MÉTHODE DE COLORATION DES SPORES

de les colorer. On sèche la lame, et on la chauffe longtemps (15 minutes à 1 heure à -f- 180°, ou dix fois sur la flamme) ; les spores se colorent vivement (violet phéniqué ; 15 à 30 minutes), les bacilles restent presque incolores. La membrane de la spore a été modifiée par le chauffage. Mais on ne peut ainsi colorer que les spores seules.

Pour avoir une double coloration, on peut opérer ainsi. Faire passer dix fois la lame sur la flamme. Laisser pendant une heure dans la solution chaude de fuchsine anilinée à’Ehrlich. Laver. Décolorer dans la solution :

Alcool 75

Acide chlorhydrique 25

Recolorer dans une solution aqueuse saturée de bleu de méthylène. Laver, sécher, etc. Les spores sont rouges et les bacilles bleus.

b. La méthode de Frænkel est une modification de la précédente. La décoloration et la recoloration se font par un séjour de une à deux minutes dans une solution unique, dite solution de Frænkel.

Acide nitrique pur 20 cent, cubes.

Eau distillée 30 —

Alcool à 90° 50 —

Bleu de méthylène saturé 66 —

c. Méthode de Neisser. — Contact de dix minutes à -{- 100° dans la solution fuchsinée de Ziehl (p. 261). Lavage à l’eau. Lavage à l’alcool absolu jusqu’à ce que le liquide n’entraîne plus de fuchsine. Séjour d’une minute dans une) solution aqueuse de bleu de méthylène .

d. Méthode de Mœller (la meilleure pour beaucoup d’auteurs) . — Séjour de deux minutes dans l’alcool absolu, puis de trois minutes dans l’acide chromique à 5 p. 100, puis d’une minute dans le Ziehl à chaud. Laver. Séjour de dix secondes dans l’acide sulfurique à 5 p. 100, et d’une minute dans la [solution aqueuse de bleu.

On peut ensuite obtenir une triple coloration en colorant le fond de la préparation.

Fig. 135.

Bacillus anthracis. Culture en bouillon avec spores. Coloration par la méthode de Ziehl. Les spores sont rouges. Gr. = 1 000 D.

culeux. La spore est d‘un beau rouge se détachant sur le mycélium bleu (fig. 135).

Salomonsen fait justement observer que les différentes spores ont de grandes différences d’aptitude à prendre les matières colorantes.

Nous conseillons, comme la meilleure des méthodes , celle de Ziehl telle qu’elle sera décrite (p. 261) à propos du bacille tuber-

E. Coloration des cils. — Les espèces mobiles (voir p. 239) possèdent des cils ou flagella 1 qui sont des prolongements

1 Les cils ont une situation variable par rapport aux corps bacil*. laires. Ils sont toujours plus longs que le microbe. Ils sont ondulés,' quelquefois enroulés les uns autour des autres (Sackahoff). Certaines espèces n’ont qu’un ou deux cils vfbratiles ; la plupart sont multi-