MÉTHODE POUR LA RECHERCHE DES POISONS

1. Nous indiquerons les diverses méthodes générales qui ont été proposées pour la séparation des alcaloïdes en faisant remarquer qu’un grand nombre de poisons organiques qui ne sontpas des alcaloïdes peuvent être isolés par les mêmes procédés. Il n’existe pas, du reste, de procédé général qui soit applicable à la séparation de tous les alcaloïdes, et les propriétés de chacun d’eux exigent souvent des modifications aux procédés généraux. Nous y reviendrons à propos de l’étude particulière des divers poisons.

2. Méthode de Stas .— La méthode la plus généralement employée est la méthode de Stas. Elle a été imaginée à propos d’un procès resté célèbre (affaire Bocarmé). Nous l’indiquerons d’abord telle quelle, avec les détails qui sont transcrits dans tous les livres classiques.

Elle repose : 1° Sur la solubilité dans Veau et l'alcool des sels acides formés par les alcaloïdes avec l'acide tartrique ou l'acide oxalique ; 2° sur la décomposition de ces sels acides en solution, par tes alcalis caustiques, par le bicarbonate de potasse ou de soude et la solubilité des alcaloïdes au sein du liquide ; 3° sur la faculté que possède l'éther, employé en suffisante quantité, de s'emparer des alcaloïdes mis ainsi en liberté.

Quand on veut rechercher un alcaloïde dans le tissu d’un

organe, comme le foie, le cœur, lès poumons, etc., oii le diVise eh petits fragments, on mouille la masse avec de l’aléoot pur et concentré ; on exprime et l’on épuise avec de l’alcool le tissu de tontes les substances solubleS. On agit sur le liquide obtenu coin me pour un mélange de matières suspectes et d’alcool, d’après lai marche suivante : on commencé par additionner les matières avec le double de leur poids d’alcôol pur et concentré; on ajoute ensuite, suivant la quantité et l’état de la matière suspecte, un et demi ou deux grammes d’acide tartriquè ; on introduit le mélange dans un ballon qu’on chauffe à 70 ou 75 degrés. Après le refroidissement, - on filtre et on lave la partie insoluble avec de l’alcool concentré; lé liquide filtré ‘est évaporé dahs le vide ou dans un courant d’air à une température ne dépassant pas 35 degrés.

Si lé résidu renferme des corps gras ou des matières insolubles, on versé de nouveau le liquide sur ün filtre mouillé par de l’èau distillée; on évapore ensuite presque à' siccit'é dans" Té vide ou soUs une cloche au-dessus de l’acide sulfurique ConCentré.On reprendlerésidu par de l’alcool absôlüetfroid.Onévaporeralctiolà Pair libre,à la température ordinaire ou dans le vide. On dissout le résidu acide dans la plus petite quantité d’eau possible, on introduit la solution dans un petit flacon éprouvette, et l’on ajoute peu à peu du bicarbonate de potasse ou de soude pur et en poüdre,jusqu’àcë’q'ti’il tië se produise plus d’effervescence. On agite alôrs le tout avec quatre ou cinq fois son volume d’éther, 'èt l’on 1 aîjhÜ'donhe au : repôs. Quand l’éther est parfaitement éclairci, on en décante une petite partie dans une capsule de verre et on l’abandonne dans un lieu bien sep à l’évaporation spontanée.' L’alè'âloïde petit être liquide et volatil, oubolide et fixe. :

Villiets. 3

L’alcaloïde est liquide et volatil. — Dans ce cas, par l’évaporation de l’éther, il reste sur les parois de la capsule des stries liquides qui exhalent, dès qu’on chauffe la capsule, même avec la main, une odeur plus ou moins désagréable, plus ou moins piquante. Si l’on découvre quelque indice de la présence d’un alcaloïde volatil, on ajoute alors au contenu du flacon, dont on a décanté de petites quantités d’éther un ou deux centimètres cubes de potasse on de soude caustique en solution, et l’on agite le mélange. Après un repos convenable, on décante l’éther dans un flacon éprouvette; on épuise le mélange par trois ou quatre traitements à l’éther; et l’on réunit tout le liquide èthéré dans le même flacon. On verse ensuite dans cet éther, tenant l’alcaloïde en solution, un ou deux centimètres cubes d’eau acidulée par un cinquième de son poids d’acide sulfurique pur ; on agite pendant quelque temps et l’on abandonne au repos ; on décante l’éther surnageant et on lave le liquide acide à l’aide d’une nouvelle quantité d’éther. L’eau acidulée renferme l’alcaloïde à l’état de sulfate, tandis que l’éther retient les matières animales qu’il a enlevées à la solution alcaline.

