CHAMBRE HUMIDE

des parties fraîches, excepté quand on saura d'avance quelle est son action sur elles, comme s'il s'agissait par exemple d'examiner les cellules superficielles d'un animal aquatique. Mais ceci est l'exception. On remplacera l'eau, suivant l'occasion, par le sérum du sang, l'humeur vitrée, le blanc d'œuf étendu d'eau, ou enfin tout simplement par de feau à laquelle on aura ajouté un demi pour 100 environ de sel de cuisine.

Le mieux est de recourir à fiodsérum de Max Schultze. Voici comment on le prépare. On prend du liquide amniotique de femme ou de brebis; ce dernier est facile h se procurer dans les abattoirs. Dans dix grammes de ce liquide amniotique on verse un gramme environ de solution alcoolique d'iode. On obtient ainsi du sérum sur-iodé. On ajoute alors un gramme environ de ce sérum sur-iodé à cent grammes de liquide amniotique pur. C'est ce qu'on appelle Viodsérum. Il est d'abord jaunâtre, mais avec le temps l'iode disparaît peu à peu. Le liquide pâlit et finirait par se putréfier si l'on n'avait le soin d'ajouter alors une nouvelle quantité de sérum suriodé.

L'iodsérura n'est pas seulement employé comme véhicule pour l'examen' des éléments anatomiques, on s'en sert également pour y faire macérer certains tissus qui s'y désagrègent après cpelque temps en leurs éléments constitutifs. L'iodsérum est donc aussi un dissociant.

§ 38. — Chambre humilie.

Pour suivre pendant un certain temps des éléments anatomiques vivants sous le microscope, quand ceux-ci appartiennent à des animaux à sang froid, comme par exemple les éléments sarcodiques du sang de la grenouille et surtout du triton, on se sert d'un petit appareil connu sous le nom de chambre humide. Nous dé-

FlG. 3. — Cliumbro IminUIc do BoUcIici'.

crivons et nous figurons ci-contre (fig. 3) celle de Bottcher (voy. Ueber die molekiUar Beivegunr/in Uiierinchen Zellen, dans Virclww'sArch., '18Gf)). Elle se compose d'une lame ordinaire, au milieu de laquelle un

anneau de vei re est fixé avec du baume de Canada. A la lace interne de cet anneau on dispose une bande de papier buvard qu'on humecte légèrement. Puis la goutte de sang ou de lymphe (qui doit offrir le moins d'épaisseur possible) est déposée à la partie inférieure d'une huïielle, dont on recouvre cet anneau de verre, après avoir préalablement interposé une couche de paraffine ou de graisse. On devi-a éviter les substances en solution dans des essences ou dans l'alcool, parce que le dissolvant en s'évaporant à l'intérieur de la chamljre agirait peut-être sur les éléments en observation (1). On peut à l'aidii de ce procédé conserver des éléments anatomiques vivants pendant plusieurs jours, à condition qu'ils appartiennent à des animaux à sang Iroid. Pour les éléments des animaux à sang chaud il faut un appareil plus complique dont on a proposé un grand nombre de modèles; c'est une chambre humide maintenue à la température constante de l'animal à sang chaud.

§ 39. — Itissociants, durcissants. Coupes.

On peut se proposer quand on étudie un tissu deux choses différentes: connaître les éléments dont il est composé, c'est-à-dire sa. structure : ou connaître la manière dont ces éléments sont agencés, c'est-à-dire sa texture. Dans le premier cas le but à atteindre est d'isoler les uns des autres les éléments réunis pour former le tissu; dans le second, de durcir convenablement ce dernier, afin de pouvoir pratiquer des coupes qui laissent voir les différents éléments en place, dans leurs rapports mutuels. Deux groupes de liquides dans lesquels on laisse macérer les pièces correspondent à ce double but : les Dissociants et les Durcismnts.

Les dissociants sont des liquides dans lesquels on plonge les fragments du tissu que l'on veut étudier pendant un certain temps afin d'en séparer plus tard les éléments. Le dissociant par excellence est îa Liqueur de Millier, composée de :

Eau 100 grammes.

Bichromate de potasse ^2 —

Sulfate de soude I —

On peut augmenter ou diminuer la proportion de sulfate de soude ou de bichromate selon que l'on veut obtenir un degré plus grand

(1) On vend également des chambres luimidcsun peu plus compliquées, avec un socle au milieu, en sorte qiin le liquide ;\ examiner se trouve comprimé entre celui-ci et le verre inince, ce qui peut être avantageux pour certaines observations.

DISSOCIANTS, DURCISSANTS. COUPES. T)?

OU moindre de résistance des cléments. Plus les IVagnicnts de tissu ont séjourné longtemps dans cette liqueur, plus ils se laissent dissocier larilemcnt : ce sont d'abord les cellules épitliéliales, et plus tard les éléments du tissu lamineux. .

