DIGESTIONS DE LA FIBRINE ET DE L'OVALBUMINE COAGULÉE

Comme pour la recherche de la présure et de la caséase, j'ai directement soumis à l'activité vitale des champignons, une substance nutritive dont la nature albuminoïcle, convenablement choisie, nécessite

Tintervention de l'enzyme cherché ; c'était, soit la fibrine, soitl'albumine. Suivant la réaction du milieu, deux diastases peuvent agir, la pepsine ou la trypsine.

Mes expériences ont été conduites dé la façon suivante :

Dans desmatras à fond plat, sont déposés quelques flocons de fibrine fraîche et bien lavée, puis un peu de bouillon légèrement peptonisé ; le tout est stérilisé à 110 . Les matras d'une première série d'expériences sont amenés à une acidité de 3 p. lOOQ en HGl ; ceux d'une autre série sont amenés à une alcalinité de 3 p. 1000 en CO^Na^ ; puis, chaque matras est ensemencé et déposé dans l'étuve à 28».

Les six espèces de champignon décrites dans le premier chapitre ont été soumises à cet essai ; ce sont désormais les seules qui serviront dans les expériences ultérieures.

J'ai constaté qu'en milieu nutritif acide, ces champignons ne tardent pas, au cours de leur végétation, à neutraliser l'acidité ambiante et à rendre le milieu alcalin. Si une digestion de l'albumine a lieu dans ces conditions, elle ne saura être imputable qu'à une diastase trypsique, la pepsine n'opérant qu'en milieu acide. Ce fait est d'ailleurs général, car jusqu'ici, l'on ne connaît pas de microbes producteurs de pepsine, du moins à l'extérieur. Ils accomplissent leurs fonctions digestives en milieu neutre ou alcalin, et quand le milieu ne possède pas cette réaction, ils ne tardent pas à la lui donner par leur processus biologique.

Les champignons parasites, étudiés ici, ne semblent donc pas faire exception à la règle. Dans ces conditions bien déterminées de milieu^ j'ai noté un pouvoir albumiholytique nettement accusé pour certaines espèces; nul, ou à peu près, pour d'autres. La désagrégation de la fibrine et la production de peptones sont particulièrement nettes avec Asperglllus fumigatas, Tricha ph\j ton ggpseam, Achorion Shœnleini et Mlcrosporiim canis. Seuls, Rkizopus equlna^ et Rklzomucor parasit'icns^ deux Macorinées, bien qu'ayant v^^gété à peu près normalement, n'ont pas montré de digestion appréciable. En présence de faits aussi dissemblables, j'ai tenu à renouveler l'expérience et à la conduire sous une autre forme. Les mêmes espèces parasites ont été, cette fois, cultivées sur un milieu reconnu propre à leur donner un développement optimum, et constitué à cet effet par 3 p. 100 de glucose avec 1 p. 100 de peptone Chassaing. Au fond de chaque matras, j'ai placé avant l'ensemencement, de petits cylindres de verre, de 3 V" ^^ longueur sur 3 ">/"» de diamètre intérieur, contenant de l'ovalbumine coagulée ; c'est la méthode des tubes de Mette.

Dans ces conditions de pureté absolue, et d'alcalinité assurée par avance, la diastase trypsique exerce son action avec facilité; et cette action se traduit par une désagrégation du cylindre d'albumine qui se creuse à ses deux extrémités. Cette méthode permet même un certain degré de comparaison entre deux pouvoirs albuminolytiques différents. Voici les résultats que cette méthode m'a donnés ; ils confirment les précédents.

Aspergillus fumigatus. — Après 20 jours d'exposition à l'étuve à 28'', le tube d'albumine accuse une digestion de 10"^°» à chaque extrémité ; au bout d'un mois et demi, le tube est complètement vide.

Trichophijton gypseum. — Au bout du 30^ jour il y a 7 à 8"™/'" d'albumine digérés aux deux extrémités du tube de Mette ; au bout de 40 jours, iO™/«n.

Achorion Shœnlelni et Microsporum canis. — Au boutade 30 jours, 7mrii (Je digestion à chaque extrémité ; 12"»"» au bout de 40 jours.

Rhizopus equinus. — Au 20° jour, aucune trace de digestion n'est apparente ; au 30^ jour et les jours suivants, l'on ne peut constater qu'une très légère excavation aux deux extrémités du tube d'albumine.

Bhizomucor parasiticus. — Aucune désagrégation de la fibrine n'est appréciable après 40 et même 50 jours; le cylindre d'albumine reste absolument intact ; la réaction est néanmoins fortement alcaline. Ce dernier fait est resté constant en des expériences plusieurs fois renouvelées. *

D'autre part, je me suis assuré que les digestions obtenues dans les autres cas, n'étaient nullement le fait des principes entrant dans la composition du bouillon de culture; car d«s tubes d'albumine, identiques aux premiers et servant de témoins, n'ont jamais subi la moindre . altération au sein des mêmes bouillons non ensemencés et placés à la même température.

La substitution de la glycérine au glucose, dans le bouillon de culture m'a conduit à l'observation d'une particularité intéressante. Dans ce cas, les résultats concernant la digestion trypsique restent sensiblement les mêmes pour chaque espèce, sauf pour le Rhizopus equinus. Cette Mucorinée se conduit alors de tout autre façon que dans l'expérience précédente ; elle accuse maintenant un pouvoir albuminolytique considérable. C'est ainsi que le contenu d'un tube de Mette, de même provenance que les autres, disparaît, entièrement digéré, après 22 jours d'exposition à l'étuve à 30'. La digestion se manifeste déjà au sixième jour qui suit Tensemencement, par une disparition notable d'albumine aux deux terminaisons du tube de verre ; elle

progresse rapidement, el au vingt-deuxième jour, il ne reste plus au fond du matras que le tube vide entouré de quelques minimes débris d'albumine, brunis sur toutes les faces.

La fibrine substituée au tube de Mette est aussi très rapidement digérée dans ces conditions.

Ne fallait-il pas, en cette expérience, incriminer la glycérine ellemême ? Je me suis assuré qu'il n'en était rien; car un tube de Mette reste parfaitement indemne au sein du bouillon glycérine non ensemencé, dans l'étuve à 30». D'ailleurs, cette éventualité ne s'étant pas manifestée avec le Rhizomucor jjarasiticus, qui continue, dans ces conditions à ne pas produire de trypsine, toute idée d'intervention de la glycérine doit être écartée.

Je dois dire que ces expériences, recommencées un nombre considérable de fois, m'ont présenté cette intéressante variation d'une façon constante. Il y a donc là, entre deux genres cependant assez voisins, une différence physiologique bien nette qui pourra dans certains ca?, faciliter les déterminations, et qui constitue en même temps, un nouvel exemple de l'influence que peut exercer la composition du milieu nutritif sur les sécrétions diastasiques.