Pour extraire l’alcaloïde de la solution du sulfate acide, on additionne celle-ci d’une solution aqueuse et concentrée de potasse ou de soude caustique; on agite et l’on épuise le mélange par l’éther. On abandonne la solution éthérée à la plus basse température possible, à l’évaporation spontanée ; l’alcaloïde reste pour résidu. Il s’agit de déterminer sa nature.

L'alcaloïde est solide et fixe. — Si le résidu laissé par l’évaporation de l’éther a donné dans la capsule un alca-

loïde solide, on ajoute une solution de potasse ou de soude en liquide, et l’on agite vivement avec l’éther, qui dissout l'alcaloïde devenu libre ; on épuise par l’éther, et par l’évaporation de ce liquide il reste sur les parois de la capsule un corps solide, mais plus souvent une liqueur incolore, laiteuse, tenant les corps solides en suspension ; l’odeur de la matière est animale, désagréable, mais nullement piquante. Elle bleuit d 'une manière permanente le papier de tournesol.

Il faut maintenant tâcher d’obtenir l’alcaloïde cristallisé : on verse quelques gouttes d’alcool dans la capsule qui renferme l’alcaloïde et l’on abandonne la solution à l’évaporation spontanée. Pour isoler l’alcaloïde des matières étrangères dont il peut être souillé, on verse dans la capsule quelques gouttes d’eau, très faiblement acidulée par l’acide sulfurique, et on les promène dans la capsule pour mettre le liquide acide en contact avec la matière; souvent les corps gras restent adhérents à la capsule et l’alcaloïde, passé à l’état de sulfate, se dissout dans l’eau acide. Ce liquide décanté est évaporé aux trois quarts dans le vide ou sous une cloche au-dessus de l’acide sulfurique. On verse ensuite dans le résidu une solution très concentrée de carbonate de potasse pur et l’on reprend le tout par de Y alcool absolu. Celui-ci dissout l’alcaloïde et laisse le sulfate de potasse et l’excès de carbonate de potasse. La solution alcoolique fournit l’alcaloïde cristallisé. On en détermine ensuite la nature par l’examen de ses diverses propriétés.

3. Je crois utile de faire plusieurs changements et additions.

1° Considérons en premier lieu les faits sur lesquels est

fondée la méthode; Parmi ces faits, Stas cite la solubilité des alcaloïdes dans les alcalis caustiquesiqui les ont mis en liberté dans leurs solutions acides. Il 'serait plus juste de dire que la méthode de Stas est applicable malgré cette solubilité,-car il est bien plus .facile de dissoudre par l’éther lès alcaloïdes précipités, que de les enlever à leurs solutions; quel que soit le dissolvant ; dans.ce dernier cas, il se fait un partage entre l’éther et lie dissolvant, partage dont les proportions sont déterminées par un certain coefficient variable avec les diverses conditions, et ce n’est théoriquement qu’après un nombre infini de traitements par l’éther que l’on enlèvera tout l’alcaloïde contenu dans le dissolvant. Au contraire, si l’alcaloïde est précipité à l’état insoluble de sa solution, ce partage ne se produit plus, et l’éther peut enlever en une seule fois tout l’alcaloïde précipité, si celui-ci y est suffisamment soluble,

Du reste, ce fait de la solubilité des.alcaloïdes dans les alcalis a été admis, sans démonstration, pour beaucoup d’alcaloïdes, et est peut-être faux dans beaucpup.de cas.

Pour cette double raison, il est bon de supprimer ce fait dans l’exposition des principes de la méthode, de Stas. Mais cette objection ne change rien à la méthode.

, 2°Unefoisqu’aprèsletraitementdes matières suspectes par l'alcool et l’évaporation de ce dernier on a obtenu, dans un état de pureté plusou moins grand,une solution aqueuse acide des selsd’alcaloïdes,ontraitecette dissolution par le bicarbonate de potasse ou de soude,pour mettre en liberté l’alcaloïde.

