RÉACTIFS USUELS

Acide picrique.— L'acide picrique s'emploie comme durcissant el comme colorant. 11 agit à peu près comme l'acide chromiquc sur les tissus appartenant au groupe des tissus conjonctils. Il les durcit et les décalcitie, en môme temps qu'il les colore Ibrtement en jaune. Sa propriété colorante apparaît surtout quand il est combiné au carmin dans le picro-carminatc d'ammoniaque. Si le mélange a été bien lait on voit l'acide picrique se précipiter sur certains éléments et les teindre en jaune, alors que le carmin en colore d'autres en rouge. On aura un excellent exemple de cela sur le libro-cartilage de l'épigiotte du bœuf.

Acide osmique. — L'acide osmique est aujourd'hui d'un usage considérable en histologie où il rend les plus importants services. Il est à la fois colorant de certaines substances et à un point de vue plus général durcissant. Il colore en violet puis en noir les corps gras et la myéline des nerfs. On l'emploie le plus souvent dans ce but à 1 ou 2 pour 100. Concentré et même saturé, il sert à fixer instantanément certaines membranes minces comme la rétine, la lame du limaçon, les feuillets du blastoderme, etc., de telle sorte qu'on peut sur l'heure pratiquer des coupes. A ce point de vue encore l'acide osmique rend les plus grands services dans l'étude des jeunes embryons dont il permet de durcir instantanément les tissus, en altérant moins la forme des éléments que tout autre réactif. On remarque seulement qu'après avoir été ainsi traités, les noyaux et les corps cellulaires se teignent un peu plus dillicilement par le carmin.

On peut combiner l'emploi de l'acide osmique avec celui de l'acide acétique ou de l'acide chlorhydrique ; il permet de suivre facilement les plus fines ramifications nerveuses qui se trouvent alors teintes en brun.

Acide chromique . —Vsicide chromique, selon le degré de la solution où il se trouve, peut être employé soit comme dissociant, soit comme durcissant. En solution à 1 pour 2500 à 5000, il permet la dissociation facile des éléments du tissu nerveux principalement. Mais on doit être prévenu que dans ce cas son action ne se prolonge pas. Il faut surprendre en quelque sorte la macération au moment propice, quand les éléments se séparent facilement les uns des autres et ont en même temps un degré de dureté suffisant. Cette remarque s'applique au reste à un grand nombre de réactifs dont il faut ainsi surveiller l'action à des espaces de temps parfois très-rapprochés : quand on fait bouillir, par exemple, un tissu comme celui des ongles dans un liquide tel que

la soude, qui en dissocie d'abord les élénienls cl presque aussitôt les gonfle et les détruit.

L'acide chromique comme durcissant s'emploie à i ou 1 i/^ à 3 pour 1000 parties d'eau. Il est inutile pour ces sortes de macérations d'employer de l'eau distillée. Il sera seulement nécessaire de renouveler fréquemment le liquide, surtout s'il est peu abondant par rapport au volume du fragment mis à macérci-. On devra placer celui-ci au moins pendant les premiers jours dans un vase à fond plat ou bien le suspendre au moyen d'un lil dans le haut du bocal. La solution chromique sera employée de préférence quand les parties à durcir contiendi-ont des sels terreux ; elles sei'ont décalcifiées et les coupes se feront sans difficulté.

Bichromates de potasse et d'ammoniaque. — Quand les substances à durcir ne contiennent point de chaux, quand ce sont des parenchymes, il y a avantage à substituer le bichromate de potasse ou d'ammoniaque à l'acide chromique. Ces sels s'emploient à 3 ou 4 pour 100 dans l'eau ordinaire.

Liqueur de Millier. — La liqueur de Mûller est le dissociant par excellence. La composition de ce mélange est due à Henri Millier. Nous l'avons indiqué, ce liquide sert à durcir les cellules épithéliales en même temps qu'il les isole les unes des autres; il les gonfle toutefois très-légèrement, mais sans les déformer d'une manière sensible. La liqueur de Miiller est également très-propice à l'étude de la rétine. On en peut dire autant des tout jeunes embryons qui s'y conservent parfaitement. A la longue ils deviennent bruns, mais ceci ne nuit en rien à la netteté et à la transparence des coupes ; ils acquièrent après six mois, un an et plus de séjour dans la liqueur de Miiller, une certaine dureté qui permet de les trancher facilement. Au bout de ce temps les cellules du tissu conjonctif s'isolent presque aussi aisément que les cellules épithéliales. Elles ont de plus l'avantage d'être assez fortement teintes en jaune ce qui permet jusqu'à un certain point de ne pas les soumettre à une nouvelle réaction pour les colorer.

