CONTINUITÉ PROTOPLASMIQUE DES CELLULES ÉPIDERMIQUES

L'existence de celle continuité protoplasmique est rendue vraisemblable par les nombreuses ponctuations qui garnissent les cloisons latérales et aussi par l'observation suivante (fig. 240). Il s’agit de l’épiderme externe d’une feuille coupée transversalement après un long séjour dans lalcool. Dans chaque cellule, on constate que la masse protoplasmique plasmolysée s’est détachée de la paroi, excepté le long des cloisons latérales au niveau des ponctuations.

Mais pour démontrer d’une façon péremptoire le fait soupçonné, il faut recourir à un procédé analogue à celui de M. Gardiner. Dans la figure 244, un épiderme vu de face a élé traité comme il sera dit plus loin : les cloisons latérales fortement gonflées et en partie détruites permettent de voir des prolongements protoplasmiques qui, au niveau de chaque poneiuation, se rendent d’une cellule à Pautre. Lorsqu'ils n'ont pas été rompus par un gonflement exagéré des cloisons, ces prolongements paraissent parfaitement continus, même quand ils sont examinés au moyen d'objectifs à immersion.

Le procédé imaginé par M. Gardiner pour mettre en évidence la continuilé protoplasmique des cellules dans l’albumen corné de diverses plantes, ne peut s'appliquer à l'épiderme du Tradescantia. Après l’action de lacide sulfurique, les cellules épidermiques sont si fragiles qu'il est impossible de les laver et de les colorer convenablement. J'ai done été amené à modifier le procédé de la façon suivante :

Les lambeaux d’épiderme, arrachés d’une feuille bien fraiche, sont déposés pendant une heure dans la teinture d’iode, afin d'opérer la fixation du protoplasme. J'ai employé la teinture d’iode des pharmaciens diluée de son volume d'alcool absolu. Les lambeaux d’épiderme sont ensuite lavés dans de l'alcool absolu jusqu’à complète décoloration, puis ils sont colorés à lhématox yline : pour cela, une solution aqueuse d’alun de potasse à 2 °/ est additionnée de quelques gouttes d’une solution alcoolique concentrée d’hématoxyline ceristallisée. Le bain colorant doit être extrêmement foncé, opaque même en couche de 3 ou 4 millimètres d'épaisseur. Après un séjour de vingt-quatre

SUR LE TRADESCANTIA VIRGINICA, ETC. 165

heures dans ce bain, les lambeaux d’épiderme sont devenus absolument noirs, toutes les parties de la cellule, y compris la membrane, étant fortement colorées.

Une petite goutte d'acide sulfurique concentrée est alors étalée sur une lame de verre; un lambeau d’épiderme coloré, rapidement lavé à l’eau, puis épongé sur du papier buvard, est déposé sur la mince couche d'acide. L'épiderme devient instantanément rouge, il s’'éclaireit et se dilate en tous sens. On laisse l'acide agir pendant un temps variable de quinze à trente secondes, puis on laisse tomber sur la préparation une goutte de glycérine diluée de son volume d’eau, et finalement on couvre d’une lamelle. L'observation doit se faire immédiatement.

La membrane cellulaire gonflée et complètement décolorée est presque partout détruite; le protoplasme et le noyau possèdent une teinte rouge, comme s'ils avaient été colorés au carmin, Après quelques jours, cette coloration disparait. Si l’on veut conserver les préparations plus longtemps, il convient de neutraliser l’acide par de l’eau ammoniacale avant de mettre la glycérine. La coloration présente alors une teinte brune analogue à celle du brun de Bismarck.

Pour donner de bons résultats, ce procédé exige une certaine expérience : l’action de l'acide ne doit pas être trop prolongée ; il faut éviter aussi que la glycérine et l’eau ammoniacale ne produisent une contraction violente de l’épiderme dilaté par l'acide, Il est bon de faire reposer la lamelle sur deux bandelettes de papier, de facon à ne pas écraser l’objet. L'expérience réussit difficilement avec des feuilles vieilles, parce que, dans ces feuilles, les membranes cellulaires résistent davantage à l'acide, tandis que les utricules protoplasmiques se désagrègent plus facilement. On choisira donc, en été, des feuilles vertes nouvellement formées; en hiver, on se servira de jeunes feuilles contenues dans les pousses hivernantes, dans les régions où les stomates sont déjà formés.

Appliqué à l’albumen du Dattier, ce nouveau procédé réussit moins bien, parce que la coloration est peu accentuée. IT donnera, je pense, de bons résultats dans tous les tissus mous et chez les Algues.

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