L’emploi des bicarbonates est excellent; ils do.ivent, toutes les fois qu’ils pourront suffire à déplacer l’alcaloïde, être préférés aux carbonates alcalins et surtout aux alcalis caustiques, qui peuvent altérer et même détruire certains alcaloïdes et surtout certains glucosides dont ; la

recherche . se fait simultanément,. Cependant ils ne suffi sent pas toujours,; les alcaloïdes ljqujdes en général, tels que la conine, la.nicotine, la pelletiérine, ne sont pas mis en liberté parle bicarbonate de soude, etsiil’on agitait Je mélange avec l’éther on nejre.tipera.it pas, l’alcaloïde. li en est de môme, de plusieurs alcaloïdes solides (ex.: llaoonitine;- la- vératrine, etc.).: Ces divers alcaloïdes ; ne seraient mis en liberté qu’à chaud par le bicarbonate, c’est-à-dire qu’après la dissociation de ce dernier et sa transformation en carbonate neutre. L’emploi des bicarbonates constitue môme un moyen de séparation de certains alcaloïdes.(1). Pour ces alcaloïdes, seulement l’emploi des carbonates.,ou des alcalis caustiques sera nécessaire.)

Il est donc naturel dans la recherche des alcaloïdes de faire usage en premier lieu des bicarbonates pour déplacer les alcaloïdes qui pourront être mis en liberté par ce corps, et de ne se servir des alcalis qu’après s’être assuré que les bicarbonates n’ont pas diction, ou après avoir extrait complètement les alcaloïdes que l’on peut extraire avecdes bicarbonates dans le cas où l’on supposerait qu’il peut rester dans les solutions suspectes d’autres alcaloïdes précipitables seulement par les alcalis.

Dans la méthode de Stas, telle quelle est exposée, on se sert des bicarbonates pour mettre les alcaloïdes en liberté. On agite avec l’éther et l’on évapore une portion de. cet éther. Puis, si le résidu de l’évaporation paraît contenir.un alcaloïde on ajoute au liquide dans lequel on a mis le bi-

(1) C’est ainsi que Tanrét a séparé les alcaloïdes du grenadier en traitant la solution de leurs sels mélangés, d’abord par du bicarbonate en ayant soin de saturer la solution d’acid.e carbonique, ce qui lui a donné la pseudopelletiérine et,,1a, niêthylpelleüêrine, puis par la potasse qui a mis en liberté la pelletiérine et Visopelletiérine.

carbonate de soude et par-dessus lequel se trouve le reste de l’éther, une solution de potasse caustique ou de soude caustique. Comme on le voit, on aurait pu se servir tout de suite de la potasse et de la soude, et on ne fait pas, en réalité, un traitement par le bicarbonate. L’emploi de la potasse dans ces conditions n’aurait peut-être pas d’inconvénient si tout l’alcaloïde mis en liberté par le bicarbonate était dissous dans l’éther surnageant, il échapperait peutêtre ainsi à l’action nuisible de l’alcali ; mais ce cas n’a presque jamais lieu, à cause du peu de solubilité dans l’éther (1). Du reste, comme on peut le voir, on fait encore usage plus tard de solutions concentrées de potasse ou de carbonate de potasse.

Remarquons, en outre, que si l’on se bornait à cet essai préliminaire consistant à évaporer un peu de l’éther avec lequel on a agité la liqueur acide traitée par le bicarbonate, on pourrait laisser passer certains alcaloïdes. Stas, paraît avoir pu mettre en liberté, d’après la méthode décrite plus haut, des alcaloïdes liquides tels que la conine au moyen du’bicarbonate ; cela tient évidemment à ce que le bicarbonate qu’il employait était partiellement dissocié, et contenait du carbonate de soude, comme cela a lieu souvent pour les bicarbonates du commerce pulvérisés.

3° Avant de traiter par un alcali, libre, carbonaté, ou bicarbonaté le liquide aqueux acide, contenant en dissolution les solutions impures des sels des métalloïdes, Otto recommande avec raison de soumettre à un premier traitement par l’éther cette solution acide, après l'avoir incomplètement neutralisée si elle est trop acide. On enlève ainsi

(1) Quelquefois les alcaloïdes sont plus solubles dans l’eau que dans l’êther; en général, ce n’est qu’après plusieurs traitements par l’éther que l’on épuise le mélange.

les matières colorantes qui gênent plus tard les réactious Ce traitement est très avantageux dans la recherche des alcaloïdes contenus dans l’urine et dans la bile, car il enlève l’urée et les acides biliaires. La présence de ces derniers surtout peut avoir de graves inconvénients à cause des réactions colorées qu’ils peuvent produire.

Ce traitement isole aussi un certain nombre de substances toxiques, telles que la colchicine, la picrotoxine, la digitaline, etc., qui devront être recherchées dans le résidu de l’évaporation.

