Défibriner eu agitant avec des billes de verre

3. Hémolyser par addition de 8 à 10 volumes d'eau distillée stérilisée ;

4. Préparer une série de tubes stérilisés, renfermant deux volumes de solution de chlorure de sodium à 1,2 p. 100. Chauffer ces tubes à 56° et y ajouter un volume de sang hémolyse. Le chauffage détruit le complément.

Avec o cm^ de sang, on peut l'aire une douzaine de tubes renfermant chacun 5 cm^ de milieu liquide.

Ce milieu est très économique, facile à préparer et permet de conserver longtemps des cultures vivantes, sans risque de dessiccation. On peut le préparer avec un sang quelconque ou même du sang humain.

Les récents travaux de M. Robertson ' paraissent devoir jeter un jour tout nouveau sur le déterminisme de ces cultures. Elle a vu des Trypanosomes de Poissons entrer en division active lorsqu'on dilue le sangavec son volume d'eau ordinaire ou distillée : ces divisions sont identiques à celles qu'on observe dans l'estomac des Sangsues ou dans les cultures. L'auteur explique ce phénomène par l'abaissement de la pression osmotique du milieu et l'absorption d'eau par les Trypanosomes; elle établit un rapprochement très suggestif avec les expériences de Loeb sur la parthénogenèse expérimentale. Peut-être des actions physicochimiques remplacent-elles normalement la fécondation chez les Flagellés, coifime elles peuvent la remplacer expérimentalement pour les leufs d'Oursins.

Quoi qu'il en soit, ces faits concordent avec les observations de Brumpt 2 ((ui, plusieurs fois, a vu des cultures à demi desséchées reprendre une nouvelle activité, par addition de solution physiologique qui venait diminuer la concentration du liquide.

Trypanosomes normaux des Bovidés. — On les recherche par le procédé de Delanoë ^ Prélever le sang aseptiquement à la jugulaire, délibriner, ensemencer 2 heures après dans du bouillon ordinaire (3 cm^ de sang pour 10 cm'^ de bouillon). On peut repiquer sur milieu Nicolle.

1. Mai'iel Roberison, Transmission of Flagellâtes living in the blood of certain freshwater Fishes. Phii. Trans. Ro'j. Soc. Londoii, CCII, p. 45, 1911.