Il y a un grand nombre d'autres dissociants que l'usage apprendra à connaître et que nous signalerons chemin faisant ; ils ont chacun leurs avantages déterminés et devront être employés de préférence dans des cas différents.

L'alcool, les acides chromique, azotique, chlorhydrique, selon qu'on les emploie de telle ou telle manière, peuvent être des durcis- <ants ou des dissociants.

Parmi les durcissants il faut citer surtout l'alcool, les acides chromique, picrique, les bichromates, principalement celui d'ammoniaque. L'acide chromique s'emploie à un demi pour 100 environ ; les bichromates à 3 ou pour 100.

On devra toujours avoir soin de renouveler les liqueurs des macérations. C'est un principe général. Il sera toujours avantageux, quand cela est possible, de suspendre la pièce que l'on se propose de laisser macérer, dans les parties supérieures du liquide, de même qu'il faudra toujours mettre une grande proportion de liquide relativement au volume de la pièce.

Les coupes se pratiquent sur les pièces durcies, soit à main levée, exercice dans lequel on arrive rapidement à avoir une grande habileté ; soit au moyen de microtomes (microtomes de Nachet, de Follin et Ranvier, etc.) Le microtome est indispensable quand on veut obtenir un grand nombre de coupes bien régulières et bien égales, ou quand •on se propose de poursuivre sur une certaine étendue un organe quel- " €onque. On éprouve très-souvent, surtout dans l'étude embryogénique des premiers temps de la vie, le besoin de pratiquer sur un ■embryon unique une série non interrompue de coupes.

Quel que soit le procédé employé pour pratiquer les coupes, on doit toujours avoir soin de mouiller dans l'alcool la lame du rasoir. Les coupes doivent être faites en quelque sorte sous l'alcool. Pour les enlever de dessus la lame, il suffit de tremper celle-ci dr .s l'eau, on l'essuie en la passant sur un linge, on la trempe de nouveau dans l'alcool et on pratique immédiatement une nouvelle coupe. La main qui tient la pièce, si on fait les coupes à main levée, ou qui tient le microtome, ne doit pas cesser de les tenir dans la môme situation : ceci est indispensable pour avoir des coupes toutes régulières et toutes bien <!'gales en épaisseur.

TECHNIQUK.

On appelle encollage un procédé qui consiste à diffuser dans un tissu mou une substance liquide susceptible d'être ensuite coagulée, afin d'augmenter ainsi la dureté du tissu et de le rendi-e propre à êti-ccoupé par les moyens ordinaires.

L'encollage par excellence est celui qu'on fait avec la gomme arabique. Les pièces sont plongées pendant vingt-quatre ou quarantehuit heures dans une solution sirupeuse de gomme ; puis on les porte dans de l'alcool à 36 degrés. Au bout d'un jour, elles sont en général suffisamment dures, toutefois le temps varie avec le volume de la pièce, et si celle-ci est très-mince, quelques heures doivent suffire. Les coupes sont mises dans l'eau, comme nous l'avons indiqué au paragraphe précédent. La gomme se dissout, et l'on peut ensuite monter les coupes après coloration. Si l'on veut entièrement se débarrasser de la gomme dont une partie, quoique hydratée, continue d'imprégner le tissu, il est bon de soumettre les coupes à un courant d'eau continu pendant quelques heures et même plus. Toutefois cette méthode n'est guère applicable qu'aux tissus résistants par eux-mêmes et dont les éléments ne se peuvent désagréger.

Le procédé par la gomme et l'alcool donne surtout d'excellents résultats après le durcissement par l'alcool et l'acide picrique. Il a l'avantage de n'exiger qu'un temps relativement court, et de trouver ainsi une application directe à l'examen des différentes tumeurs. La succession des opérations est la suivante (Ranvier) : on plonge la pièce pendant un jour dans l'alcool à trente-six degrés, puis le môme temps dans une solution saturée d'acide picrique ; ensuite on durcit par la gomme et l'alcool et on coupe à la manière ordinaire.

Un mode de durcissement moins expéditif, mais infinement préférable (l'alcool altérant toujours un certain nombre d'éléments) est la macération prolongée dans la liqueui- de Millier. Ce procédé s'apphque surtout aux tissus mous et friables tels que la rétine, les muqueuses et surtout les embryons. Il convient pour cela de laisse)' macérer les pièces dans la liqueur de Millier pendant quelques mois e! même des années. Au bout de ce temps les éléments anatomiques sont suffisamment fixés pour que l'encollage n'en modilie presque point l'aspect.

On a également employé la colle forte, la gélatine, etc. Ou y plonge l'objet, alors que ces substances sont encore chaudes, après quoi on laisse refroidii' le tout. On pratique ensuite les coupes. Ou