Potasse et soude. — La potasse et la soude sont em])loyées pour gonfler, détruire, éclaircir les tissus. Elles gonflent les tissus durs, comme les cheveux, les ongles, les épidémies, et permettent de reconnaître, quoique altérés, les éléments qui entrent dans la constitution de ces parties. On peut également détruire avec ces réactifs certains éléments anatomiques, alors que d'autres sont respectés. C'est le cas

RÉACTIFS USUELS. (jf

pour les fibres élastiques qui résistentaux bases, même chaudes, pourvu qu'elles nesoient pas trop couceuti'ées. La recherche, au moyen de la polasse,de certains champignons parasites {TrichopMjlon tonsurans,Achorion, elc.) repose sur une réaction analogue. Les cellules épithéliales, qui constituent les cheveux dans ce cas, sont éclaircies et laissent voir facilement par transparence les amas de spores.

La soude éclaircit instantanément les préparations faites au moyen de l'acide chromique, mais elle compromet la durée de la préparation qui reste altérée. La soude ne devra en conséquence être employée que sur des pièces sacrifiées d'avance.

Azotate d'argent. — L'azotate d'argent est un réactif extrêmement précieux, quoique d'un maniement difficile : il possède la propriété de se réduire au niveau des insterstices de certains éléments. On l'emploie dans ce but à la dose de 1 à 4 pour 1000. Nous reviendrons sur ce sujet en parlant de l'épithélium des séreuses. Le nitrate d'argent a de plus sur les cellules nerveuses et leurs prolongements une action très-singulière dont nous aurons aussi à reparler.

Chlorure d'or. — On peut appliquer au chlorure d'or la même remarque qu'au nitrate d'argent ; c'est un réactif précieux, mais dont l'emploi offre certaines difficultés. On en fait usage ordinairement à la dose de l pour 100. Le chlorure d'or agit en général, comme le carmin; il colore d'autant plus activement les éléments anatomiques que la vie de ceux-ci était plus intense. Les parties sur lesquelles on fait agir le chlorure d'or doivent toujours être préalablement acidifiées. Nous entrerons dans quelques détails sur la manière de l'employer, spécialement en traitant du tissu cornéen ; il est aussi d'un emploi profitable dans l'étude de la substance nerveuse.

Teinture d'iode. — La teinture d'iode sert comme colorant, et rend dans certains cas d'importants services en faisant ressortir parfois les noyaux de certaines cellules qui resteraient sans cela à peine visibles. On l'emploie également pour bien mettre en lumière les cellules du cartilage frais au milieu de la substance amorphe où elles sont plongées. La réaction bleue avec'l'amidon, utilisée surtout en histologie végétale, peut cependant servir à déceler au sein d'un tissu et même d'un élément anatomique la présence de graiqs de fécule ou d'amidon introduits accidentellement ou artificiellement dans l'économie. L'iode est également un réactif de la matière glycogèpie qu'il colore en jaune brunâtre.

TKCHNIQUE.

Ilèinaloxyline. — l.'liéinatoxylinc est un réactif colorant. On l'extrait du bois de Cannpêche. Pour l'usage, on en fait une solution concentrée dans l'alcool ; on mélange 1 gramme de cette solution à '100 grammes de la solution suivante :

Alun, \ gramme; eau, 800 grammes. (Lœwe.)

On obtient de la sorte un liquide violet dans lequel il suffit de plonger pendant quelques minutes une membrane pour que les noyaux soient colorés en beau violet. Nous indiquerons à leur place quelques-unes des réactions importantes de l'hématoxyline.

