I. — LIQUIDES D'EXAMEN

Il y a deux catégories de liquides pour l'examen à l'état frais : les uns servent à examiner les organismes à l'état vivant, les autres sont destinés à rendre ces organismes plus visibles, grâce à leur réfringence, mais sans respecter leur vitalité.

1" Liquides physiologiques. — Nous désignons ainsi les liquides, naturels ou artificiels, qui conservent les organismes vivants et dans des conditions aussi rapprochées que possible de l'état naturel. On les nomme encore liquides indifférents, parce qu'ils n'exercent pour ainsi dire aucune action modificatrice sur les éléments figurés. Le plus facile à obtenir et à conserver est la solution de chlorure de sodium à 9 p. I 000, dite solution physiologique"^.

1. Bresslau, Uelicr die Sichtbarkeit der t'eiitrosomen iu lebeiiden Zellen. Ein Hinweis auf Mesostoma Ehrenberf/i als Ohjekt zu cj^tologischen Untersuchungen. Zool. Anz., XXXV, p. 141-145, 1900.

2. La véritable solution isotonique pour l'IIonimc et les autres Mammifères doit renfermer 0 gr. 9 p. 100 de chlorure de sodium. Cf. Engelmann, Einiges ûber die sogenannto physiologische Kochsalzlôsung. llcnlsche med. Woch., XXIV, p. 64-65, 19Û3.

Elle suffit la plupart du temps ; mais, pour des recherches très délicates, il est préférable d'employer les milieux naturels où vivent les cellules. Ces milieux naturels sont le sérum sanguin, olilenu par coagulation ou centrifugation, le liquide d'ascilc, le liquide amnioliciue, l'humeur aqueuse. Les meilleurs résultats seront obtenus avec un liquide provenant de ranimai sur le({uel les éléments à examiner ont été prélevés.

Pour avoir du liquide amniotique, il faut se procurer un utérus gravide, à l'abattoir ou chez le boucher. Le mieux est de le ponctionner avec un trocart. S'il faut inciser, on aura soin de bien laver la paroi utérine avant d'ouvrir les membranes, de manière à éviter le mélange avec le sang-.

Vhuineur aqueuse, sera extraite d'yeux de Lapin ou de Bœuf.

A défaut de ces liquides naturels, on pourra encore employer le sérum de Frey, ainsi composé.

Eau distillée 135 cm^

Blanc d'œuf 15 gr.

Chlorure de sodium 0,20 gr.

Pour les Invertébrés on prendra du liquide de la cavité générale et, pour les animaux marins, simplement de l'eau de mer.

2° Liquides additionnels. — Ces liquides produisent généralement la mort des organismes qu'on y plonge, mais ils peuvent rendre de grands services, en rendant visibles certaines parties des objets non colorés. Leur emploi constitue un procédé intermédiaire entre Texamen à l'état frais proprement dit et l'examen après fixation; il consiste à traiter extemporanément les objets par un liquide qui modifie leurs propriétés optiques et les rend plus apparents.

Ces liquides sont des solutions alcalines, acides, ou des liquides réfringents et éclaircissants miscibles avec l'eau. Comme exemples, je citerai la solution de potasse qui détruit la plupart des éléments anatomiques et permet de reconnaître les fibres élastiques, les Champignons (p. 714), etc., Facide acétique qui éclaircit les cellules et met le noyau en évidence ; les milieux de Amann (p. 575) qui fixent, gonflent, éclaircissent et font très bien ressortir certaines structures. L'emploi de ces réactifs se fait extemporanément : il suffit généralement d'en déposer une goutte sur une lame, d'y plonger l'objet et de recouvrir d'une lamelle; on chauffe légèrement s'il y a lieu, puis on examine immédiatement.

Nous pouvons mentionner ici l'emploi de Vencre de Chine que nous étudierons plus à fond en parlant des préparations sèches (p. 7U0). On

M. I^iANGERON. — Précis de Microscopie, 16

choisira de Tencre dty Chine liquide très fine, de préférence celle qui est vendue spécialement pour ce genre d'examens. Les éléments ligures ([ui y sont plongés api)araissent comme des taches claires sur le fond noir de l'encre et leurs contours sont particulièrement nets. C'est un bon moyen de rendre jtlus visibles des organismes incolores et très peu réfringents, qui seraient invisibles ou très diffu:ilcs à apercevoir sur les milieux ordinaires. L'cuicre de Chine n'étant pas une teinture, mais une suspension de particules charbonneuses très fines, ne pénètre pas dans les objets. On emploiera l'encre diluée comme il est dit page 700 : on mélange à cette encre une goutte du liquide renfermant les éléments à étudier et on recouvre d'une lamelle.