H. — DOSAGE DE L'AZOTE PURIQUE

L'azote purique total comprend, d'une part, l'azote de l'acide urique, et d'autre part, l’azote des bases puriques, dont les principales sont les aminopurines (adénine et guanine) et les oxypurines (hypoxanthine et xanthine).

Deux méthodes permettent d'isoler ces corps sous forme de combinaison spécifique. Par le procédé SALKOWSKI, ils sont isolés à l’état de purates argentico-magnésiens ; par celui de KRUGER, à l’état de composés cuivreux.

Nous nous sommes servi le plus souvent de cette dernière méthode ; toutefois, pour les liquides d’excrétion et les liqui-

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des cavitaires qui contiennent très peu d’azote, il nous a paru utile d'utiliser comparativement les deux méthodes, afin d'éviter autant que possible les causes d'erreur. Le cas échéant, nous indiquerons la méthode qui a été employée.

Pour doser par le procédé SALKowsKkI l’azote purique contenu dans les liquides d’excrétion ou cavitaires, on prélève 200 cem. du liquide, que l’on additionne d’un excès d’ammoniaque. Filtrer pour séparer les phosphates alcalino-terreux. Dans le filtrat ciair on ajoute 20 cem. de solution argentico-magnésienne N/10 de DENIGÈS.

Il arrive qu'aucun troubie net ne se manifeste immédiatement, mais en laissant reposer le liquide un temps suffisant (24 heures et plus) il se dépose souvent au fond du vase un précipité, que l’on isole par décantation du liquide surnageant, suivie de centrifugation du liquide contenant en suspension le précipité. Celui-ci est ensuite lavé à l’eau ammoniacale, et isolé de nouveau par centrifugation et décantation. Il est ensuite mis en suspension dans l’eau, et versé, sans en perdre, dans une capsule de porcelaine. Pour chasser complètement l’ammoniaque on ajoute une pincée de magnésie calcinée, et l'on chauffe au bain-marie à 100° jusqu'à forte concentration. Lorsque tout l’'ammoniaque est chassé, on verse dans la capsule 3 à 4 ccm. du mélange à parties égales d'acide sulfurique pur et de sulfate de cuivre à 1 p. 100 ; on introduit le tout, y compris les eaux de lavage, dans un ballon Kjeldahl. Après transformation en ammoniaque et distillation, l’azote purique total est finalement titré au formol.

Nous avons fait quelques essais pour isoler par le procédé SALKOWSKI les bases puriques à partir du précipité PhW, mais soit parce que les bases puriques ne précipitent pas entièrement par le réactif PhW (Burian et HALL), soit parce que le traitement barytique en retient une partie, les résultats obtenus ont “té plus faibles et nous ont paru moins satisfaisants.

La précipitation de composés puriques par le procédé KRUGER a été faite elle aussi directement, sans concentration préalable,

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Pour les liquides ne contenant que très peu d'azote total la prise est encore de 200 ccem., que l’on introduit dans une fiole conique. Le liquide est alcalinisé légèrement en présence de phtaléine avec de la soude à 10 p. 100, puis décoloré par addition de quelques gouttes de bisulfite de soude. Filtrer, s’il se forme un trouble ou un précipité. Dans 1e liquide clair on ajoute en agitant 3 ccm. de solution d’acétate de soude à 10 p. 100, 2 ccm. de la solution commerciale de bisulfite de soude et quelques gouttes de sulfate de cuivre à 10 p. 100. Le liquide contenu dans une fiole conique (pyrex) de 250 cem. est porté pendant 4 minutes à 100°, pour faciliter la formation des combinaisons cuivreuses.

Le précipité, souvent mélangé à de l’oxydule de cuivre, est isolé par centrifugation, lavé à l’eau bouillante dans le tube à centrifugeur, et isolé de nouveau par centrifugation. On le fait passer ensuite sans en perdre dans un ballon Kjeldahl. Finalement on dose au formol l’azote qu'il contient comme l'azote du précipité argentico-magnésien.

Pour les extraits désalbuminés d'organes, la technique est la même, avec cette différence cependant que, vu la quantité beaucoup plus forte d’azote purique qu'ils contiennent, il suffit d'opérer sur 50 ccm. de liquide, correspondant à 2 gr. d’organe.

L'’azote purique ainsi dosé directement, c’est-à-dire sans hydrolyse préalable, est de l’azote purique libre. Il eut été certainement intéressant de doser comparativement l'azote purique après hydrolyse contenu dans les extraits désalbuminés, et de déterminer ainsi l’azote purique combiné. Mais ces recherches n’ont pu qu'être amorcées ; elles dépassent d’ailleurs le cadre de ce travail.