4. Au risque de répéter des détails précédemment décrits, je vais, en tenant compte des observations précédentes, reprendre, pour plus de netteté, le procédé que l’on doit suivre pour rechercher un poison organique dans des matières suspectes.

Avant tout, il y a lieu de faire une remarque essentielle. Dans le procédé de Stas, on a à traiter par l’éther une solution alcaline pouvant contenir en dissolution un alcaloïde. Dans ce cas, un traitement unique par l’éther n’enlève pas tout l’alcaloïde, mais n’en enlève qu’une certaine fraction déterminée par un coefficient qui déperfd de la solubilité de l’alcaloïde dans l’éther et dans la solution alcaline, de sorte qu’il est nécessaire de faire plusieurs traitements par l’éther pour enlever tout l'alcaloïde, ou à peu près. Le nombre de traitements nécessaires sera d’autant plus petit que la solubilité de l’alcaloïde dans la solution alcaline sera plus faible; or, cette solubilité sera, le plus souvent, la plus petite possible, si la solution alcaline ne contient pas d’alcool.

Il sera donc utile :

1° Lorsqu’on évaporera une solution alcoolique d’un alcaloïde ou de ses sels pour la traiter ensuite par l'eau,

avant de l’agiter avec l’éther, d’évaporer suffisamment poür qu’il ne resté plusd’alcool. ■ ,

2° De n’employer que de l’éther soigneusement lavé,, c’est-à-dire ne contenant plus d’alcool qu’il puisse céder à une liqueur aqueuse.

La méthode repose sur les faits suivants, qui présentent quelques exceptions (voir p. 40 et 41).

4° Les alcaloïdes libres sont solubles dans Véther :

2° Les sels acides des alcaloïdes sont plus solubles clans l'eau que dans l’éther ;

3° Les sels des alcaloïdes en solution sont décomposés par lès alcalis, leurs: carbonates, et* en général, par leurs bicarbonates. ■

Il en résulte, en premier lieu, que si l’on traite une solution acide d’umalcaloïde par un alcali, libre, carbonaté.et dans le plus grand nombre de cas par un bicarbonate alcalin, et si l’on agite cette solution avec de. l’éther, celui-ci s’emparera de tout ou partie de l’alcalo'j'df mis en liberté ; qu'emsecofid lièuy si l’on ajoute une solution d’un alcaloïde dans l’ét’her avec de l’eau acidulée, l’alcaloïde sera enlevé à l’éther, à )’état de sel dissous dans l’eau.

Nous allons dorfner maintenant la marche de'l’opé« ration. . ,

I. On peutavoiiriairechercher un alcaloïde dans des aliments, le contenu de l’estomac, le tissu d’un organe (foie, ccé'ùr; poumons, etc-.). Si les masses suspectes; ont été ad-r ditionnées d’eàui(l)vonles concentre au bain-marie après les avdir néndues légèrement acides.

On divise ces matières en petits fragments,, ejt^ les

. ■ (i)jpourla recherche de l'acide prussique ou du phosphore.

mouille avec de l’alcool pur et concentrée On ajoute de l’acide tartrique jusqu’à réaction acide bien nette, en évitant d’en ajouter un trop grand excès (1 ou 2 grammes suffisent en général)^ et on fait digérer le mélange dans un ballon à une température inférieure au point d’ébullition de l’alcool. On filtre, on exprime et l’on épuise avec de l’alcool concentré.

On évapore ensuite le liquide filtré dans le vide au-dessus de l’acide sulfurique, ou dans un courant d’air (1) à température ne dépassant pas 35», ou plus simplement au bain-marie (Otto)., .

Par l’évaporation de la solution alcoolique, il se sépare souvent des corps gras et des matières insolubles. On sépare le liquide aqueux en le versant sur un filtre mouillé avec de l’eau. On évapore ensuite presque à siccité dans le vide ou sous une cloche au-dessus de l’acide sulfurique, ou au bain-marie.

Le résidu est épuisé par de l’alcool absolu et froid ajouté par petites portions successives. On verse cet alcool sur un filtre imbibé d’alcool, on évapore complètement à l’air libre, à la température ordinaire, ou dans le vide. On dissout le résidu acide dans la plus petite quantité d’eau possible On introduit la solution dans un flacon éprouvette, environ dix fois aussi grand que le volume de la solution. On a ainsi, à l’état impur, les alcaloïdes en solution acide.