Fuchsine. — La fuchsine jouit d'un pouvoir colorant considérable, ainsi que du reste tous les sels d'aniline dont elle est un des dérivés. On l'emploie en solution alcoolique. Elle colore en rouge vif les noyaux, et de même les spermatozoïdes, les leucocytes, etc. Elle est surtout d'une application utile pour l'étude du système nerveux. Dans les nerfs, le cylindre-axe est la partie qui se colore avec le plus de facilité ; seulement la nuance qu'il offre alors n'est pas rouge, elle est lie de vin (Onimus).

Sels d'aniline. — Nous ne pouvons signaler ici tous les sels d'aniline employés en histologie. Nous aurons occasion plus loin, à propos des différents éléments des tissus, de revenir sur l'action de ces Sels, en particulier à propos de la rétine, de l'ovaire, etc. Toutes ces matières sont des colorants énergiques.

Le Tougz d'aniline s'emploie surtout pour l'étude de certains organismes inférieurs (vibrions, bactéries, etc.), qu'il permet de distinguer plus aisément, en leur donnant une couleur tranchée.

Purpurine. — La purpurine est un extrait de garance dont l'usage a été préconisé par Ranvier. On la prépare de la façon .suivante : on porte à ébullition une solution d'alun à 1 pour 200, et on y ajoute une petite quantité de purpurine ; au bout de quelques minutes la dissolution s'est opérée ; on fdtre et on ajoute un quart du volume total d'alcool. Le liquide ainsi obtenu est dichroïque et d'une belle couleur orangée, mais il ne se conserve pas indéfiniment. Au bout de un à deux Tnois il a perdu une grande partie de son pouvoir colorant : il faut donc toujours employer une solution fraîche. La purpurine a comme colorant certains avantages qu'on peut résumer ainsi : elle se fixe sur les noyaux et à peine sur les corps cellulaires ; elle colore les fibrescellules, ce qui permet de les distinguer facilement quand elles sont mêlées aux éléments du tissu conjonctif ; elle colore les cellules du

IIÉACTIFS USUlîLS.

cartilag-e sans altérer leur forme quand on met celui-ci en mince lame dans la solulion : elle fixe donc en même temps qu'elle colore ces éléments. Enfm elle ne colore pas les noyaux des cellules nerveuses.

Teinture de tournesol. — La teinture de tournesol peut être employée pour l'étude des nerfs périphériques à l'état frais. Au bout de un à deux jours d'imbibition, les noyaux de la gaine de Schwanji et du périnèvre sont colorés en bleu intense. Si l'on vient à faire agir ensuite une solution acide, les noyaux, de bleus qu'ils étaient, deviennent roses. •

CHAPJTRE ni

OVULE. — PREMIERS DÉVELOPPEMENTS. — FEUILLETS nu BLASTODERME. — CELLULES EMBRYONNAIRES

§ 47. — Ovule.

Nous reviendrons, en traitant de l'ovaire, sur l'apparition et le développement de l'ovule. Au début celui-ci est toujours un élément anatomique. Sur ce point il ne saurait y avoir contestation. Mais au moment où il est pondu soit intérieurement, soit extérieurement suivant les groupes d'animaux, il offre une complexité qui paraît incompatible avec cette désignation d'élément anatomique. La discussion sur ce sujet ne saurait d'ailleurs avoir qu'une importance purement théorique (i).

L'ovule des mammifères, entrevu ou plutôt deviné par Prévost et

Dumas, en 4825, fut découvert V deux ans plus tard, en 1827,

/■ .^^^fù^^^^^ ''\ P^ii' Ernst von Caër. L'ovule de

^ L^^^00{!l§iM^ l'homme (fig. 4) est un petit

corps dont le diamètre mesure . V.; " ' ' " ^ 100 à 200 p (Kôllikcr). Il est

limité extérieurement par une enveloppe appelée « membrane ^ vitellinc ». Celle-ci est hyaline,

transparente, élastique, homo- FiG. 4. - Ovule iiumain (400/1). - «, vcisicuin geimi- . nmnrnlio Elle uiesuro 0

native avec tache gerniinative; 6, vitclliis; c, membrane gt-ll^j dlllUipilL. LjUL lliebUlLi^

;\ 10 fi d'épaisseur sur l'ovule extrait d'une vésicule de Graaf à moitié développée.

(1) C'est le même abus de terminologie qui a fait désigner certains animaux infusoires, tels que les colpodes, paramécies, vorticcllcs, etc., comme des animaux unicelliilaires.