ÉTUDE DES PRODUITS D'HYDROLYSE DE LA ZYMOCASÉINE ET DE LA CÉRÉVISINE
Les seules données qu’il soit possible de se procurer sur la constitution des protéiques extraits de la levure nous seront fournies par l’hydrolyse de ces produits. J’ai eu recours d’abord à l’hydrolyse acide. "
Répartition de l'azote
Pour étudier en premier lieu la répartition de l'azote dans la molécule, j'ai utilisé la méthode décrite par Hausmanx (1). Elle consiste, en principe, à hydrolyser le protéique en expérience par ébullition avec un acide, neutraliser, doser l’ammoniaque formée, puis séparer les acides aminés en deux groupes au moyen de l'acide phosphotungstique.
Voici le mode opératoire suivi, qui correspond à peu près à celui indiqué par OsBorne et Harmis (2): ;
On prend environ 1 gr. de substance, préablement séchée jusqu’à poids constant et pesée, exactement et on fait bouillir pendant 8 heures au réfrigérant ascendant avec 20 ce. d'acide chlorhydrique concentré. Le liquide évaporé au bain-marie au
(1) HAuSmanN, Zeits. physiol. Chemie, t. 27, p. 95 (1899) et t. 29, p. 1436 (1900).
(2) OsBornE et Harris, J. of amer. chem. Society, t. 25; p. 323 (1903).
tiers de son volume est neutralisé au moyen de magnésie pure calcinée ; on ajoute un excès de magnésie et on distille, afin de déplacer l’ammoniaque, qui est titrée au fur et à mesure de son dégagement.
Le résidu, additionné d'acide chlorhvdrique jusqu'à réaction acide, est concentré au bain-marie; on sépare par filtration les substances humiques insolubles dans lesquelles on dose l’azote par la méthode de KieLoauz, et Le liquide filtré, amené au volume de 100 ce., est additionné de 5 ce. d'acide sulfurique puis précipité par un léger excès d’une solution d'acide phosphotungstique à 10 0/0 dans l'acide sulfurique à 5 0/0. Après 24 heures, on filtre, on lave avec une solution sulfurique étendue d’acide phosphotungstique, eton dose dans Le précipité l'azote hasique, attribuable surtout aux acides diaminés. Un dosage fait dans le liquide résiduel donne l'azote des acides monoaminés et permet le contrôle de l’opération entière.
L'opération faite dans ces conditions donne des résultats assez comparables, ainsi qu'il est facile de s’en rendre compte en pratiquant deux déterminations successives.
1° Zymocaséine. — On utilise deux échantillons séchés dans le vide sulfurique, pulvérisés et rendus bien homogènes. On sèche environ 2 gr. de chacun à 110° et on pèse deux fractions Let IL. On a les résultats suivants :
Il IT
gr. Gr Poids de substance... 30 0,958 0,943 Trouvé azote ammoniacal, . . 0,01064 0,0105 Correspondant en 0/0à . . . ASAT 4,11 Trouvé azote des substances humi- >
ŒUÉS ENS NP ee rene 0.00623 0,00392 Correspondant en 0/0 à . . . 0,65 0,41
- Trouvé azote du précipité phospho-
DUNSSLIQUES RE ANSE 0,0413 6,0396 Soit en azote diaminé 0/0 . | . 4,31 4,920 Trouvé azote du liquide résiduel. 0,0935 0,0917 Soit en azote monoaminé 0/0. . 9,76 9,72
Il est intéressant de grouper ces chiffres en un tableau en les
rapprochant de ceux qui ont été obtenus par OsBorne pour la caséine (1), à l’aide d’une méthode analogue :
Zymocaséine || Zymocaséine |(aséine du lait Il IT
pr, à Lo d oo ©
VS sé TE les ITS | se
ca | SS |SE | Sè [Se | Sà
Sa = | SS De Dee de
azote ammoniacal . . . .| 4,44 6,86| 1,11| 6,89] 1,61| 10,30 = ShümIqUuEs. 2. 0,65| 4,02! 0,41|- 2,54] 0,21] 1,30
—. diaminé ou basique.| 4,31] 26,67! 4,20] 26,07] 3,49) 22,40
— monoaminé.. …... 9,76| 60,39 9,72] 60,33] #0,31| 66,00
— lotal déterminé . .| 15,83] 97,94] 15,44] 95,83] 15,62/100,00 AUAICU-AE SE EE :.. .| 46,16] 100,00! 16,11/100,00
Comme on le voit, la différence porte surtout sur l’ammoniaque, qui est produite en plus grande quantité dans l'hydrolyse de la caséine du lait. Néanmoins, 1] y a une concordance assez satisfaisante : tout au plus peut-on remarquer que la caséine du lait fournit un peu moins d'azote basique que celle de la levure.
2° Cérévisine. — Les échantillons employés provenaient de coagulums obtenus à l’ébullition, séchés à 110° et pulvérisés - finement. On les débarrasse des matières étrangères solubles par épuisements répétés à l’eau bouillante. Après dessiccation à 110°, on pèse deux fractions qui sont soumise à l’hydrolyse. On a : :
CT Il ; gr. gr.
Poids de substance, . . , , 4,064 1,5303 Trouvé azote ammoniacal, . . 0,01022 0,01456 Correspondant en 0/0 à . . . 0,96 0,95 Trouvé azote des substances humi- :
QUEBLE Pr ER re 0,00294 0,00392
(1) Ossorne, The vegetable Proteins, London 1916, p. 57,
