CHAPITRE IV

Recherche et présence de l’'émulsine.

L’émulsine est un ferment soluble très répandu chez les végétaux et les animaux. |

Comme les diastases des sucres, elle agit en fixant sur la substance à transformer, une ou plusieurs molécules d’eau ; mais elle en diffère cependant, en ce qu’elle exerce son action, indifféremment sur tout un groupe de composés appelés glucosides.

Les glucosides sont des principes divers, abondants dans les cellules végétales. On peut les considérer comme une combinaison du glucose avec des corps de la série grasse ou aromatique à fonclion acide, alcool ou phénol. Ces glucosides sont susceptibles de se dédoubler par hydratation ; et, dans les cellules vivantes, ce dédoublement, comme tant d’autres, est effectué par un enzyme : l’émulsine ou synaptase.

Le type de son action est celle qu’elle exerce sur l’amygdaline ; mais cette action s’exerce aussi sur d’autres composés tels que : la salicine, l’esculine, la coniférine, l’hélicine, l'arbutine, etc. Elle se fait sur tous suivant le même plan. Il y a hydrolysation et dédoublement avec mise en liberté de glucose, et d’une autre substance, variable suivant la nature du glucoside.

La présence de l’émulsine dans les végétaux supérieurs a été signalée dès 1847, par Liebig et Wobler. Les nombreuses recherches qui se sont poursuivies à ce sujet ont montré qu’un ferment analogue, sinon identique, est abondamment répandu dans tout le règne végétal, où sa présence coïncide le plus souvent avec des glucosides.

On a dressé de longues listes de végétaux renfermant de l’émulsine ; enfin, j'ai indiqué au début de ce travail, que sa présence avait été signalée chez quelques champignons inférieurs.

Je l’ai moi-même recherchée et décelée chez les espèces parasites

suivantes :

Aspergillus fumigatus — Rhizopus equinus — Rhizomucor parasiticus —

Trichophyton gypseum — Achorion Shænleini — Microsporum canis,

OU

Ces champignons végètent mal sur une solution d’amygdaline à 3 p. 100. Les trois premiers forment un voile très mince, léger et poudreux ; les autres s’y développent à peine. En ajoutant un peu de peptone au liquide de culture, la croissance se fait plus aisément et l'on peut percevoir, au boul de 5 à 6 jours d'exposition à l’étuve à 30e, une légère odeur d’amandes amères qui annonce le dédoublement de l’amygdaline.

Mais, jti constaté pour ces espèces que la production d'émulsine n’est pas subordonnée à la présence de glucosides dans le bouillon de culture. La méthode que j'ai utilisée diffère un peu de celle que MM. Bourquelot et Hérissey ont employé pour l’Aspergillus niger ; c’est celle qui m’a servi dans les expériences précédentes, et que j'ai indiquée en un paragraphe spécial.

Les liquides de culture glucosés peptonisés, ou glycérinés peptonisés ne renfermant plus trace de g'ucose ou de peptone, sont filtrés à la bougie Berkefeld et introduits purement dans des tubes à essai contenant une solution d’amygdaline, elle-même stérile. Cette solution a été stérilisée ; non à l’autoclave, où la température élevée est susceptible de lui faire subir un commencement de dédoublement, mais par filtration à la bougie poreuse (1). Elle est ensuite immédiatement répartie par 10 ‘© dans des tubes à essai stérilisés.

Pour chaque espèce de champignons étudiés, les tubes préparés sont au nombre de cinq : À, B, C, D, E.

A est additionné de 4 tt du filtrat de culture glucosé peptonisé.

B -— 4 ce — — — bouilli.

C — 4 du filtrat de culture glycériné peptonisé. D — 4 cc — — bouilli.

E est laissé tel, sans addit'on de liquide diastasifère.

Les tubes B, D, E constitient un groupe de témoins nécessaires pour caractériser l’allure diastasique de la réaction de dédoublement.

Tous les tubes sont soumis à l’étuve à 37°. L'équation chimique qui représente le dédoublement de l’amygdaline est la suivante :

COH27AZOM + 2 H?20 = 2 CSHL206 + CTH6O + HCAz

(1) L'emploi des antiseptiques habituels, comme préservatifs de la contamination jar les germes de l'air, offre 1ci quelques inconvénients qu'il importe d éviter, Outre celui de n'offrir qu'une asepcie restreinte, suffisante cependant pour des recherches qualitatives, outre aussi l'influence entravante qu'ils peuvent exercer sur la dias.ase, ils offrent encore le désavantage comme le thymol, le phénol, le chioroforme, de masqner assez fortement l'odeur d'amandes amères qui annonce le dédoublement de l'amygdaline, De, plus, le chlorotorme offre le grave inconvénient de réduire la liqueur de Fehling et par suite de s’opposer à tout dosage r.goureux du sucie réducteur mis en liberte,