II. On traite cette solution acide par l’éther, ce qui enlève des impuretés et permet aussi d’isoler des glucosides

{\) Pour cela, on introduit le liquide dans une cornue tubulée, chauffée au bain-marie, et, communiquant avec un aspirateur ou une ' trompe.

Villi(

ou des alcaloïdes dont les sels sont plus ou moins dissociés par d’eau. Ce traitement, par l’éther, doit être réitéré jusqu’à ce qu’une nouvelle quantité d’éther ne se colore plus.

III. On ajoute peu à peu à la solution aqueuse acide qui reste du bicarbonate de potasse ou de soude pur et en poudre, non dissociés (on pourra prendre des cristaux de bicarbonate de potasse non effleuris), jusqu’à ce qu’il ne se produise plus d’effervescence. On en ajoute encore un excès. Puis on agite le tout avec quatre ou cinq lois son volume d’éther, et l’on abandonne au repos. Quand l’éther est parfaitement éclairci, on en décante une petite quantité dans une capsule de verre et l’abandonne à l’évaporation sous une cloche au-dessus de l’acide sulfurique, On examine le résidu. L’existence d’un alcaloïde liquide en solution dans l’éther sera indiquée par des stries liquides se formant sur les parois, et exhalant, dès qu’on chauffe, même avec la main, une odeur plus ou moins caractéristique ; le résidu pourra être solide. Dans les deux cas, on constatera le goût de ce résidu, on examinera la réaction au tournesol, en se rappelant toutefois que beaucoup d’alcaloïdes n’ont pas d’action sur le tournesol ; on regardera si le résidu bleuit ce dernier d’une façon permanente ou non, enfin, l’on vérifiera l’existence d’un alcaloïde en ajoutant une goutte d’eau, une goutte d’acide acétique étendue et essayant l’action de l’iodure double de mercure et de potassium, de l’iodure de potassium ioduré.

Si l’on a ainsi constaté l’existence d’un alcaloïde, liquide ou solide, on décante l’éther contenu dans le flacon, et on le filtre, on traite de nouveau le mélange par l’éther, autant de fois qu’il estnécessaire pour l’épuiser sensiblement,

ce que l’on .reconnaît avec les réactifs et l’on réunit tout l’éther dans un même flacon. On a ainsi les alcaloïdes en dissolution dans l’éther.

IV. Nous distinguerons maintenant deux cas suivant que le résidu obtenu dans l’essai préliminaire est liquide ou solide.

Le résidu est liquide et volatil. — On agite l’eau provenant des divers traitements avec un ou deux centimètres cubes d’acide sulfurique dilué au cinquième. On agite pendant quelque temps et l’on abandonne au repos. On décante l’éther surnageant. L’eau acidulée renferme l’alcaloïde à l’état de 1 sulfate acide. On l’isolé en ajoutant à celle-ci un excès de bicarbonate de potasse, et épuisant avec l'éther. On évapbré ce dernier dans une petite capsule par portions successives, à une basse température, et l’alcaloïde reste comme résidu. Ou en détermine la nature.

Le résidu est solide et fixe. — On évapore l’éther provenant des divers traitements par portions successives dans une petite capsule. On obtient sur les parois de la capsule un corps solide, ou plus souvent un liquide laiteux tenant des corps solides en suspension.

Il faut alors tâcher d’obtenir l’alcaloïde cristallisé. On verse quelques gouttes d’alcool dans la capsule qui renferme l'alcaloïde, et l’on abandonne la solution à l’évaporation spontanée. Pour isoler l’aicaioîde des matières étrangères dont il peut être souillé, on verse dans la capsule quelques gouttes d’acide sulfurique très étendu, et on les promène dans la capsule pour mettre le liquide acide en contact avec la matière. L'alcaloïde passé en solution à

l’état de sulfate, et les matières étrangères restent souvent adhérentes à la capsule. On décante le liquide, et on l’évapore dans le vide ou sous'une cloche au-dessus de J’acide sulfurique, sans pousser cependant l’évaporation trop loin afin d’éviter une carbonisation. On ajoute ensuite au résidu un excès de bicarbonate de potasse et on reprend le tout par l’alcool absolu. Celui-ci dissout l'alcaloïde et laisse les sels alcalins; par évaporation, on obtient l’alcaloïde cristallisé ou non. On en détermine la nature.

