urée + (av) 63,13. » | 0,033 3,08/9, 21! 2x. RO

06e COINS ap. 0 32,0! 0,9916! 69,4016. 98! 13,50! 134,38

D acétamide av.) 68.52) % |oosss) 4,0x/9,91| 140,60 | seule tap.! 56,82! 401 0,1641! 3,8512,534 » 140,83 2. acélamide + Çav.! 64.521 » 0.0334! 3,0819,21! 9,80! 156,40 |

Bee. CIBCOENIE fap.! 42,37/ 10,21 0.4173 11,90/3.75) 0 |! 14158 | 3 ncélamide + Çav.!) 68.32) 0,0334! 3.08/9.21| 19,60| 160, 20 1066 CIBCOENIE ap.) 28.78) 17,1] 0,4875) 18.90/3,87| 0 14458 |

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Et EE

Visiblement, l'addition de sel ammoniaeal n'a pas tout à fait la mème action avee les deux amides. La consommation du sucre est accélérée, mais les doses croissantes d'ammoniaque qui produisent une diminution légère bien que manifeste, du rendement en levure dans Île nihec à urée, donnent lieu au contraire à des récoltes de plus en plus abondantes dans le eus de l'acétamide.

Ce qu'il est important de constater, c'est l'utilisation de l'azote amidé en présence de l'azote ammoniaeal. Tant que ce dernier est en quantité peu élevée, il est absorbé en totalité, mais là encore les résultats ne sont pas identiques avec les deux amides, Avec Furée, on peut voir que même lorsque tou l'ammoniaque fourni à la levure est absorbé par elle, iv à encore utilisation d'une partie importante de l'urée du mien: avec l'acétamide, au contraire, lorsque l'on fournit de lacérare d'ammonium, la levure n'utilise guère que cette dernière forme d'azote, qui disparait d'abord en totalité, au moins tant qu'elle représente une fraction de l'azote total n'exeédant pas 1/7 à 18. HE faut aussi ne pas oublier qu'il s'agit de fermentations interrompues après un temps assez court : on est en droit de supposer qu'après une période d'accoutumance de quelques jours, la levure qui a d'abord consommé l'aliment azoté Le plus facile à assimiler se serait rejetée sur l'acétamide et aurait peu à peu fait disparaitre cette dernière.

La quantité d'azote lrouvée dans la levure est plus petite que la quantité d'azote ammoniacal absorbée, parce que évidemment la levure à reieté dans le liquide de culture un certain nombre de produits azotés provenant de ses échanges nutritifs. C'est seulement à partir d'une certaine dose de sel ammoniacal que la levure formée au début de la culture aux dépens de ce dernier a continué à se développer en utilisant une partie de l'acétamide présente. Le tableau suivant, calculé au moyen des résultats expérimentaux ci-dessus, montre bien cette utili-

sation

— Ai —

Urée Acétamide “zote utilisé par la levure azote utilisé par la levure Re — : rs D No: des provenant provenant provenant provenant ballons en de de en de de toialité COHNH: l'urée totalité CHCONH! l'acétamide mgr. togr. n:a2r, tugr. mer. mer.

65,02 36,90 28,02 30,28 27,50 2,78 66,22 63,30 2,92 50,82 43,40 7,42 (Les chiffres on caractères gras indiquent que la totalité de l'ammoniaque présent à été absorbé).

est évident que les chiffres indiquant la quantité d'azote utilisé provenant suit de l'urée. soit de l'acétamide, ne sont que des minima. Il n'est pas possible, en etfet, de connaitre directement ces quantités sans faire le dosage soit de l'urée, soit de l'acétamide présents dans les milieux de culture : c’est là une opération qui, pour présenter quelque chance d'exactitude, esttrès pénible. Elle doit comporter, en effet, l'isolement intégral de ces substances, auxquelles se trouvent mélangés les produits azotés et non azotés de la vie cellulaire. En raison de l'altérabilité de certains de ces produits, il est évident que des dosages directs des amides, par transformation en ammoniaque, donneraient des résultats inexaets et v ‘aisemblablement trop élevés. J'ai renoncé à un travail aussi pénible, en raison de l'intérêt limité que présenterait cette détermination.

On pourrait objecter, il est vrai, que à partir du moment où la levure renferme plus d'azote que la quantité d'azote ammonacal disparu, l'excédent, au lieu d'être emprunté à l'amide, provient de lutilisation des résidus azotés de la vie cellulaire,

d'abord rejetés dans les premiers stades du développement,

puis employés de nouveau, faute d'un meilleur aliment

azote,

Dans Le cas de Furée, Fobjeetion tombe à cause de l'importance des quantités dont il s'agit : la levure n'a pu emprunter les 2/3 ou la moitif de son azote à ses produits d'exerétion.

Avec l'acétamide, on pourrait opposer à cette objection l'aruument suivant (qui est d'ailleurs valable aussi dans le cas de l'urée) : pourquoi la levure, qui est si avide d'ammoniaque, en laisserait-elle une partie inutilisée, si elle était réduiie à

s'adresser aux résidus de son activité ? Lorsque la levure en

inanition emploie les déchets de la vie cellulaire pour reconstruire de nouvelles cellules, il est exceptionnel que sa quantité augmente; à@ fortiori cette hypothèse est-elle inadmissible quand on voit l'accroissement considérable du poids de levure produit dans les mélanges d'acétamide et d'acétate d'ammonium (p. 42). Enfin, il est rare que le phénomène en question apparaisse dans des fermentations d'aussi courte durée que celles qui nous oceupent (5 jours).

La conclusion à tirer de éette expérience, cest plutôt que l'ammoniaque parait nécessaire à la levure, mème lorsque celle-ci peut disposer d'une autre source d'azote, au moins dans les premiers temps de son développement, En etlet, en poursuivant une culture faite en présence d'acétamide avec un peu d'acétate d'ammonium pendant un temps suffisant, Futilisation de l'amide augmente notablement.

En voici la preuve : deux ballons FErxsacu contenant 300 ce. de milieu minéral glucosé à 20 0/0 recoivent une méme quantité de solution d'acétamide et d'acétate d'ammeonium. stérilisée par iltration à la bougie, corresposdant à 97 mer. d'azote amidé et 12 mgr. 6 d'azote ammoniacal., On ensemence avec une mème quantité d'émulsion de levure pure dans l'eau stérile eton place à l'étuve à 26°. Voici Les résultats obtenus :

Poids de Azole Azote 0 0 Azote Azole Glucose Alcool lalevure de la de la sine total du

present torme séchée levure levure niacal liquide

gr. cc gr. mur. mygr. mur Témoin . . 56,90 » 0,1190 8,30 , 7,21 DE ER Après 5 jours . 47,30 3,5 0,3983 23.10 5,80 0 96, Après 10 jours . 28,42 143 0,6826 32.40 4,75 0 87,5

Lei, l'azote ammoniacal à entièrement disparu après 5 jours. Mais si à ce moment la quantité d'acétamide utilisée es faible