Mittheil. Zool. Stat. Xeapel, X, p

M. Langeron. — Précis de Microscopie. %^

socier, en un mot pour tous les travaux d'anatomie microscopique proprement dite.

Les meilleurs liquides pour les colorations en masse sont le carmin au borax alcoolique de Grenadier et le carmin clilorhydrique alcoolique : le premier est alcalin et, ])ar suite, peut nuire aux objets délicats; le second est acide et donne des colorations moins électives, mais il est encore plus pénétrant : il ne peut convenir pour les objets contenant du carbonate de calcium. Le carmin aluné est moins pénétrant, mais donne une coloration nucléaire très pure, sans jamais surcolorer : c'est en outre un colorant électif de la cellulose, très employé en histologie végétale. Enfin, le picro-carmin est encore un des meilleurs réactifs qu'on connaisse pour les tissus frais.

Carmin au borax alcoolique de Grenacher \

Solution aqueuse de borax à 4 p. 100. . . . 100 cm3. Carmin n" 40 2 à 3 gr.

Faire bouillir doucement pendant trente minutes, puis ajouter un égal volume d'alcool à 70, laisser reposer vingt-quatre beures et filtrer.

Les objets à colorer y restent un temps variable (quelques heures à quelques jours), suivant leur volume. On les transporte ensuite, sans les laver, dans de l'alcool à 70, acidulé par l'acide chlorhydrique (4 à 6 gouttes pour 100 ce). On les y laisse jusqu'à ce qu'ils ne laissent plus échapper de nuages de matière colorante et qu'ils aient pris une belle couleur rouge clair, ce qui indique que la différenciation nucléaire est complète. On passe ensuite par les alcools pour inclure.

Pour les objets très difficiles à pénétrer et bien fixés, on peut colorer à l'éluve, en tubes bien bouchés. La coloration ne réussit pas après les fixateurs osmiés; les bichromates et l'acide chromique ne gênent pas, pourvu que le lavage ait été bien fait.

Ce liquide ne convient pas pour les coupes collées à la paraffine, mais seulement pour les coupes non collées et les objets entiers.

i. Le paracarmin et le carmalun de Paul Mayor sont des formules plus rationnelles, mais, pratiquement, elles ne présentent pas de supériorité évidente sur les vieilles formules de Grenacher, datant de 1819. Aussi, pour ne pas dérouter le débutant, jo les passe sous silence.

Carmin chlorhydrique alcoolique.

(Formule de Mayer modifiée par Schuberg-.)

Eau 15 cm''.

Acide chlorhydrique. ... 1,5 cm'^ ou XXX irouttes.

Carmin 4 gr.

Faire bouillir jusqu'à dissolution du carmin et ajouter : Alcool à 85° 95 cm».

Ce liquide est excellent pour les objets difficiles à pénétrer (Vers, Artliropodes) ; il colore très rapidement à cause de sa grande richesse en carmin. 11 est donc plus puissant que le carmin boracique et altère moins les tissus, pourvu que ceux-ci ne renferment pas de parties calcaires. Si la coloration est trop intense et un peu diffuse, différencier dans de Talcool chlorhydrique (alcool à 80 à 0,5 p. 100 d'HGl). Il est toujours bon de faire au moins un premier lavage rapide dans cet alcool acide, pour éliminer l'excès de colorant et éviter sa précipitation par Talcool à 90. Cette coloration se conserve très bien dans le baume.

Carmin aluné de Grenacher.

Eau 100 cm3.

Alun de potasse ^ »'''•

Carmin 1 o^»

Faire bouillir quinze à vingt minutes à petit feu, laisser refroidir, puis filtrer et ajouter un cristal de thymol, pour éviter le développement des Moisissures.

Il ne faut colorer dans ce liquide que des objets bien lavés à Teau et ne renfermant pas trace d'alcool. Laver à Teau après coloration. C'est un colorant très électif des novaux et de la cellulose, mais il pénètre mal et ne convient que pour des objets peu épais : il ne peut servir pour les coupes collées à l'albumine. ,

Picrocarmin de Ranvier. — Cet excellent réactif est tombé en désuétude parce qu'il est difficile à préparer et parce qu'il ne répond plus aux" tendances actuelles. En effet, il ne peut servir pour les coupes collées à l'albumine; d'autre part, on ne colore presque plus d'objets à l'état frais et on ne fait guère de dissociations, comme au temps où Ranvier écrivait son Traité technique dliistologie. 11 suffit de lire cet admirable ouvrage, pour voir combien la technique s'est transformée en un petit nombre d'années. La méthode des coupes a acquis une perfection telle, qu'elle peut être appliquée même par les débutants et, dans

cette méthode, le picroenrmin ne joue aucun rôle, car on dispose, pour colorer les coupes, de colorants bien plus sûrs et plus électifs. En outre, comme nous l'avons dit plus haut, on tend de plus en plus à délaisser Tanatomie microscopique pour la cytologie. Néanmoins des savants tels que Mann recommandent encore l'emploi du picrocarmin pour les tissus frais. 11 est préférable d'acheter ce réactif tout préparé, sous la forme li(iuide ou solide.

■' ..^arm.jn acétique de Schneider. — Dissoudre du carmin à saturation dans (tc^râcide acétique à 45 p. 100, porté à l'ébuliition. Filtrer. Je ne donne cette formule que parce qu'elle a été souvent conseillée pour tuer et colorer les Protozoaires entre lame et lamelle. Son action est analogue à celle du vert de méthyle acétique (p. 383), mais certainement moins précise.