V. On fait subir un traitement analogue à la solution aqueuse qui reste dans le flacon-éprouvette et qu’on a traitée par le bicarbonate de potasse ; mais cette fois, au lieu de bicarbonate, on emploie une solution de potasse ou de soude. On opère de même l’essai préliminaire et le traitement final, en remplaçant le bicarbonate de potasse par une solution de potasse caustique et dans le dernier traitement dans le cas d’un alcaloïde solide par une solution saturée de carbonate neutre de potasse.

Il sera bon toutefois de ne pas traiter toute la solution aqueuse par la potasse et d’en réserver une portion pour rechercher les glucosides très altérables, tels que la valdivine, qui par l’action de la potasse se dédoublerait immédiatement en produits mal déterminés; de sorte qu’il ne resterait plus aucune trace d’un empoisonnement par un corps de ce genre.

VI. La matière toxique solide ou liquide une fois isolée dans un état de pureté aussi parfait que possible, on en prélève de très petites quantités, ce qui se fait facilement en faisant tomber avec une baguette de verre des gouttes de la solution éthérée sur des capsules de porcelaine ou

des verres de montre, afin de vérifier les réactions colorées ou la formation des précipités. L’introduction des solutions de réactifs se fait de même. Souvent il est avantageux de mettre les gouttes du liquide à essayer et celles du réactif les unes à coté des autres, et de les laisser couler ensemble peu à peu.

Il sera souvent fort utile d’étudier au microscope les précités formés et de les comparer avec ceux donnés avec les substances auxquelles on cherchera à identifier les produits obtenus.

Cette méthode permet d’isoler un grand nombre d’alcaloïdes à un état de pureté suffisant. Nous verrons quell s sont les restrictions que l’on doit faire à son emploi.

5. L’emploi de cette méthode est surtout limité par l’insolubilité de quelques alcaloïdes dans l’éther.

Plusieurs chimistes ont cherché à remédier à cette difficulté en remplaçant l’éther par un autre dissolvant, l’éther acétique (surtout dans la recherche de la morphine), le chloroforme, etc. Mais il n’existe pas de dissolvant qui convienne également à tous les cas qui peuvent se présenter.

6. Méthode de Erdmann et Uslar .—Erdmann et Uslar ont employé comme dissolvant l’alcool amylique. Leur procédé, qui du reste repose sur un principe analogue à celui de la méthode de Stas, est fondé :

1° Sur la solubilité des alcaloïdes dansl’alcool amylique;

2° Sur l’insolubilité dans ces liquides des sels des alcaloïdes.

Les matières suspectes étant divisées aussi finement que possible, on en forme une bouillie avec de l’eau acidulée

par l'acide chlorhydrique. On laisse digérer pendant une heure ou deux vers 70 à80 degrés ; on passe le liquide dans un linge, et on recommence deux ou trois fois la digestion. Après quoi lès liqueurs réunies sont filtrées, neutralisées pat l’ammoniaque et évaporées au bain-marie, après addition de sable quartzeux. Le résidu desséché et pulvérisé est traité par l'alcool amylique chaud qui enlève les alcaloïdes, en même temps qu’il dissout des matières grassès et colorantes. Pour séparer ces. dernières on filtre à chaud cet alcool amylique et on l’agite vigoureusement environ avec fO fois sonvolumed’eaü acidulée par l’acide chlorhydrique, qui dissout l’alcaloï'dè en laissant les matières étrangères. On décante l’alcool et on épuise le liquide aVec de l’alcool amylique, jusqu’à ce qu’il n’enlève plus d’impuretés. Puis on concentre la solution aqueuse et on la sature par l’âmmoniaque; enfin on l’agité avec de l'alcool amylique chaud, qui dissout l’alcaloïde et qu'on évapore ; l’alcaloïde reste comme résidu.

Ce procédé n’est pas appliable aux alcaloïdes volatils; en outre il n’est pas d’un usage plus général que le procédé de Stas, l’alcool amylique n’étant pas plus que l’éther un dissolvant de tous les alcaloïdes. Il exige en outre l’emploi d’alcool amylique dont les vapeurs sont désagréables et nuisibles.

