparalion en bleu paie.