7. Méthode de Dragendorff. — En réalité toute méthode reposant sur l’emploi d’un seul dissolvant manque de généralité. Un seul dissolvant ne peut en effet enléver tous les alcaloïdes en présence de l’eau. De pfùs' des alcaloïdes divers peuvent être simultanément en présence. On peut se proposer de les séparer.Dragendorff a fondé un procédé de séparation dans lequel on emploie successivement des

dissolvants divers. On peut ainsi faire agir un dissolvant approprié à la matière que l’on veut isoler. De plus, on peut d’après la solubilité des diverses substances dans les divers dissolvants, séparer ces derniers en plusieurs groupes, en commençant par faire agir les liquides qui les dissolvent en moins grande quantité. Cette méthode, présente surtout, il faut l’avouer, un intérêt théorique; il est rare en effet que l’on ait à rechercher plusieurs alcaloïdes simultanément dans des recherches légales , et il nous paraît préférable dans ces recherches de faire d’abord usage d’un procédé fondé sur l’emploi d’un dissolvant unique qui dissolve le plus grand nombre d’alcaloïdes possible.

Les dissolvants employés par Dragendorff sont : la benzine, l’alcool amylique, le chloroforme et le pétrole (les parties volatiles entre 35 et 80 degrés), et l’on soumet à l’action de ces dissolvants d’abord le liquide suspect acidulé, puis le liquide rendu alcalin par de l’ammoniaque. Résumons rapidement le procédé de l’auteur.

1° Les matières suspectes, divisées au besoin, sont soumises à la digestion pendant quelques heures avec de l’eau aciduléeavec l’acidesulfuriqueàla température de 40 à5 : 0°. On exprime, on filtre et on renouvelle l'extraction â deux ou trois reprises différentes. Ce traitement, il est vraf, peut avoir pour inconvénient de dédoubler certains glucosides. On pourra y remédier en faisant la digestion, dans ce cas, à la température ordinaire, ou en présence de l’acide acétique.

2° Les liquides acides sont évaporés, à consistance sirupeuse (excepté dans les cas précédents); on mélange le résidu avec un volume triple ou quadruple d’alcool et on laisse digérer le tout pendant vingt-quatlre heures. On fil-

tre pour séparer les matières étrangères qui se sont déposées et on lave le filtre avec de l’alcool à 70°.

3° Le liquide filtré est distillé dans une cornue, jusqu’à ce que tout l’alcool soit évaporé. Le résidu aqueux, étendu d’eau s’il est nécessaire, est filtré dans un grand flacon; on y verse du pétrole et l’on agite le mélange de temps en temps. On attend que les deux couches se soient séparées et on enlève le pétrole par décantation. Le traitement par le pétrole doit être recommencé jusqu’à ce que l’action du dissolvant soit épuisée. La solution dans le pétrole est répartie dans des verres de montre et abandonnée àl’évapo • ration spontanée. On étudie le résidu.

4° La solution acide est sonmise ensuite à l’action dissolvante de la benzine, jusqu’à ce que la benzine n’abandonne qu’un résidu insignifiant. On décante la couche supérieure et I on s’assure de la nature du résidu. La benzine enlève ainsi un nouveau groupe de composés.

5° La sol ution acide aqueuse, après ces deux traitements par le pétrole et la benzine, est soumise à l'action du chloroforme qu’on lave avec de l’eau, et qu’on évapore. Le chloroforme dissout ainsi un certain nombre d’alcaloïdes et sur tout de glucosides.

6° On enlève au liquide la benzine etle chloroforme qu’il retient en solution en l’agitant avec du pétrole, on le neutralise ensuite avec un excès d’ammoniaque.

7 U La solution ammoniacale est soumise ensuite à l’action du pétrole à la température ordinaire.

8° Elle est ensuite traitée par la benzine.

9» On traite le liquide par le chloroforme.

10o On. épuise enfin le liquide ammoniacal par l’alcool amylique (1).

Comme on le voit lamétbode de Drâgendorff exige un nombre d’opérations fort considérable; Elle présente en outre un autre inconvénient c’est que les alcaloïdes solubles dans certains dissolvants ne sont pas absolument insolubles dans les autres.Il en résulte qu’on ne peutséparer nettement en plusieurs groupes les divers, alcaloïdes d’après leurs solubilités dans les divers dissolvants, et que tel corps qui devrait être obtenu dans une opération ultérieure peutêtre obtenu dans une opération précédente, si l’on a suffisamment épuisé l’action du dissolvant qne l’on emploie dans cette dernière.

8. Quand il s’agit de djaire la . recherche spéciale d’un poison, on pe ; ut varier la méthode, d’extraction et choisir un diiSsolyant approprié. Ce n’est là qu’un problème d’analyse chimique immédiate.AuasiayQns-nouseusoin dans ce qui suit, à propos de chaque alcaloïde, d’indiquer les dissolvants dans lesquels il e^t soluble. Ce qui donne immédiatement la meilleure méthode à employer dans chaque cas. ;1)

Il est bien évident, ainsi que nous l’avons dit, qu’aucune méthqde d’extraction ne peut permettra d’isoler tous les poisons organiques connus. Aucune méthode, pas plus celle de Stas qu’aucune autre, n'a jamais été soumise à pareille épreuve, et d’ailleurs le nombre des poisons organiques s'accroît de jour en jour;, ..les ..çjçgep^ionsj à ces méthodes tendent donc à devenir de plus en plus nombreu-

(1) Si l’on veut chercher là curarine, i\ faudra dans une onzième opération évaporer le liquide ammbniacal et repfèndré lé résidu paît lé chloroforme.

Villiers. 5

ses. Avant tout, dans la recherche particulière des divers poisons, on devra toujours, autant du moins qu’il sera possible, faire une recherche préliminaire en plaçant de petites quantités de la matière toxique que l’on recherche dans des conditions d’expérience aussi voisines que possible de celles où l’on se trouve, et ne commencer la véritable recherche toxicologique qu’après avoir isolé et caractérisé cette dernière; on comparera les réactions et les propriétés du poison ainsi isolé avec celles du produit retiré des matières suspectes.

9. On peut, dans certains cas, se servir pour isoler les alcaloïdes de méthodes différentes et qui ne sont plus fondées sur l’emploi des dissolvants. C’est ainsi qu’on peut précipiter l’alcaloïde par un des réactifs que nous étudierons plus loin, et traiter le précipité par une méthode appropriée. Mais il faut éviter d’introduire de la sorte des composés toxiques dans les matières suspectes.

10. Le noir animal lavé peut encote être employé pour isoler les poisons. Ce corps en absorbe en effet un grand nombre ; on peut ensuite les retirer au moyen de dissolvants qui les enlèvent au charbon. Ce procédé a été appliqué par Graham et Hofmann à la recherche de la strychnine dans la bière. Il avait déjà été employé par Macadam pour rechercher cet alcaloïde dans les cadavres.

Nous ne parlerons pas de la recherche des alcaloïdes par la dialyse, qui donne rarement des résultats.

11. Expérimentation physiologique. — Les réactions des alcaloïdes, souvent fondées sur des phénomènes de coloration produits par les divers réactifs, ne se produisent

pas toujours avec une netteté parfaite, car elles sont plus ou moins masquées par les impuretés qui accompagnent toujoursles alcaïlodes dans l’état oùon peut les retirer dans les recherches toxicologiques. Ces réactions, du reste, ne sont pas touj ours caractéristiques ; souvent même les matières toxiques que l’on cherche à reconnaître n’offrent pas de réaction caractéristique. Il est indispensable, pour déterminer ces dernières, d’essayer leuraction sur les animaux. C’est ce qu’on appelle l'expérimentation physiologique. On ne devra pas négliger de s’en servir aussi comme contrôle, lorsqu’on aura pu déterminer un poison d’après ses réactions chimiques.

Cette méthode peut donner, dans un grand nombre de cas, des indications d’une grande sûreté; c’est ainsi que l’atropine peut être caractérisée nettement par la dilatation de la pupille, la strychnine par son action tétanique, la digitaline par son action sur les battements du cœur.

La matière suspecte pourra être administrée aux animaux par la bouche, et dans ce cas, on devra, autant que possible, choisir des animaux qui ne puissent vomir et se débarrasser du poison. En général il sera préférable d’employer la méthode des injections hypodermiques, surtout si l’on ne dispose que de peu de matière.

Le chimiste devra réserver au physiologiste, toutes les fois qu’il pourra le faire, la partie physiologique de ces expériences et se borner à préparer les matières suspectes.

Par les expériences physiologiques, on pourra, si l’on n’a pas isolé la substance toxique dans un état de pureté plus ou moins absolu, se contenter de faire digérer les organes par de l’alcool, de filtrer et d’évaporer jusqu’à consistance molle; l’extrait résultant pourra être essayé sur les animaux.

Le choix des animaux pour les expériences est fort important, et l’on ne doit pas oublier que certains atiimaux, notamment de la famille des rongeurs, sont plus ou moins

rebelles à l’action de certains poisons.

12. Rappelons enfin pour terminer, que lorsque des plantes ou des débris de plantes toxiques auront été administrés comme poisons, l’examen botanique des débris végétaux trouvés dans l’estomac pourra souvent mettre sur la voie de la nature d'e ces poisons.